高糖飲食會(huì)誘發(fā)多種代謝性疾病,然而高糖攝入導(dǎo)致的損傷機(jī)制尚不清晰,該科學(xué)問(wèn)題值得深入研究。本論文以家蠅（Musca domestica）為實(shí)驗(yàn)材料,旨在研究高糖攝入對(duì)家蠅的機(jī)體損傷機(jī)制,從生長(zhǎng)發(fā)育、糖脂代謝和氧化應(yīng)激3個(gè)層次深入闡述,重點(diǎn)關(guān)注線(xiàn)粒體功能變化。本研究涉及的主要內(nèi)容和結(jié)果如下:1)家蠅線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)錄因子A（mitochondrial transcription factor A,TFAM）基因MdTFAM的克隆鑒定。MdTFAM基因cDNA（GenBank登錄號(hào):MK519375）包含一個(gè)762 bp的完整開(kāi)放閱讀框,編碼253個(gè)氨基酸殘基。MdTFAM蛋白結(jié)構(gòu)中含有2個(gè)串聯(lián)的HMG（high mobility group）結(jié)構(gòu)域。利用qRT-PCR（quantitative real-time PCR）技術(shù)對(duì)MdTFAM在不同發(fā)育階段和不同組織中的表達(dá)水平進(jìn)行分析,結(jié)果表明MdTFAM在家蠅卵期和幼蟲(chóng)的腸道及脂肪體中呈高表達(dá)。該基因受到紫外線(xiàn)（ultraviolet,UV）,鹽酸阿霉素（doxorubicin,DOX）和氯化鎘脅迫刺激后會(huì)顯著上調(diào)表達(dá),說(shuō)明此基因可能參與家蠅的... 

