目的:探索因嚴重感染、器官移植排斥反應(yīng)等臨床重大疾病所導致的胸腺退化和萎縮的可能機制,以期為臨床治療上述疾病引起的胸腺萎縮和T細胞免疫缺陷的重建提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。方法:采用GM-CSF和IL-4體外誘導EGFP^Tg/+小鼠骨髓細胞分化為髓源樹突狀細胞（bone marrow derived dendritic cell,BMDC）,經(jīng)LPS誘導活化成為成熟的DC后,心內(nèi)注射過繼到同品系小鼠體內(nèi),并通過流式細胞術(shù)檢測過繼小鼠胸腺中GFP⁺CD11c⁺細胞比例。流式細胞術(shù)檢測BMDC上Jagged1的表達水平,免疫熒光檢測Notch受體（Notch1和Notch3）在不同周齡的小鼠胸腺中的分布。將BMDC與小鼠胸腺上皮細胞系mTEC1共培養(yǎng)以及包被不同濃度的Jagged1重組蛋白與mTEC1細胞共培養(yǎng),Edu增殖試劑盒檢測mTEC1細胞增殖水平變化。在兩個共培養(yǎng)的體系中分別加入高濃度和低濃度γ分泌酶抑制劑DAPT處理,Edu增殖試劑盒檢測mTEC1細胞增殖水平的改變。最后構(gòu)建Notch3胞內(nèi)活化片段NICD3的慢病毒表... 

【文章來源】：江蘇大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠DC發(fā)育圖解

ged1/Notch3 信號抑制胸腺上皮細胞系 mTEC1 細胞增殖； 4℃預(yù)冷的 10%CaCl2-甘油，輕輕吹打重懸，0 μL/管，-80℃儲存。載體的構(gòu)建及擴增nk 中 Notch3 基因（NM_008716.2），NICD3 位，共計 1968bp，按照該序列進行人工合成包含D3 的 DNA 序列（生工生物工程（上海）股份有3.1，將合成的 NICD3 的 DNA 片段退火酶載體；

BMDC上MHC-Ⅱ,CD80,CD86的表達Fig4.1TheexpressionofMHC-Ⅱ,CD80,CD86inBMDC


本文編號：3458915