背景隨著生活節(jié)奏的加快,生活水平的提高,在人們的生活方式發(fā)生巨大變化的同時(shí),代謝性疾病的發(fā)病率也在全世界范圍內(nèi)逐年攀升,其中糖尿病是代謝性疾病中最常見(jiàn)的一種。在2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,肝臟、肌肉、脂肪等組織對(duì)胰島素反應(yīng)能力下降甚至抵抗胰島素的作用,繼而會(huì)引起一些如肥胖、多囊卵巢綜合癥、高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化等疾病。肝臟是糖代謝的重要器官,胰島素主要通過(guò)胰島素受體底物（IRS）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信號(hào)傳導(dǎo)通路影響肝臟的糖代謝,然而肝臟胰島素抵抗的發(fā)病機(jī)制,目前仍不明確。Micro RNAs（mi RNAs）是一類短小的、非編碼的微小RNAs,對(duì)維持機(jī)體自身穩(wěn)態(tài)的平衡、疾病的產(chǎn)生和發(fā)展過(guò)程中有著重要影響,它們與靶信使RNA（m RNA）的3’非翻譯區(qū)（3’-UTRs）結(jié)合,抑制編碼蛋白基因的轉(zhuǎn)錄后表達(dá)。Micro RNA-126不僅在內(nèi)皮細(xì)胞中含量豐富,在凋亡小體中的表達(dá)也很高,國(guó)內(nèi)外的研究發(fā)現(xiàn),在糖尿病動(dòng)物模型以及在糖尿病患者的血漿中,Micro RNA-126的表達(dá)量明顯降低,因此我們認(rèn)為Micro RNA-126可能與糖尿病的發(fā)生與發(fā)展有聯(lián)系。R... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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培養(yǎng)的張氏肝細(xì)胞照片

圖 2A-F FAM-NC 及 inhibitor FAM-NC 在張氏肝細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的驗(yàn)證Figure2 A-F Transfection efficiency of FAM-NC and inhibitor FAM-NC in Chang liver cells注：A: FAM-NC（20 nmol/L）B: FAM-NC（40 nmol/L）C:FAM-NC（80 nmol/L）D:inhibitorFAM-NC （20 nmol/L） E: inhibitor FAM-NC (40 nmol/L) F: inhibitor FAM-NC (80 nmol/L)1.3 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)細(xì)胞中 MicroRNA-126 相對(duì)表達(dá)量:為了改變張氏肝細(xì)胞中 MicroRNA-126 的表達(dá)，合成了 MicroRNA-126 類似物（MicroRNA-126 mimics）、MicroRNA-126 抑制物（MicroRNA-126 inhibitor）、MicroRNA-126 類似物陰性對(duì)照物（MicroRNA-126 mimics negative control）、MicroRNA-126 抑制物陰性對(duì)照物（MicroRNA-126 inhibitor negative control），按照實(shí)驗(yàn)方法 2.3.1 的分組，用脂質(zhì)體 Lipofectamine2000 分別轉(zhuǎn)染上述核苷酸序列，利用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)不同轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中 MicroRNA-126 相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果顯示：MicroRNA-126 類似物轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中 MicroRNA-126 的相對(duì)表達(dá)量較正常對(duì)照組顯著增加（t=20.82，P<0.05）；其他組 MicroRNA-126 表達(dá)量與正

圖3 Western blot法測(cè)定不同組細(xì)胞中IRS-1的蛋白表達(dá)量水平，GA氫酶) 作為內(nèi)參蛋白Figure 3 The expression of IRS-1 in different groups was detecteGAPDH was used for protein level normalization.注: 1.正常對(duì)照組 2. Lipofectamine 2000組 3.MicroRNA-126抑制物4. MicroRNA-126類似物陰性對(duì)照組 5.MicroRNA-126抑制物組 6.M1 2 3 4 5 6PG圖 4 Western blot法測(cè)定不同組細(xì)胞中PIK3R2的蛋白表達(dá)量水平，脫氫酶) 作為內(nèi)參蛋白

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]循環(huán)miRNA-126在2型糖尿病患者中的表達(dá)變化及其相關(guān)性研究[J]. 任彥紅,黃婷,時(shí)學(xué)秀,閆丹丹,栗夏連.  中國(guó)糖尿病雜志. 2014(07)
[2]MicroRNAs-126（miR-126）的生物學(xué)功能[J]. 楊東,張紅.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2012(14)
[3]2型糖尿病患者血清miR-126表達(dá)的臨床意義[J]. 盧佩穎,谷衛(wèi),陳岳明.  心腦血管病防治. 2012(01)
[4]短發(fā)夾狀RNA干擾窖蛋白-1表達(dá)對(duì)人肝細(xì)胞增殖的影響[J]. 任剛,劉英,王孝敏,趙春暉,鄒偉.  中華肝臟病雜志. 2008 (05)
[5]L02細(xì)胞人鼠嵌合肝模型的建立[J]. 林滬,毛青,王宇明,蔣業(yè)貴,鄧國(guó)宏,蔣黎.  中華肝臟病雜志. 2006(08)



本文編號(hào)：3284430