【文章來(lái)源】：河北大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 高糖飲食的危害及昆蟲(chóng)中糖代謝機(jī)制
    1.2 線(xiàn)粒體的功能
    1.3 家蠅
    1.4 研究目的及意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 TFAM基因克隆實(shí)驗(yàn)方法
    2.4 TFAM功能分析
    2.5 高糖脅迫家蠅幼蟲(chóng)
        2.5.1 家蠅糖脅迫方案
        2.5.2 蔗糖脅迫對(duì)家蠅生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        2.5.3 臺(tái)盼藍(lán)(Trypan blue)染色實(shí)驗(yàn)
        2.5.4 家蠅幼蟲(chóng)爬行實(shí)驗(yàn)
        2.5.5 MDA、ROS測(cè)定
        2.5.6 DNA損傷檢測(cè)
        2.5.7 q RT-PCR檢測(cè)線(xiàn)粒體基因表達(dá)
        2.5.8 高糖脅迫后家蠅幼蟲(chóng)葡萄糖海藻糖含量的測(cè)定
        2.5.9 家蠅幼蟲(chóng)糖原含量的測(cè)定
        2.5.10 家蠅幼蟲(chóng) TAG 含量的測(cè)定和脂肪體染色觀察
        2.5.11 脂代謝相關(guān)基因測(cè)定
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 Md TFAM基因的表達(dá)及其功能分析
        3.1.1 Md TFAM基因的鑒定及生物信息分析
        3.1.2 Md TFAM在家蠅不同發(fā)育階段和組織中的表達(dá)規(guī)律
        3.1.3 Md TFAM在氯化鎘脅迫條件下的表達(dá)分析
        3.1.4 氯化鎘處理引發(fā)家蠅幼蟲(chóng)氧化應(yīng)激反應(yīng)和線(xiàn)粒體受損
        3.1.5 DOX和紫外線(xiàn)處理家蠅幼蟲(chóng)引發(fā)Md TFAM的表達(dá)變化
    3.2 高糖脅迫對(duì)家蠅幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        3.2.1 蔗糖脅迫后家蠅幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的變化
        3.2.2 家蠅幼蟲(chóng)腸道臺(tái)盼藍(lán)染色結(jié)果
        3.2.3 家蠅幼蟲(chóng)爬行能力測(cè)定
    3.3 高糖脅迫造成家蠅幼蟲(chóng)糖脂代謝紊亂
        3.3.1 家蠅幼蟲(chóng)葡萄糖海藻糖含量的變化
        3.3.2 家蠅幼蟲(chóng)糖原含量的變化
        3.3.3 家蠅幼蟲(chóng)中TAG含量變化
        3.3.4 脂代謝相關(guān)基因定量分析
    3.4 高糖脅迫造成家蠅幼蟲(chóng)氧化應(yīng)激誘發(fā)線(xiàn)粒體功能損傷
        3.4.1 高糖脅迫后家蠅幼蟲(chóng)MDA及ROS含量的變化
        3.4.2 DNA損傷實(shí)驗(yàn)
        3.4.3 線(xiàn)粒體活性的測(cè)定
        3.4.4 線(xiàn)粒體電鏡觀察
        3.4.5 線(xiàn)粒體相關(guān)基因表達(dá)量的測(cè)定
第四章 討論
    4.1 家蠅線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)錄因子(Md TFAM)
    4.2 高糖脅迫導(dǎo)致家蠅幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育變緩
    4.3 高糖脅迫導(dǎo)致家蠅幼蟲(chóng)腸道組織受損并伴隨運(yùn)動(dòng)能力下降
    4.4 高糖脅迫造成家蠅幼蟲(chóng)糖脂代謝紊亂
    4.5 高糖脅迫引發(fā)家蠅幼蟲(chóng)氧化應(yīng)激反應(yīng)并損傷線(xiàn)粒體功能
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]粘質(zhì)沙雷氏菌PS-1菌株對(duì)甜菜夜蛾幼蟲(chóng)中腸結(jié)構(gòu)及消化酶活性的影響[J]. 趙曉峰,向亞林,凌冰,許小霞,張茂新.  環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2017(03)
[2]昆蟲(chóng)糖脂代謝研究進(jìn)展[J]. 魏琪,蘇建亞.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2016(08)
[3]氡暴露致小鼠肺組織線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)錄因子A及核因子-κB表達(dá)的改變[J]. 裴煒煒,陶立靜,聶繼華,童建.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2016(04)
[4]高脂飼料喂飼C57小鼠誘發(fā)胰島素抵抗過(guò)程中肝臟氧化應(yīng)激水平及Nrf2、NRF-1和mtTFA蛋白表達(dá)的變化[J]. 劉穎,傅晗,師騰瑞,劉江正,王欣,海春旭.  癌變·畸變·突變. 2015(03)
[5]以成熟果蠅為模型研究血糖動(dòng)態(tài)變化[J]. 李昆朋.  中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘. 2013(04)
[6]糖尿病小鼠肝臟脂肪酸合成酶的動(dòng)態(tài)表達(dá)[J]. 王冰,程麗靜,劉明川,高政南.  大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(02)
[7]線(xiàn)粒體脂質(zhì)過(guò)載與胰島素抵抗[J]. 鄒琪婧,曹仁賢,洪濤.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2012(06)
[8]2型糖尿病患者三酰甘油脂肪酶水平與肥胖及其胰島素抵抗的關(guān)系[J]. 楊莉,邸阜生,王璐,賈國(guó)瑜,洪燕青,劉聰.  中國(guó)慢性病預(yù)防與控制. 2011(04)
[9]線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)錄因子A的研究進(jìn)展[J]. 姚鵬程,張佐,彭淑紅,周軍.  生命科學(xué). 2011(05)
[10]高效液相色譜法快速檢測(cè)海藻糖[J]. 王成君,林建平,岑沛霖.  江南大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(05)

博士論文
[1]棉鈴蟲(chóng)蛹滯育的糖代謝相關(guān)基因研究[D]. 林先武.中山大學(xué) 2016
[2]LBP-4a改善胰島素抵抗及治療糖尿病腎病作用的研究[D]. 趙蕊.燕山大學(xué) 2007

碩士論文
[1]鎘脅迫和細(xì)菌感染對(duì)家蠅線(xiàn)粒體功能的影響[D]. 李亞靜.河北大學(xué) 2018
[2]白藜蘆醇在家蠅體內(nèi)的轉(zhuǎn)化以及抗氧化功能的研究[D]. 邢建曉.河北大學(xué) 2017
[3]家蠅MdSirt1和MdSirt4基因的克隆及功能分析[D]. 顧冀海.河北大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3436544