發(fā)布時間：2021-09-01 19:53

　　目的:海產(chǎn)品過敏患病率較高,對人體健康危害也較大,可是目前食物過敏的精確診斷仍然存在困難。原肌球蛋白是甲殼類海產(chǎn)品的主要致敏組分,基于原肌球蛋白的組分診斷可以顯著提高蝦過敏的診斷準(zhǔn)確度。原肌球蛋白對于其他種類海產(chǎn)品過敏的診斷也有重要的意義。但是,由于食物過敏反應(yīng)具有顯著地域和種族特征,飲食文化不同,同樣給食物過敏帶來復(fù)雜性,參閱文獻顯示,關(guān)于原肌球蛋白在蝦過敏患者中sIgE、sIgG4的反應(yīng)頻率、識別的抗原表位、跟塵螨/蟑螂等其他物種的交叉反應(yīng)都存在爭議。此外IgG4在蝦過敏中的臨床意義還不明確。本研究的目的是分析中國北方沿海地區(qū)蝦過敏患者TM-sIgE和sIgG4抗體表達水平以及所識別的抗原表位譜。方法:1.研究對象本研究所有血清樣本均來自天津市港口醫(yī)院和天津市中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院。過敏的診斷根據(jù)病史和血清sIgE水平確定。2.TM-sIgE和sIgG抗體表達水平制備蝦的重組TM蛋白。用生物素標(biāo)記重組TM蛋白,用抗人IgE/IgG4包被發(fā)光微球,構(gòu)建光激化學(xué)發(fā)光分析檢測體系。優(yōu)化最優(yōu)的血清稀釋度、包被抗體的濃度等條件。測定過敏患者TM-sIgE和sIgG4抗體表達水平。確定最佳診斷閾... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

pET-28a質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)示意圖

1.3 TM 目的基因 PCR 擴增的 SDS-PAGE-PAGE analysis of PCR amplification of th注：1：PCR 產(chǎn)物， M: 分子量標(biāo)記 TM 目的基因 PCR 擴增后產(chǎn)物約 930 b段大小加上保護堿基后 930bp 相符。

圖 1.4 重組克隆質(zhì)粒酶切 SDS-PAGE 鑒定re 1.4 SDS-PAGE analysis of recombinant plwith restriction enzymes digestion 質(zhì)粒; 2. 用 BamH I 和 Hind III 酶切的 pET-28a(+蛋白在 E.coli 中表達，將構(gòu)建到 pET-28a（粒用 BamHI-HindIII 酶切，獲得的條帶約400bp 的大小一致。酶切結(jié)果表明獲得了含分析電泳結(jié)果表明重組蛋白的純度為 95-

【參考文獻】：
期刊論文
[1]口服食物激發(fā)試驗標(biāo)準(zhǔn)化流程專家共識[J]. Food and Drug Allergy Prevention Subgroup,Allergy Prevention and Control Committee,Chinese Preventive Medicine Association;.  中國全科醫(yī)學(xué). 2018(27)
[2]中國城市支氣管哮喘兒童與非支氣管哮喘兒童食物過敏患病情況比較[J]. 牟京輝,邵明軍,劉傳合,沙莉,朱文靚,李碩,羅雁青,李敬光,吳永寧,陳育智.  中華實用兒科臨床雜志. 2018 (09)
[3]食物過敏:流行病學(xué)、發(fā)病機制、診斷、預(yù)防與治療手段綜述及更新[J]. Scott H.Sicherer,Hugh A.Sampson,馬仕坤,李宏.  中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志. 2018(01)
[4]食物過敏的定義、流行性、診斷及治療[J]. Ronald van Ree,Lars K.Poulsen,Gary WK Wong,Barbara K.Ballmer-Weber,高中山,賈旭東.  中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2015 (01)

碩士論文
[1]蛋清sIgE抗體光激化學(xué)發(fā)光分子診斷方法的建立及應(yīng)用[D]. 邊穎.天津醫(yī)科大學(xué) 2018



本文編號：3377587