發(fā)布時(shí)間：2021-12-31 16:05

　　目的:通過建立過敏性哮喘小鼠模型,研究IgG受體FcγRⅡB和FcγRⅢA對小鼠過敏性哮喘的影響。方法:利用8-10周齡雄性野生型C57小鼠、FcγRⅢA^-/-小鼠和FcγRⅡB^-/-小鼠分別隨機(jī)各分成對照組和模型組,每組各5-6只。模型組均給予雞卵白蛋白（OVA）和氫氧化鋁（Alum）致敏,OVA霧化吸入激發(fā),對照組同一時(shí)間用等量磷酸鹽緩沖溶液（PBS）處理。末次激發(fā)24小時(shí)后進(jìn)行肺泡灌洗液（BALF）白細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù);用CCK8法檢測脾細(xì)胞增殖;通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測小鼠血清中OVA-特異性Ig E、OVA-特異性IgG及其亞型水平;采用流式cytometric beads array（CBA）法檢測各組小鼠血清、BALF及脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子水平;HE染色觀察肺組織病理變化,PAS染色檢測杯狀細(xì)胞黏液分泌情況。收集過敏性哮喘患者外周血標(biāo)本,檢測其IgE水平和FcγRⅡB、FcγRⅡA、FcγRⅢA基因表達(dá)。結(jié)果:與野生型模型組相比,血清中FcγRⅡB^-/-模型組OVA-特異性IgE水平... 

【文章來源】：貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

FcγRIIB和FcγRIIIA基因敲除鼠基因型鑒定

應(yīng)用 GraphPad Prism 6 軟件分析，兩個(gè)獨(dú)立樣本組間均數(shù)比較用 t 檢驗(yàn)，以P < 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P < 0.01 或 P < 0.001 為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P > 0.05 為差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 結(jié) 果2.1 小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)百分比從未經(jīng)任何處理的 WT 小鼠、FcγRIIB-/-和 FcγRIIIA-/-三種小鼠尾巴靜脈血中血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞（White blood cell, WBC）總數(shù)在 FcγRIIB-/-和FcγRIIIA-/-小鼠中較 WT 小鼠明顯降低（p < 0.01)，除嗜酸性粒細(xì)胞（Eosinophil）百分比在 FcγRIIB-/-小鼠中較 WT 小鼠降低（p < 0.05)外，淋巴細(xì)胞（Lymphocyte）、中性粒細(xì)胞（Neutrophil）及單核細(xì)胞（Monocyte）百分比在 WT 小鼠、FcγRIIB-/-和 FcγRIIIA-/-三種小鼠中無明顯差異（p > 0.05) (圖 3)。

16圖4 致敏和激發(fā)后的血清學(xué)反應(yīng)。WT、FcγRIIB-/-和FcγRIIIA-/-小鼠如圖2所示分別用OVA和氫氧化鋁（Alum）致敏和OVA霧化激發(fā)。（A）收集血清，用ELISA檢測OVA特異性IgE、IgG和IgG亞型。（B）流式CBA法檢測血清中的細(xì)胞因子。數(shù)據(jù)繪制的每個(gè)點(diǎn)代表每只小鼠，用均值表示。采用 t 檢驗(yàn)，*，**和 ***分別代表 p ≤ 0.05，p ≤0.01和 p ≤ 0.001。Fig. 4 Serum responses following asthmatic sensitization and provocation. Mice of wild type(WT), FcγRIIB-/-an

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3560556