研究背景與目的重癥肌無(wú)力（myastheniagravis,MG）是自身抗體介導(dǎo)的自身免疫性疾病。可由多種抗體介導(dǎo),其中多數(shù)患者表現(xiàn)為乙酰膽堿受體（acetylcholine receptor,AChR）抗體陽(yáng)性。研究證實(shí),針對(duì)AChR抗原產(chǎn)生自身抗體需要T細(xì)胞輔助,半數(shù)以上MG患者存在胸腺瘤、胸腺增生等異常,切除胸腺后患者癥狀可以緩解,因此認(rèn)為MG的發(fā)生和發(fā)展與胸腺異常密切相關(guān)。尤其是在異常增生的MG胸腺中可見(jiàn)生發(fā)中心并從中分離出產(chǎn)生針對(duì)AChR的自身抗體。為探討MG患者胸腺異常增生的機(jī)制,我們首先選取增生型MG患者胸腺組織進(jìn)行“人類(lèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)現(xiàn)者PCR芯片”分析,觀(guān)測(cè)10類(lèi)常見(jiàn)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,通過(guò)對(duì)該芯片結(jié)果的分析,發(fā)現(xiàn)MG胸腺組織多種信號(hào)分子與對(duì)照組顯著差異表達(dá),結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)和本課題組的研究工作基礎(chǔ),我們選擇差異表達(dá)倍數(shù)較高的FOSL1（Fos related antigen-1）作為研究的核心內(nèi)容。根據(jù)課題組相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),FOSL1主要表達(dá)于胸腺上皮細(xì)胞（thymus epithelial cells,TECs）,為進(jìn)一步明確FOSL1高表達(dá)對(duì)TECs功能和胸腺細(xì)胞增殖的影... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＲＮＡ電泳圖??

?結(jié)果???１．Ｅ＋０５?????１．Ｅ＋０４?－?＾??１．Ｅ＋０３?－?，，．．，，??ｒ。２－??�。保海�?？：?Ｗ??１Ｅ。。?？？？ｗ＃??１Ｅ－°１?■??，．Ｅ七？’??１．Ｅ－０３?－ｋ—＾￣．?；?．?．?，?．?．???—＾?＾?—Ａ?＿ｋ?＾?＾??ｒＴｉｒｎｍｍｍｒｎｒｎｍｍ??８?Ｓ?２?§ＣｏｎｔｒｏｔＳａｍｐｌｇ?Ｓ?２?Ｓ??圖２?ＭＧ患者與對(duì)照組基因表達(dá)散點(diǎn)圖??１０??９?１??８??７??６??５??４?■?ＭＧ??３?丨?■?ＣＯＮＴＲＯＬ??：Ｌ?，．．?Ｍ?ｉ．ｌ．?｜?，｜??＇Ｓ?Ｘ?＾?Ｑ．?Ｔ－ｌ?＊?＊■?ＣＱ?ｒＨ?ｔＨ?ｒＨ?＊?ｆＨ?ｒ〇?＊?ＣＯ??耷?＜＾ｉ５?Ｑｕ＿ａ：ａ＿－＾＜ＬｎＱｓｕｊｚｕ－ＴＨＵＪｃ〇ｒＨｒｓ？??§ｍ３：ｉ５ＳｕＳ｜〇３Ｓ?—?會(huì)??＾?＾?ｇ?ｕ?＾?§§?ｙ?°?ｇ?°?ｉ?１??Ｓ?－??圖３?ｍｇ患者與對(duì)照組胸腺組織信號(hào)通路分子差異表達(dá)顯著的基因??２．２熒光定量ＰＣＲ驗(yàn)證??為證實(shí)芯片中ｍＲＮＡ表達(dá)的準(zhǔn)確性，對(duì)丨５例ＭＧ患者和對(duì)照組胸腺ＲＮＡ??選�。疲希樱蹋�、Ｓ０ＣＳ３、ＣＣＬ５進(jìn)行熒光定量ＲＴ－ＰＣＲ，?ＭＧ患者胸腺組織Ｓ０ＣＳ３、??Ｆ０ＳＬ１的表達(dá)與對(duì)照組相比有顯著差異，７＾０．０５，而ＣＣＬ５的表達(dá)在兩組中沒(méi)??有顯著差異，這些均與芯片結(jié)果一致。見(jiàn)表１，圖４。??１２??

?結(jié)果???表?１?ＲＴ－ｑＰＣＲ?分析胸腺組織?ＣＣＬ５、ＦｏｓＬｌ、ＳＯＣＳ３?ｍＲＮＡ?表達(dá)??基因?ＭＧ組（ｎ＝３）?對(duì)照組（ｎ＝３）?ｔ?Ｐ??ＣＣＬ５?５．６?士?１．１７?６．０１?士?１．６６?２．０３１?０．０６５??ＦｏｓＬｌ?０．６９?士?０．０１?０．２７?士０．０８?６．１１３?０．００１??ＳＯＣＳ３?１．１３?士?０．０７?０．４９?土?０．０５?８．３３２?０．００１??１〇?■■??８?ＩＩＩ??６?了?ＢＭＧ—ＩＳ）??Ｔ?■■?ＣＯＮＴＲＯＬ（ｉ＝１５）??ＩＩＩ??ＣＣＬ５?ＦｏｓＬｌ?ＳＯＣＳ３??圖４?ＭＧ患者胸腺組織ＣＣＬ５、ＦＯＳＬ１和ＳＯＣＳ３?ｍＲＮＡ表達(dá)??２．３?ＴＥＣｓ分離鑒定和ＦＯＳＬ１基因轉(zhuǎn)染??２．３．１?ＴＥＣ分離鑒定??按照方法１．７．１從胸腺組織分離ＴＥＣｓ，選擇５個(gè)細(xì)胞克隆進(jìn)行免疫組化鑒定，??上皮細(xì)胞標(biāo)志ＣＫ８／１８角蛋白染色陽(yáng)性的細(xì)胞認(rèn)定為ＴＥＣｓ?（見(jiàn)圖５），繼續(xù)進(jìn)行培??養(yǎng)用于后續(xù)研宄。??圖５角蛋白ＣＫ８／１８陽(yáng)性ＴＥＣｓ的免疫組化染色（ｘ４００）??１３??


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