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多聚左旋精氨酸促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的NCI-H292細(xì)胞釋放炎癥因子IL-6、IL-8的信號通路研究

發(fā)布時間:2021-12-17 08:40
  目的:研究多聚左旋精氨酸(Poly-L-arginine, PLA)促進(jìn)脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)誘導(dǎo)的NCI-H292細(xì)胞釋放白介素-6(interleukin-6, IL-6、IL-8的表達(dá)及其發(fā)揮作用的信號通路機(jī)制。方法:1、細(xì)胞培養(yǎng)使用含有10%胎牛血清的RPMI1640常規(guī)培養(yǎng)液培養(yǎng)NCI-H292細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞生長狀況,每3-4天傳代1次;以約3×105/500μl密度,選取生長狀態(tài)優(yōu)良的細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板中。2、細(xì)胞因子IL-6、IL-8 mRNA和蛋白表達(dá)水平的測定按照實驗設(shè)計內(nèi)容分為空白組(培養(yǎng)液)、LPS組(5μg/ml)、PLA組(5μg/ml)、 LPS+PLA組、LPS+PLA+PD98059組、LPS+PLA+SB203580組、PD98059組、SB203580組、PLA+PD98059組、PLA+SB203580組、PD98059+SB203580組,并根據(jù)實驗分組要求,先加入ERKl/2抑制劑PD98059和p38 MAPK抑制劑SB203580,置于37℃ 5% C02培養(yǎng)箱孵育1h后,再加入PLA、LPS。按實驗要... 

【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】:57 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

多聚左旋精氨酸促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的NCI-H292細(xì)胞釋放炎癥因子IL-6、IL-8的信號通路研究


圖1.?Real-time?PC民參數(shù)設(shè)置??Figure?1.?Real-time?PCR?parameter?

解曲線,參數(shù)設(shè)置,再運(yùn)行,程序運(yùn)行


圖1.?Real-time?PC民參數(shù)設(shè)置??Figure?1.?Real-time?PCR?parameter?setting??程序運(yùn)行結(jié)束后,再運(yùn)行烙解曲線程序(圖2),通過烙解曲線來判斷擴(kuò)增產(chǎn)物,??最后按A?Act法完成數(shù)據(jù)分析。??17??

細(xì)胞,統(tǒng)計學(xué)意義,高更,表達(dá)水平


?安徽醫(yī)科大學(xué)碩去學(xué)位論文???對照組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(PO.OOl);與LPS組比較,LPS-PLA組増高更??明顯,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(PO.Ol);?LPS-PLA組正-6?mRNA表達(dá)水平較PLA??組明顯增高,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<〇.〇〇l)。LPS組和LPS-PLA組誘導(dǎo)的??NCI-H292細(xì)胞比-8?mRNA表達(dá)水平也顯著性增高(LPS組與對照組比較:P<0.05;??LPS-PLA組與對照組比較:PO.Ol),且LPS-PLA組増高更明顯(與LPS組比較;??P<0.01);與PLA組比較,LPS-PLA組正-8mRNA表達(dá)水平顯著增高(PO.05)。??(圖?3)。??AmmtB??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]嗜酸粒細(xì)胞趨化因子、白細(xì)胞介素8和白蛋白在支氣管哮喘中的臨床意義[J]. 張媛.  臨床薈萃. 2011(13)
[2]多項血清白介素水平在哮喘中的變化研究[J]. 潘麗娟,毛毅敏,孫瑜霞.  中國實驗診斷學(xué). 2010(08)
[3]支氣管哮喘患兒痰液嗜酸粒細(xì)胞及其陽離子蛋白水平的動態(tài)變化[J]. 許勇,林蔓彬.  廣東醫(yī)學(xué). 2010(02)
[4]哮喘青春期自然緩解者血嗜酸粒細(xì)胞陽離子蛋白、類胰蛋白酶和吸入性過敏原特異性IgE的變化[J]. 朱麗君,邵莉,姚蘇杭,許以平.  中國免疫學(xué)雜志. 2001(07)



本文編號:3539769

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