本文關(guān)鍵詞：N-乙酰半胱氨酸對(duì)糖尿病大鼠腎臟足細(xì)胞的保護(hù)作用及其機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 足細(xì)胞即腎小囊臟層上皮細(xì)胞,是一種獨(dú)特的、終末分化細(xì)胞。足細(xì)胞作為腎小球?yàn)V過(guò)屏障結(jié)構(gòu)的重要組成部分,由于其特殊結(jié)構(gòu)和獨(dú)特膜蛋白分子決定了其在腎小球中的重要地位,也決定了其損傷在糖尿病腎病發(fā)生與發(fā)展中扮演重要角色。目前多項(xiàng)研究顯示足細(xì)胞數(shù)量和密度、足細(xì)胞裂孔隔膜及細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)改變、足細(xì)胞內(nèi)相關(guān)信號(hào)分子及信號(hào)通路的異常激活均與糖尿病腎病密切相關(guān)。本研究通過(guò)動(dòng)態(tài)觀察足細(xì)胞的標(biāo)志性蛋白WT1,足細(xì)胞裂孔隔膜的關(guān)鍵分子之一nephrin,由足細(xì)胞分泌在糖尿病腎病中發(fā)揮重要作用的VEGF蛋白表達(dá)水平,并給予NAC進(jìn)行干預(yù),探討NAC對(duì)于糖尿病大鼠腎臟足細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制。 方法： 1.以Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建立糖尿病模型(一次性STZ尾靜脈注射)。隨機(jī)分為正常、糖尿病及干預(yù)組,觀察時(shí)間為6周和12周。 2.檢測(cè)腎功能、尿蛋白；光鏡下觀察大鼠腎臟組織病理學(xué)改變,通過(guò)免疫組化法觀察nephrin、WT1及VEGF蛋白表達(dá)水平,通過(guò)Western blot法檢測(cè)足細(xì)胞裂孔隔膜蛋白nephrin表達(dá)水平。 3.應(yīng)用Image-Pro Plus6.0軟件分析免疫組化圖像平均IOD值,應(yīng)用Image J分析Western blot圖像目標(biāo)帶光密度值。各組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析(ANOVA)。 結(jié)果： 1.成功建立糖尿病大鼠模型。 2.與同期對(duì)照組相比,糖尿病組及干預(yù)組大鼠血糖明顯升高,體重顯著下降,尿量明顯增加。光鏡下可見糖尿病組大鼠腎小球體積增大,部分腎小球萎縮；系膜細(xì)胞及系膜基質(zhì)增生,系膜區(qū)明顯增寬,甚至彌漫性系膜硬化；大量腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生空泡變性,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),以上表現(xiàn)符合糖尿病腎病病理表現(xiàn)。NAC干預(yù)組與同期糖尿病組比較,系膜細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)增生減輕,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少。 3.糖尿病組及干預(yù)組大鼠腎臟nephrin表達(dá)水平顯著低于同期對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與同期糖尿病組相比,干預(yù)組nephrin表達(dá)水平有所升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。免疫組化染色可見,與正常組相比較,同期糖尿病組及干預(yù)組棕黃色物質(zhì)顏色變淺,排列方式發(fā)生改變。經(jīng)NAC干預(yù)后免疫組化染色顏色有所加深。 4.糖尿病組及干預(yù)組大鼠腎臟WT1免疫組化染色較同期對(duì)照組顏色變淡,平均IOD值明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。經(jīng)NAC干預(yù)后WT1免疫組化染色有所加深,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 5.與同期對(duì)照組相比,糖尿病組及干預(yù)組大鼠腎臟VEGF表達(dá)水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。糖尿病組及干預(yù)組大鼠腎臟VEGF免疫組化染色著色明顯增加。與同期糖尿病組相比,干預(yù)組大鼠腎臟VEGF表達(dá)水平有所下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),免疫組化染色后可見著色變淡。 結(jié)論： 1.成功建立糖尿病腎病大鼠模型,腎功能異常的同時(shí)出現(xiàn)腎組織nephrin、WTl表達(dá)減少,VEGF表達(dá)增加。 2.NAC治療可以減少尿蛋白排泄,具有腎臟保護(hù)作用。 3.NAC可能通過(guò)上調(diào)足細(xì)胞nephrin蛋白表達(dá)水平,維持裂孔隔膜結(jié)構(gòu)完整性；減少足細(xì)胞損傷及脫落；改善血管通透性,減少系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)增生等途徑發(fā)揮腎臟保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病腎病 足細(xì)胞 N-乙酰半胱氨酸 nephrin WT1 VEGF
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R587.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明11-12
• 前言12-15
• 研究現(xiàn)狀、成果12-14
• 研究目的、方法14-15
• 1. 研究對(duì)象15-18
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象15
• 1.2 主要儀器與設(shè)備15
• 1.3 藥品及試劑15-16
• 1.4 主要實(shí)驗(yàn)試劑的配制16-18
• 2. 研究方法18-25
• 2.1 第一次隨機(jī)分組18
• 2.2 造模18
• 2.3 第二次隨機(jī)分組18
• 2.4 干預(yù)方法18
• 2.5 標(biāo)本收集及指標(biāo)檢測(cè)18-19
• 2.6 腎組織病理學(xué)檢測(cè)19-21
• 2.7 Western-blot法檢測(cè)腎小球nephrin蛋白的表達(dá)21-25
• 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析25
• 3. 結(jié)果25-29
• 3.1 成功建立糖尿病大鼠模型25-27
• 3.2 各組大鼠光鏡下腎臟病理結(jié)果27-28
• 3.3 各組大鼠nephrin蛋白Western blot檢測(cè)的結(jié)果28-29
• 3.4 相關(guān)性分析29
• 4. 討論29-40
• 4.1 糖尿病腎病動(dòng)物模型的建立29-31
• 4.2 足細(xì)胞與糖尿病腎病31-37
• 4.3 NAC對(duì)糖尿病腎病的保護(hù)作用37-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-47
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明47-48
• 附錄48-51
• 綜述51-62
• 綜述參考文獻(xiàn)57-62
• 致謝62

