第一部分脂肪組織特異性敲除Nrf2小鼠通過調節(jié)糖脂及能量代謝延緩高脂飲食誘導的肥胖研究背景和目的:核轉錄因子Nrf2是熟知的抗氧化應激和降解毒素的總管因子。白色脂肪組織是能量儲存庫,也是內(nèi)分泌器官,分泌多種免疫和炎癥介質調節(jié)心血管疾病、胰島素抵抗、2型糖尿病和腦功能失調等。最近有研究表明,全身性敲除Nrf2小鼠可以調節(jié)糖脂及能量代謝。為了理解Nrf2在脂肪生成和脂肪功能中的復雜作用,本實驗研究了脂肪組織特異性敲除Nrf2小鼠對飲食誘導肥胖的影響。實驗方法:本實驗利用轉基因小鼠雜交技術成功獲得脂肪組織特異性敲除Nrf2（ASAN/NK）小鼠模型。選取6周齡ASAN（NK）小鼠和Nrf2對照小鼠（NC）,分別給與14周對照飲食（CD）或高脂飲食（HFD）。本實驗分成四組,分別為:對照飲食的Nrf2對照小鼠組（NC-CD）、高脂飲食的Nrf2對照小鼠組（NC-HFD）、對照飲食的ASAN小鼠組（NK-CD）、高脂飲食的ASAN小鼠組（NK-HFD）,每組各6只。記錄小鼠每周體重變化,并用活鼠身體組成分析儀檢測小鼠總體脂及肌肉含量。在CD/HFD喂食第8周時用最大氧耗間接熱量測定系統(tǒng)持續(xù)監(jiān)測小... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

巨噬細胞中敲低Nrf2（NK）導致AKT和mTOR信號通路改變

73圖 2-4.HUVEC 分離鑒定以及巨噬細胞條件培養(yǎng)基對其細胞活力的影響。(A)成功分離人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC），并連續(xù)培養(yǎng)直 PDL8 代，在倒置顯微鏡下觀察其形態(tài)，并拍照（200X）；（B）用 CD31 抗體染色鑒定 HUVEC，細胞純度大于 98%；（C）用 CCK8試劑盒檢測不同濃度巨噬細胞條件培養(yǎng)基對內(nèi)皮細胞活力的影響。不同字母表示干預組間有差異；n=6/組，本研究使用獨立樣本 T 檢驗，P<0.05 表示有統(tǒng)計學差異。

74圖 2-5 不同組巨噬細胞條件培養(yǎng)基（Con-CM、M1-CM、NK-CM、NK-M1-CM）對內(nèi)皮細胞炎癥和衰老指標的影響。（A）各組 CM 對內(nèi)皮細胞炎癥指標 ICAM-1 和 VCAM-1 mRNA 表達的影響；（B）各組 CM 對內(nèi)皮細胞衰老指標 P53，P21，P16 mRNA 表達的影響；（C）WB 檢測各組 CM 對內(nèi)皮細胞炎癥和衰老指標蛋白水平的影響；（D）條件培養(yǎng)基干預內(nèi)皮細胞后，各組內(nèi)皮細胞中 ICAM-1 蛋白相對表達水平；（E）條件培養(yǎng)基干預內(nèi)皮細胞后，各組內(nèi)皮細胞中 VCAM-1 蛋白相對表達水平；（F）條件培養(yǎng)基干預內(nèi)皮細胞后，各組內(nèi)皮細胞中各衰老指標的蛋白相對表達水平。不同字母表示干預組間有差異；n=4/組，本研究使用獨立樣本 T 檢驗，P<0.05 表示有統(tǒng)計學差異。ICAM-1，細胞間黏附分子-1；VCAM-1，血管細胞黏附分子-1；CM，條件培養(yǎng)基；Con-CM,正常對照組巨噬細胞條件培養(yǎng)基；M1-CM，M1 激活巨噬細胞條件培養(yǎng)基；NK-CM，Nrf2 敲低組巨噬細胞條件培養(yǎng)基；NK-M1-CM，敲低 Nrf2 的 M1 激活巨噬細胞條件培養(yǎng)基。


本文編號：3284109