研究目的:系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種慢性系統(tǒng)性自身免疫病,血清中高滴度的抗雙鏈DNA抗體是診斷特異性的致病抗體。系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)病機制目前尚未完全闡明,一般認為基因和環(huán)境因素在發(fā)病中都起到了重要作用。腸道微生物作為環(huán)境因素的一種,在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病中的作用仍不明確。本研究的主要目的是明確腸道微生物在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病中的作用及其病理生理機制,為疾病發(fā)病機制研究和疾病治療提供理論依據(jù)。方法:我們收集系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者和健康人糞便、狼瘡小鼠和健康小鼠糞便,利用16s rDNA測序技術對糞便中腸道微生物組成和差異情況進行分析;將收集到的糞便利用菌群移植的技術處理悉生小鼠,進行微生物定植情況和差異物種分析;ELISA檢測血清中疾病特異性抗體滴度,并用流式細胞術分析淋巴細胞在腸道黏膜免疫器官和外周免疫器官中的分布;利用宏基因組學、代謝組學和微生物代謝表型鑒定系統(tǒng)分析腸道微生物基因功能差異以及代謝方面差異;利用轉錄組測序和熒光定量PCR技術分析腸道微生物對宿主基因表達的影響,鑒定差異基因并進行功能分析。結果:狼瘡人群、狼瘡小鼠相比各自的健康對照,腸道微生物組成、物種豐度和多樣性不同;菌群移植可以使大... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：139 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１．?ＴＣ小鼠與Ｂ６小鼠血清抗ｄｓ－ＤＮＡ抗體滴度??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ａｎｔｉ?ｄｏｕｂｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄ?ＤＮＡ（Ａｎｔｉ－ｄｓＤＮＡ）?ａｎｔｉｂｏｄｙ?ｔｉｔｅｒｓ?ｉｎ?Ｃ５７／Ｂ６?ｍｉｃｅ??

Ｇｒｏｕｐ?Ｎａｍｅ?■Ｌａｃｔ〇ｔ？〇？ｕｔ??圖１－２．?ＴＣ小鼠和Ｂ６小鼠腸道微生物組成和相對含量情況??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２．?ＴｏｐｌＯ?ｐｈｙｌｕｍ?ａｎｄ?Ｔｏｐ３０?ｇｅｎｕｓ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｉｎ?Ｃ５７／Ｂ６?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?ＴＣ?ｍｉｃｅ．??Ａ．菌門（Ｐｈｙｌｕｍ）水平相對含量前１０的微生物Ｂ．菌屬（Ｇｅｎｕｓ）水平相對含量前３０的微生物??狼瘡小鼠血清中抗ｄｓ－ＤＮＡ抗體滴度水平顯著高于健康小鼠。１６ｓ測序質控結??果表明所有樣品數(shù)據(jù)質量合格，有效數(shù)據(jù)百分比基本均在９０％以上（僅有１例Ｂ６??樣品為８６．６４％）。兩種小鼠的主要腸道微生物構成結果顯示，按照菌群含量，優(yōu)勢??菌群集中在Ｆ／ｒｍ／ｃｗｔｏ■（厚壁菌門）、Ａ７ｃ／ｅｒａ／＜ｉｅ／ａ?（擬桿菌門）、Ｊｃ／＿／＞？ｏＺ）ａｃｒｍ＇ｆｌ?（放線菌??門）、／Ｖｏ丨（變形菌門）等；優(yōu)勢菌屬包括Ｌｏｃｔｏ６ｆｌｃ／／／ｉＭ？（乳酸菌屬）、??／＾＾７／／力（３＜？？／？／？?（柔嫩梭菌屬）、Ｔｗｒ／ｃ／ｔｅｃ／ｅｒ?（厚壁菌門中的一個屬）、??（雙歧桿菌屬）等。??２．狼瘡小鼠與健康小鼠腸道微生物樣品復雜度（ａ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ）分析??ａ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ用于分析樣品內（Ｗｉｔｈｉｎ－ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ）的微生物群落多樣性，??反映樣品內的微生物群落的豐富度和多樣性

?ｍｕｉｉ??Ｃｍｍｒ??圖１－３．狼瘡小鼠和健康小鼠ａ多樣性指數(shù)??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３．?ａ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ?ｆｏｒ?ＴＣ?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?Ｂ６?ｍｉｃｅ．??Ａ．?ＡＣＥ?指數(shù)（＊＊尸?＜０．０１）?Ｂ．Ｃｈａｏ?１?指數(shù)（＊＊Ｐ＜０．０１）??Ｃ．?Ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ｓｐｅｃｉｅｓ?指數(shù)（＊Ｐ?＜０．０５）?Ｄ．?ＯＵＴ?數(shù)目統(tǒng)計??表１－１１．狼瘡小鼠和健康小鼠腸道微生物ａ多樣性指數(shù)??Ｔａｂｌｅ?１－１１．?ａ?－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ?ｂｅｔｗｅｅｎ?Ｃ５７／Ｂ６?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?ＴＣ?ｍｉｃｅ??Ｇｒｏｕｐ?Ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ｓｐｅｃｉｅｓ?Ｓｈａｎｎｏｎ?Ｃｈａｏ?１?ＡＣＥ?ＯＵＴ?ｃｌｕｓｔｅｒｓ??Ｃ５７／Ｂ６?５７３?５．８０６?６８３．７８１?６７７．３９３?１２３０??ＴＣ?（ＳＬＥ）?５０６?６．１４５?５８０．４５１?５８３．２９８?１０７９??上述結果顯示，狼瘡小鼠腸道微生物的群落豐度和多樣性指數(shù)（ＡＣＥ，?Ｃｈａｏｌ，??Ｏｂｓｅｒｖｅ?ｓｐｅｃｉｅｓ）均顯著低于健康對照小鼠；Ｂ６小鼠特有ＯＵＴ數(shù)量２２６個，多于??ＴＣ小鼠特有ＯＵＴ數(shù)量７５個。上述結果表明，與健康小鼠相比，狼瘡小鼠糞便中??的腸道微生物豐富度和多樣性減少。??３？狼瘡小鼠與健康小鼠腸道微生物多樣品比較（ｐ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ?）分析??Ｐ－ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ?ｉｎｄｅｘ是對不同樣品的微生物群落構成進行比較，對不同分組間的樣??品進行差異分析


本文編號：3296997