目的探討基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）和細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2（ERK1/2）在哮喘中的表達水平,并進一步探討兩者與CCR3/RANTES信號軸的關(guān)系。方法復(fù)制小鼠哮喘模型,分為對照組、哮喘組、干預(yù)組。3組小鼠處死后進行肺泡灌洗,收集肺泡灌洗液,對各細胞進行計數(shù),取右肺葉進行蘇木精-伊紅染色法染色,免疫熒光法檢測CCR3在支氣管上皮細胞的表達。體外實驗分別用活化正常T細胞表達分泌的調(diào)節(jié)蛋白（RANTES）及RANTES+SB328437刺激16HBE細胞,明膠酶譜法檢測MMP-9的活性;用RANTES及RANTES+PD98059（ERK1/2阻斷劑）刺激16HBE細胞,Western blot檢測ERK1/2、p ERK1/2及MMP-9的表達水平。結(jié)果體內(nèi)實驗結(jié)果證明成功復(fù)制哮喘小鼠模型。通過蘇木精-伊紅染色法及計數(shù)肺泡灌洗液中各細胞數(shù)量發(fā)現(xiàn),哮喘組小鼠氣道周圍有明顯的炎癥細胞聚集,而干預(yù)組小鼠氣道周圍的炎癥細胞明顯減少。通過免疫熒光實驗發(fā)現(xiàn),小鼠支氣管上皮細胞大量表達趨化因子CCR3。體外實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),哮喘組小鼠MMP-9的活性升高,而干預(yù)組MMP-9的活性下降。用外源性RA... 

【文章來源】：中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2016,26(17)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗試劑
    1.2 小鼠模型的復(fù)制
    1.3 肺泡灌洗液的收集及細胞計數(shù)
    1.4 肺組織蘇木精-伊紅染色法染色
    1.5 正常人支氣管上皮細胞系細胞的培養(yǎng)和傳代
    1.6免疫熒光法檢測16HBE細胞中CCR3的表達
    1.7 Western blot檢測蛋白含量
    1.8 明膠酶譜法檢測MMP-9的活性
    1.9 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 哮喘模型的鑒定
    2.2 CCR3在支氣管上皮細胞的表達
    2.3 CCR3阻斷劑SB328437對小鼠哮喘應(yīng)答的影響
    2.4 CCR3阻斷劑SB328437對MMP-9活性的影響
    2.5 RANTES誘導(dǎo)MMP-9的表達
    2.6 RANTES刺激ERK1/2的表達
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]大環(huán)類酯類抗生素聯(lián)合支氣管擴張劑和皮質(zhì)激素吸入治療MP感染引發(fā)小兒哮喘的臨床效果觀察[J]. 何冬梅.  臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志. 2015(18)
[2]老年患者哮喘長期控制不佳應(yīng)用霧化吸入糖皮質(zhì)激素的療效[J]. 周為,柯會星,李洋.  中華老年醫(yī)學(xué)雜志. 2015 (07)



本文編號：3152362