目的探討脂肪干細胞（ASC）來源的外泌體在白色脂肪棕色化中的作用。方法分離培養(yǎng)并鑒定小鼠ASC細胞;慢病毒轉染構建過表達miR-27的ASC細胞;超高速離心提取正常及過表達miR-27的ASC細胞分泌的外泌體,實時熒光定量核酸擴增（qRT-PCR）分析外泌體中miR-27的表達量;高脂喂食構建肥胖小鼠模型,分別注射過表達miR-27外泌體（過表達組）、正常ASC外泌體（正常表達組）及生理鹽水（對照組）,在寒冷暴露條件下監(jiān)測體質量變化;剝離小鼠附睪皮下脂肪組織和肩胛骨脂肪組織,比較組織大小,蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測解偶聯(lián)蛋白1（UCP1）、過氧化物酶體增殖劑激活受體γ（PPARγ）、含PR結構域的鋅指蛋白16（PRDM16）、過氧化物酶體增殖子激活受體γ共激活因子1α（PGC-1α）的表達。結果成功提取ASC及其外泌體,并成功轉染miR-27;ASC及其外泌體中的miR-27顯著高于白色脂肪組織（P<0.05）。與對照組相比,過表達組及正常表達組的小鼠體質量下降幅度小,隨時間的增加效果更加明顯（P<0.05）。過表達組及正常表達組的小鼠的附睪皮下脂肪組織... 

【文章來源】：天津醫(yī)藥. 2020,48(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

ASC中外泌體的鑒定

免疫印跡法檢測UCP1、PPARγ、PRDM16、PGC-1α的表達

ASC剛貼壁的細胞呈圓形，培養(yǎng)24 h后細胞呈長梭形；培養(yǎng)第3代的ASC的形態(tài)，見圖1。流式細胞儀檢測顯示，CD34、CD45、CD133低表達，陽性率分別為6.43%、6.35%、0.09%;CD105與Sca-1高表達，陽性率為93.71%、92.62%，見圖2。2.2 外泌體的鑒定

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]脂肪源性含miR-27a外泌體通過抑制PPARγ誘導骨骼肌胰島素抵抗的作用機制研究[D]. 于洋.吉林大學 2018



本文編號：3550470