目的:橋本氏甲狀腺炎（Hashimoto’s thyroiditis,HT）是一種臨床上常見的慢性自身免疫性疾病,其病理損傷主要表現(xiàn)為甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞及甲狀腺濾泡腔的受損,導(dǎo)致甲狀腺相關(guān)自身抗體的產(chǎn)生以及甲狀腺激素合成異常,引起多器官功能受損,會對人體造成較嚴(yán)重的長期慢性損害。HT發(fā)病原因多樣,其中碘過量攝入是重要原因之一,但目前關(guān)于過量碘如何導(dǎo)致HT發(fā)病的機(jī)制暫不很明確。本研究旨在探討過量碘導(dǎo)致甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞損傷引起HT發(fā)病的具體機(jī)制,為HT病理研究提供新的方向,為HT臨床治療探索尋找新的干預(yù)靶點。方法:1.免疫印跡和免疫組化方法檢測橋本氏甲狀腺炎和單純性甲狀腺結(jié)節(jié)（作為對照）患者甲狀腺組織中細(xì)胞焦亡關(guān)鍵蛋白gasdermin D（GSDMD）的表達(dá)情況。2.用不同NaI濃度（0,1,10,20,50 mM）處理甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞（Nthyori 3-1）24 h后,免疫印跡方法檢測細(xì)胞中GSDMD-FL和GSDMD-N蛋白表達(dá)情況,評價細(xì)胞焦亡水平。3.用NaI（0,1,10,20,50 mM）處理Nthy-ori 3-1細(xì)胞24 h后,CCK-8試劑檢測甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞活... 

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略詞
第一章 緒論
    1.1 橋本氏甲狀腺炎
        1.1.1 簡介
        1.1.2 臨床表現(xiàn)
        1.1.3 流行病學(xué)
    1.2 碘
    1.3 活性氧
        1.3.1 活性氧介紹
        1.3.2 活性氧與甲狀腺
        1.3.3 研究現(xiàn)狀
    1.4 NF-κB信號通路
    1.5 細(xì)胞焦亡
        1.5.1 簡介
        1.5.2 細(xì)胞焦亡與自身免疫性疾病
        1.5.3 細(xì)胞焦亡與橋本氏甲狀腺炎
    1.6 白介素-1β
        1.6.1 簡介
        1.6.2 白細(xì)胞介素-1β與疾病
    1.7 小結(jié)
第二章 研究目的、內(nèi)容、方法、意義及實驗方案設(shè)計
    2.1 研究目的
    2.2 研究內(nèi)容
    2.3 研究方法及技術(shù)
    2.4 研究意義
    2.5 實驗方案設(shè)計
        2.5.1 橋本氏甲狀腺炎及甲狀腺結(jié)節(jié)的甲狀腺組織中GSDMD、IL-1β表達(dá)水平
        2.5.2 過量碘對Nthy-ori3-1 細(xì)胞焦亡和IL-1β分泌的影響以及具體機(jī)制研究
第三章 實驗材料與方法
    3.1 臨床標(biāo)本收集
    3.2 主要試劑和材料
        3.2.1 細(xì)胞株
        3.2.2 相關(guān)抗體及主要試劑
            3.2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
            3.2.2.2 蛋白提取試劑
            3.2.2.3 Western blot主要抗體及相關(guān)試劑
            3.2.2.4 實驗相關(guān)檢測試劑盒
        3.2.3 主要儀器設(shè)備和耗材
    3.3 實驗方法
        3.3.1 免疫組織化學(xué)
        3.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.3.3 細(xì)胞內(nèi)活性氧檢測
            3.3.3.1 檢測原理
            3.3.3.2 活性氧檢測步驟
        3.3.4 免疫印跡
            3.3.4.1 蛋白提取
            3.3.4.2 蛋白含量測定
            3.3.4.3 電泳上樣樣品準(zhǔn)備
            3.3.4.4 蛋白電泳
        3.3.5 瞬時轉(zhuǎn)染
        3.3.6 ELISA檢測細(xì)胞上清中IL-1β含量
        3.3.7 CCK-8 檢測細(xì)胞活性
    3.4 統(tǒng)計學(xué)分析
第四章 實驗結(jié)果
    4.1 橋本氏甲狀腺炎組織中細(xì)胞焦亡水平升高
    4.2 過量碘對甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞焦亡的影響
    4.3 過量碘通過ROS-NF-κB通路誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡
    4.4 過量碘通過活化NLRP3 炎癥小體誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡
    4.5 細(xì)胞焦亡的異常激活促進(jìn)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞中IL-1β釋放
第五章 討論
第六章 主要結(jié)論及展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 工作展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3667147