高泌乳素血癥通過Kiss1/GPR54系統(tǒng)對大鼠卵巢黃體細胞內分泌功能的影響及其機制
發(fā)布時間:2021-04-15 11:51
背景和目的:高泌乳素血癥(Hyperprolactinemia,HPRL)是指由各種原因導致的血清泌乳素(Prolactin,PRL)異常升高(大于1.14 nmol/L或25μg/L)的一類內分泌疾病,其主要的臨床表現為溢乳、月經稀發(fā)、閉經以及內分泌功能紊亂。但有關高泌乳素血癥導致的生殖內分泌紊亂的作用途徑及機理還不十分清楚。已有研究提示,PRL可通過作用于促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasing Hormone,GnRH)神經元,抑制GnRH釋放,導致FSH和LH分泌減少,從而抑制雌二醇和孕酮分泌。然而,現有研究顯示,僅少量泌乳素受體表達于GnRH神經細胞,而大部分泌乳素受體表達于kisspeptin神經元以及卵巢、睪丸等外周組織。另外,我們前期研究顯示,Kiss1/GPR54系統(tǒng)也表達于卵巢黃體組織,并參與卵巢黃體內分泌功能的調節(jié),這提示HPRL可能通過Kiss1/GPR54系統(tǒng)來影響卵巢黃體的內分泌功能。故本研究擬通過腹腔注射鹽酸甲氧氯普胺(Metoclopramide,MC)誘導HPRL模型和離體黃體細胞培養(yǎng),來觀察HPRL是否通過外周卵巢Kiss1/...
【文章來源】:南昌大學江西省 211工程院校
【文章頁數】:54 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
Kiss1與PRLR蛋白在大鼠卵巢黃體組織中的表達Fig.1TheexpressionsofKiss1andPRLRproteinintheovarianlutealtissuesofratsA和D為黃體組織Kiss1蛋白的表達,B和E為黃體組織PRLR蛋白的表達,C和F分別
圖 2 Kiss1 與 PRLR 蛋白在大鼠卵巢黃體細胞中的定位表達Fig.2 Localization of Kiss1 and PRLR protein in cultured rat luteal cellsA 和 E 為黃體細胞 Kiss1 蛋白的表達;B 和 F 為黃體細胞 PRLR 蛋白的表達;C 和 G 為細胞核 Hoechst 33342 染色圖,D、H 分別為對應前三者的合并圖。E-H(放大倍數:×400)分別是 A-D(放大倍數:×200)黃體細胞的放大圖。3.2 在體實驗結果3.2.1 HPRL 對大鼠卵巢黃體內分泌功能的影響本實驗中,為了構建 HPRL 在體實驗模型,未成年大鼠經促性腺激素處理后,實驗組同時使用鹽酸甲氧氯普胺注射液(Metoclopramide,MC)腹腔注射,對照組使用等體積生理鹽水替代。放射免疫結果顯示,MC 處理組大鼠血清 PRL水平顯著高于對照組(P<0.01,圖 3A),表明 HPRL 動物模型構建成功。同時,檢測大鼠血清雌二醇和孕酮水平,結果顯示,MC 處理組大鼠血清雌二醇水平明
圖 3 HPRL 對大鼠卵巢黃體內分泌功能的影響Fig.3 The effect of HPRL on the endocrine function of rat ovarian corpus luteumA、大鼠血清 PRL 激素水平;B、大鼠血清雌二醇激素水平;C、大鼠血清孕酮水平。結果以均數±標準差表示(n=5),與 Control 相比,**P<0.01。3.2.2 HPRL 對大鼠卵巢黃體組織結構的影響為了探討 HPRL 對大鼠卵巢黃體組織結構的影響,本實驗構建 HPRL 實驗模型后,收集各組卵巢,通過 HE 染色進一步檢測分析顯示,與對照組相比,MC 處理組大鼠體重及卵巢重量均沒有明顯變化(P>0.05,圖 4A、B);并且,通過 IMAGE J 軟件進一步分析顯示,MC 處理組大鼠卵巢黃體數量及面積與對照組相比也沒有明顯差異(P>0.05,圖 4C、D)。由圖 4E 可見,對照組和 MC處理組大鼠卵巢組織未見明顯異常,各黃體結構完整、排列緊密,呈橢圓形,黃體細胞核大小均一,胞膜和胞漿完整。上述結果表明,HPRL 對大鼠卵巢黃體組織結構形態(tài)影響不明顯。
本文編號:3139282
【文章來源】:南昌大學江西省 211工程院校
【文章頁數】:54 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
Kiss1與PRLR蛋白在大鼠卵巢黃體組織中的表達Fig.1TheexpressionsofKiss1andPRLRproteinintheovarianlutealtissuesofratsA和D為黃體組織Kiss1蛋白的表達,B和E為黃體組織PRLR蛋白的表達,C和F分別
圖 2 Kiss1 與 PRLR 蛋白在大鼠卵巢黃體細胞中的定位表達Fig.2 Localization of Kiss1 and PRLR protein in cultured rat luteal cellsA 和 E 為黃體細胞 Kiss1 蛋白的表達;B 和 F 為黃體細胞 PRLR 蛋白的表達;C 和 G 為細胞核 Hoechst 33342 染色圖,D、H 分別為對應前三者的合并圖。E-H(放大倍數:×400)分別是 A-D(放大倍數:×200)黃體細胞的放大圖。3.2 在體實驗結果3.2.1 HPRL 對大鼠卵巢黃體內分泌功能的影響本實驗中,為了構建 HPRL 在體實驗模型,未成年大鼠經促性腺激素處理后,實驗組同時使用鹽酸甲氧氯普胺注射液(Metoclopramide,MC)腹腔注射,對照組使用等體積生理鹽水替代。放射免疫結果顯示,MC 處理組大鼠血清 PRL水平顯著高于對照組(P<0.01,圖 3A),表明 HPRL 動物模型構建成功。同時,檢測大鼠血清雌二醇和孕酮水平,結果顯示,MC 處理組大鼠血清雌二醇水平明
圖 3 HPRL 對大鼠卵巢黃體內分泌功能的影響Fig.3 The effect of HPRL on the endocrine function of rat ovarian corpus luteumA、大鼠血清 PRL 激素水平;B、大鼠血清雌二醇激素水平;C、大鼠血清孕酮水平。結果以均數±標準差表示(n=5),與 Control 相比,**P<0.01。3.2.2 HPRL 對大鼠卵巢黃體組織結構的影響為了探討 HPRL 對大鼠卵巢黃體組織結構的影響,本實驗構建 HPRL 實驗模型后,收集各組卵巢,通過 HE 染色進一步檢測分析顯示,與對照組相比,MC 處理組大鼠體重及卵巢重量均沒有明顯變化(P>0.05,圖 4A、B);并且,通過 IMAGE J 軟件進一步分析顯示,MC 處理組大鼠卵巢黃體數量及面積與對照組相比也沒有明顯差異(P>0.05,圖 4C、D)。由圖 4E 可見,對照組和 MC處理組大鼠卵巢組織未見明顯異常,各黃體結構完整、排列緊密,呈橢圓形,黃體細胞核大小均一,胞膜和胞漿完整。上述結果表明,HPRL 對大鼠卵巢黃體組織結構形態(tài)影響不明顯。
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