類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis,RA）是一種以滑膜炎癥及骨和軟骨破壞為主要特征的慢性、系統(tǒng)性的自身免疫病。目前RA發(fā)病機(jī)制仍不清楚,但已有大量的研究表明B細(xì)胞和滑膜細(xì)胞參與了RA的發(fā)生和發(fā)展。其中,B細(xì)胞的異常活化被視為是RA的早期標(biāo)志。B細(xì)胞活化因子（B cell-activating factor,BAFF）對(duì)T/B細(xì)胞功能至關(guān)重要,能夠調(diào)節(jié)B細(xì)胞增殖、成熟、活化,輔助T細(xì)胞活化,維持漿母細(xì)胞存活和增殖。BAFF與其受體結(jié)合介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進(jìn)B細(xì)胞活化、增殖及抑制凋亡,參與RA異常炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答。成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞（fibroblast-like synoviocytes,FLSs）是RA的效應(yīng)細(xì)胞,BAFF表達(dá)在FLSs上,在RA的病程中也起關(guān)鍵作用。FLSs凋亡受損可導(dǎo)致滑膜增生,促進(jìn)RA軟骨的破壞,受累關(guān)節(jié)FLSs增殖是區(qū)別RA與其他關(guān)節(jié)炎癥的特征。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2（tumor necrosis factor receptor-associated factors2,TRAF2）作為銜接蛋白,主要激活轉(zhuǎn)錄因子（nuclear fac... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

CP-25對(duì)MH7A細(xì)胞中TRAF2和GRK2共表達(dá)的影響

為進(jìn)一步確定TRAF2和NIK的共結(jié)合作用,我們用激光共聚焦法觀察MH7A細(xì)胞中TRAF2和NIK共表達(dá)情況。TRAF2蛋白用綠色熒光標(biāo)記,NIK蛋白用紅色熒光標(biāo)記。在正常情況下,MH7A細(xì)胞中TRAF2和NIK蛋白有比較弱的共表達(dá)。與空白組比較,BAFF刺激的MH7A細(xì)胞中TRAF2和NIK蛋白顯著增加,同時(shí)從Merge圖中可以看出,BAFF刺激的MH7A細(xì)胞中TRAF2和NIK蛋白共結(jié)合增多,依那西普和MTX不同程度降低MH7A細(xì)胞中TRAF2和NIK蛋白共結(jié)合。CP-25對(duì)BAFF刺激的MH7A細(xì)胞中TRAF2和NIK蛋白共結(jié)合無(wú)明顯影響(圖7)。3.7 免疫共沉淀法顯示CP-25 降低MH7A細(xì)胞中TRAF2 和BAFFR共定位

免疫共沉淀法檢測(cè)TRAF2和BAFFR的相互作用。使用Protein A/G微珠從MH7A細(xì)胞中拉出TRAF2,孵育BAFFR抗體,檢測(cè)MH7A細(xì)胞中TRAF2蛋白和BAFFR受體的相互作用。結(jié)果顯示,在正常情況下,MH7A細(xì)胞中TRAF2和BAFFR有較弱的共表達(dá),經(jīng)BAFF刺激后的MH7A細(xì)胞中TRAF2和BAFFR相互作用增強(qiáng)。與BAFF刺激組比較,CP-25組、依那西普組和MTX組TRAF2和BAFFR相互作用減弱(圖8)。3.8 免疫共沉淀法顯示CP-25 降低MH7A細(xì)胞中TRAF2 和GRK2 共定位


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