發(fā)布時(shí)間：2021-11-06 06:13

　　目的:1.觀察糖尿病大鼠的骨代謝改變、炎癥、自噬相關(guān)指標(biāo)的變化與TLR4表達(dá)的關(guān)系;2.探討TLR4基因敲除對糖尿病大鼠骨代謝改變、炎癥、自噬相關(guān)指標(biāo)的影響。方法:1.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):選用雄性普通SD大鼠和TLR4基因敲除SD大鼠各30只,隨機(jī)分為對照組（con組,n=15）和造模組（DM組,n=15）,con組予標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料,造模組予高糖高糖飼料（HSFDs）16周后,空腹腹腔注射1%STZ 30mg/kg,對照組予等量生理鹽水。72小時(shí)后尾靜脈采血,強(qiáng)生血糖儀檢測空腹血糖連續(xù)3天≥16.7mmol/L者確定為2型糖尿病大鼠;造模成功后觀察2周,con組繼續(xù)予普通喂養(yǎng)2周作為對照。2.骨代謝指標(biāo)與體成分檢測:DEXA法測定各組下肢、脊柱、全身骨密度（BMD）及全身體成分組成;檢測血清ALP、OCN和TRAP5b活性;HE染色法觀察近端股骨的骨組織形態(tài)學(xué);免疫組化法觀察股骨成骨細(xì)胞;Western Blot測定大鼠近端股骨BMP-2、Collagen I蛋白。3.炎癥相關(guān)指標(biāo):檢測血清IL1、IL6、TNF-α水平;Western Blot測定大鼠近端股骨TLR4、MyD88、NF-κB、p... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HSFDs16周后大鼠一般情況比較

圖1.2 HSFDs 16周后大鼠體重、體成分變化HSFDs 16 周后大鼠體重和體成分變化，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。注：a 表示與 SD-con 組比， P＜0.05；b 表示與 SD-HSFDs 組比，P＜0.05；c 表示與 TLR4KO-con 組比，P＜0.05。1.1.3.IPGTTHSFDs 16周后，禁食12小時(shí)。腹腔注射葡萄糖2g/kg，分別于0、15、30、60、90、120分鐘，尾靜脈采血、強(qiáng)生穩(wěn)豪型血糖儀檢測血糖。根據(jù)各點(diǎn)血糖值，繪制曲線，計(jì)算曲線下面積AUC。與control組比較，造模組AUC明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說明HSFDs 16周后大鼠的糖耐量減低。如圖 1.3 所示。A1

圖 1.3 HSFDs 16 周腹腔注射葡萄糖 2g/kg，分別于 0、15、3血糖儀檢測血糖。根據(jù)各點(diǎn)血糖值，繪制曲（A1,A2）表示所有 3 次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均*與SD-con組比，P<0.05；#與TLR4KO-c1.2 糖尿病大鼠選取糖耐量減低的大鼠，予禁食 12hcontrol組注射等劑量的生理鹽水。72小時(shí)mmol/L，并伴有明顯的多飲、多食、多尿功。在前期的實(shí)驗(yàn)中已利用此方法成功構(gòu)SD-DM組最后成活只數(shù)(n=12)，TLR4KO1.2.1造模后大鼠的一般情況SD-con 組一般狀態(tài)良好，活動(dòng)反應(yīng)靈組大鼠出現(xiàn)多飲、多食、多尿癥狀，反應(yīng)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Osteoporosis in diabetes mellitus: Possible cellular and molecular mechanisms[J]. Kannikar Wongdee,Narattaphol Charoenphandhu.  World Journal of Diabetes. 2011(03)

碩士論文
[1]Exendin-4改善成骨細(xì)胞糖毒性損傷與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及Toll樣受體4基因表達(dá)的關(guān)系[D]. 龔姣.福建醫(yī)科大學(xué) 2016
[2]西格列汀對糖尿病大鼠的骨保護(hù)作用及其與TLR4/NF-κB表達(dá)關(guān)系的研究[D]. 廖萌.福建醫(yī)科大學(xué) 2014



本文編號：3479321