氟中毒是一種地方性疾病,嚴(yán)重影響我國部分地區(qū)居民身心健康。其中氟骨癥是主要臨床和病理改變。氟中毒雖然病因清楚但發(fā)病機(jī)制迄今尚不明確。我們過去的研究發(fā)現(xiàn)成骨細(xì)胞（OB）功能活躍和骨轉(zhuǎn)換加快是氟骨癥的重要特征和多類骨科疾病的病理基礎(chǔ),而OB鈣穩(wěn)態(tài)的變化則是OB成骨功能增強(qiáng)的重要啟動環(huán)節(jié)。鈣敏感受體在調(diào)節(jié)維持體內(nèi)Ca2+穩(wěn)態(tài)過程中有決定性意義。同時,MAPK信號通路中P38、JNK以及ERK信號通路均在骨相分化方面起重要作用。既往研究發(fā)現(xiàn)氟化物可明顯刺激Ca SR和OB特異性轉(zhuǎn)錄因子RUNX2的表達(dá),并認(rèn)為氟刺激OB功能增強(qiáng)是氟骨癥發(fā)病的重要機(jī)制之一,但對其中間具體途徑以及之間的關(guān)聯(lián)尚不清楚。因此,本文將從CASR/MAPK信號通路入手,討論氟是否通過刺激Ca SR/MAPK信號通路,增強(qiáng)OB中RUNX2表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)OB成骨功能增強(qiáng),試圖發(fā)現(xiàn)Ca SR/MAPK信號通路在氟骨癥發(fā)生機(jī)制中的重要作用,為日后的研究提供重要的研究背景與理論依據(jù)。實驗方法:本實驗采用體外實驗方法。研究對象為MC3T3-E1 Subcone 14小鼠前成骨細(xì)胞細(xì)胞株。實驗分為四組:對照組,低氟組,中氟組,高氟組。含... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

1CaSR相關(guān)下游分子示意圖

第1章文獻(xiàn)綜述71.3.5MAPK信號通路絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）可以通過多種細(xì)胞外的刺激引起細(xì)胞核內(nèi)的相應(yīng)因子的變化，包括一些生長因子、激素、蛋白激酶等。由于MAPK可以在所有真核細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)，且與有絲分裂關(guān)系密切。其自身具有高度保守的三級酶促級聯(lián)反應(yīng)，能夠成冪次擴(kuò)大反映信號。因此，它在細(xì)胞的生命進(jìn)程中十分重要。MAPK信號通路在相應(yīng)因子刺激后可活化，并激活磷酸化的MKKK→MKK→MAPK[66-68]，具體的相關(guān)因子如下圖1.3.2所示，進(jìn)而啟動下游信號傳導(dǎo)。MAPK有P38、JNK、ERK和ERK5這幾類不同的亞型[66-68]，目前P38、JNK、ERK研究相對較多，它們參與大多數(shù)的細(xì)胞生理過程。由于級聯(lián)放大作用，在外界環(huán)境、細(xì)胞類型、上下游信號分子的變化下，MAPK信號通路所表達(dá)的生理變化也會有所不同。圖1.3.2MAPK信號通路示意圖1.3.5.1P38MAPK信號通路P38MAPK是酪氨酸磷酸化蛋白激酶的一種，共有360個氨基酸[69]。它是許多細(xì)胞交流信息、傳遞信息的聯(lián)絡(luò)點，同時也是多種細(xì)胞間共有的信號通路[70]。對細(xì)胞凋亡、生長、分化、轉(zhuǎn)錄、識別骨架等意義非凡[71]。任何外界環(huán)境的變化

第3章實驗結(jié)果25第3章實驗結(jié)果3.1鈣鈷法檢測成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性圖3.1.1成骨細(xì)胞ALP染色結(jié)果圖（16天×10）（e：對照組，f：低氟組，g：中氟組，h：高氟組）含氟及礦化誘導(dǎo)液培養(yǎng)OB16天后，ALP染色見圖3.1.1。與對照組相比，低、中氟組出現(xiàn)明顯的褐棕色陽性細(xì)胞。3.2染氟成骨細(xì)胞CaSR/MAPK通路因子mRNA、蛋白檢測3.2.1成骨細(xì)胞CaSRmRNA、蛋白檢測表3.2.1氟作用下成骨細(xì)胞CaSRmRNA水平(±s，n=3)劑量組氟濃度CaSR對照組0mg/L1低氟組2mg/L0.8706±0.0454*中氟組5mg/L0.9016±0.0334*高氟組10mg/L1.5950±0.0601**注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3599966