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 葉仁群;謝嘉嘉;林國(guó)彬;曾紀(jì)斌;宋曉容;;補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)早期糖尿病腎病患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體Flt-1的影響[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2009年02期

2 劉同強(qiáng);馮曦;李娟娟;湯京華;龔蘇飛;;N-乙酰半胱氨酸對(duì)糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞的保護(hù)作用[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2009年10期

3 張?jiān)僦?王瑜;王烈;林克榮;;N-乙酰半胱氨酸對(duì)腸屏障功能障礙防治作用的研究現(xiàn)狀[J];臨床軍醫(yī)雜志;2007年05期

4 趙俐麗;葉山東;陳燕;范愛紅;;2型糖尿病患者尿nephrin排泄量的變化及其臨床意義[J];中國(guó)臨床保健雜志;2009年03期

5 劉同強(qiáng);馮曦;李娟娟;湯京華;龔蘇飛;;N-乙酰半胱氨酸對(duì)糖尿病腎病大鼠炎癥反應(yīng)的抑制作用[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2009年11期

6 高鵬霞;;N-乙酰-L-半胱氨酸減輕大鼠糖尿病腎病的機(jī)制探討[J];山西醫(yī)藥雜志;2011年03期

7 宋恩峰;劉晶晶;賈汝漢;韋桂蓮;任開明;;2型糖尿病腎病大鼠模型制備研究[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2007年18期

8 劉志紅,胡可斌,周虹,王建平,陳惠萍,黎磊石;2型糖尿病腎病患者腎組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其受體的變化[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2001年05期

9 劉志紅,李世軍,陳朝紅,曾彩虹,張波,周虹,黎磊石;糖尿病腎病患者足細(xì)胞病變的臨床病理特征[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2003年02期

10 金波;劉志紅;葛永純;謝紅浪;王少凡;伏幼娟;黎磊石;;腎活檢患者中糖尿病腎病流行病學(xué)特點(diǎn)的變遷[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2009年02期

  本文關(guān)鍵詞：N-乙酰半胱氨酸對(duì)糖尿病大鼠腎臟足細(xì)胞的保護(hù)作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：363470