高糖飲食會誘發(fā)多種代謝性疾病,然而高糖攝入導(dǎo)致的損傷機制尚不清晰,該科學(xué)問題值得深入研究。本論文以家蠅（Musca domestica）為實驗材料,旨在研究高糖攝入對家蠅的機體損傷機制,從生長發(fā)育、糖脂代謝和氧化應(yīng)激3個層次深入闡述,重點關(guān)注線粒體功能變化。本研究涉及的主要內(nèi)容和結(jié)果如下:1)家蠅線粒體轉(zhuǎn)錄因子A（mitochondrial transcription factor A,TFAM）基因MdTFAM的克隆鑒定。MdTFAM基因cDNA（GenBank登錄號:MK519375）包含一個762 bp的完整開放閱讀框,編碼253個氨基酸殘基。MdTFAM蛋白結(jié)構(gòu)中含有2個串聯(lián)的HMG（high mobility group）結(jié)構(gòu)域。利用qRT-PCR（quantitative real-time PCR）技術(shù)對MdTFAM在不同發(fā)育階段和不同組織中的表達水平進行分析,結(jié)果表明MdTFAM在家蠅卵期和幼蟲的腸道及脂肪體中呈高表達。該基因受到紫外線（ultraviolet,UV）,鹽酸阿霉素（doxorubicin,DOX）和氯化鎘脅迫刺激后會顯著上調(diào)表達,說明此基因可能參與家蠅的... 

【文章來源】：河北大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 高糖飲食的危害及昆蟲中糖代謝機制
    1.2 線粒體的功能
    1.3 家蠅
    1.4 研究目的及意義
第二章 實驗材料與實驗方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗儀器
    2.3 TFAM基因克隆實驗方法
    2.4 TFAM功能分析
    2.5 高糖脅迫家蠅幼蟲
        2.5.1 家蠅糖脅迫方案
        2.5.2 蔗糖脅迫對家蠅生長發(fā)育的影響
        2.5.3 臺盼藍(Trypan blue)染色實驗
        2.5.4 家蠅幼蟲爬行實驗
        2.5.5 MDA、ROS測定
        2.5.6 DNA損傷檢測
        2.5.7 q RT-PCR檢測線粒體基因表達
        2.5.8 高糖脅迫后家蠅幼蟲葡萄糖海藻糖含量的測定
        2.5.9 家蠅幼蟲糖原含量的測定
        2.5.10 家蠅幼蟲 TAG 含量的測定和脂肪體染色觀察
        2.5.11 脂代謝相關(guān)基因測定
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 Md TFAM基因的表達及其功能分析
        3.1.1 Md TFAM基因的鑒定及生物信息分析
        3.1.2 Md TFAM在家蠅不同發(fā)育階段和組織中的表達規(guī)律
        3.1.3 Md TFAM在氯化鎘脅迫條件下的表達分析
        3.1.4 氯化鎘處理引發(fā)家蠅幼蟲氧化應(yīng)激反應(yīng)和線粒體受損
        3.1.5 DOX和紫外線處理家蠅幼蟲引發(fā)Md TFAM的表達變化
    3.2 高糖脅迫對家蠅幼蟲生長發(fā)育的影響
        3.2.1 蔗糖脅迫后家蠅幼蟲生長發(fā)育的變化
        3.2.2 家蠅幼蟲腸道臺盼藍染色結(jié)果
        3.2.3 家蠅幼蟲爬行能力測定
    3.3 高糖脅迫造成家蠅幼蟲糖脂代謝紊亂
        3.3.1 家蠅幼蟲葡萄糖海藻糖含量的變化
        3.3.2 家蠅幼蟲糖原含量的變化
        3.3.3 家蠅幼蟲中TAG含量變化
        3.3.4 脂代謝相關(guān)基因定量分析
    3.4 高糖脅迫造成家蠅幼蟲氧化應(yīng)激誘發(fā)線粒體功能損傷
        3.4.1 高糖脅迫后家蠅幼蟲MDA及ROS含量的變化
        3.4.2 DNA損傷實驗
        3.4.3 線粒體活性的測定
        3.4.4 線粒體電鏡觀察
        3.4.5 線粒體相關(guān)基因表達量的測定
第四章 討論
    4.1 家蠅線粒體轉(zhuǎn)錄因子(Md TFAM)
    4.2 高糖脅迫導(dǎo)致家蠅幼蟲生長發(fā)育變緩
    4.3 高糖脅迫導(dǎo)致家蠅幼蟲腸道組織受損并伴隨運動能力下降
    4.4 高糖脅迫造成家蠅幼蟲糖脂代謝紊亂
    4.5 高糖脅迫引發(fā)家蠅幼蟲氧化應(yīng)激反應(yīng)并損傷線粒體功能
第五章 結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的科研成果


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]白藜蘆醇在家蠅體內(nèi)的轉(zhuǎn)化以及抗氧化功能的研究[D]. 邢建曉.河北大學(xué) 2017
[3]家蠅MdSirt1和MdSirt4基因的克隆及功能分析[D]. 顧冀海.河北大學(xué) 2016



本文編號：3436544