類風濕性關節(jié)炎（RA）是一種以滑膜炎癥,軟骨侵蝕和關節(jié)破壞為主要特征的慢性免疫性綜合征,目前RA的治療取得較大進步,通過一線非甾體抗炎藥聯(lián)合抗風濕藥控制病情,雖然炎癥部分已得到成功控制,但仍不能阻止RA的病情進展,療效也還不盡人意,因此積極尋找保護軟骨免受破壞和關節(jié)免受損傷的藥物成為廣大國內外學者的共同期待。流行病學統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)雌激素的缺乏和代謝與類風濕性關節(jié)炎的發(fā)生和發(fā)展緊密相關。雌激素保護關節(jié)軟骨損傷,在摘除卵巢的RA大鼠中,雌二醇替代療法能夠緩解局部炎癥和膝關節(jié)軟骨損傷。但雌二醇如何影響RA的發(fā)病進程和其發(fā)揮保護作用的機制并不清楚;酸敏感離子通道,是一類陽離子通道,在酸誘導的軟骨細胞的損傷中扮演著重要的角色。前期本課題組的大量研究發(fā)現(xiàn)降低ASIC1a的表達和活性能明顯削弱酸誘導的軟骨細胞的損傷。本實驗的主要目的是通過體外實驗去探索雌二醇在酸誘導的大鼠關節(jié)軟骨細胞損傷的作用和闡明雌二醇對ASIC1a活性和蛋白表達的影響及其可能機制;本文雌二醇均指17β-雌二醇;本課題主要包括以下:1.雌二醇對酸誘導的大鼠關節(jié)軟骨損傷的作用體外實驗中探索雌二醇在正常狀況下對大鼠關節(jié)軟骨細胞增長率的影響及... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度雌二醇對體外培養(yǎng)的軟骨細胞生長的影響

安徽醫(yī)科大學碩士學位論文29相比較，細胞生存率都受到不同程度的抑制，而加入雌二醇預處理組，能改善酸誘導的軟骨細胞的死亡，在1000nM濃度下較為明顯；PcTX1預處理組也緩解了此現(xiàn)象；但雌激素受體阻斷劑ICI預處理后,雌二醇的保護作用被抑制。同時，PcTX1特異性阻斷ASIC1a通道后,雌二醇進一步的孵育并不會增加軟骨細胞的存活率。以上現(xiàn)象說明了雌二醇對酸性條件下細胞的生長具有促進作用，同時，也初步證明了ASIC1a可能參與雌二醇對軟骨細胞的保護作用。圖二雌二醇對酸誘導的大鼠關節(jié)軟骨細胞生長的影響Fig.2Effectsof17β-E2onacid-inducedchondrocytesinjury.A:Theeffectof17β-E2onchondrocytesviabilitywereassessedatdifferentconcentrationsafterpretreatmentbyMTTassay(500,1000,2000nM).B,C:AftertreatmentofICI,PcTX1andacidosis,themethodofMTTwereusedtodetectchondrocytesviability.#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001versuscontrol;*P<0.05，**P<0.01,***P<0.001versuspH6.0group.4.1.3雌二醇對酸化條件下軟骨細胞形態(tài)的影響在酸化處理一段時間后，軟骨細胞形態(tài)會發(fā)生根本的改變，由原本的飽滿芝麻狀變?yōu)榘櫩s，呈針尖樣分布，而在雌二醇和PcTX1預處理后，細胞避免了酸化所致的形態(tài)上的明顯變化，只呈現(xiàn)出少部分的形態(tài)變化并且改變并不明顯。如圖所示。圖三關節(jié)軟骨細胞的的形態(tài)學觀察和分析

安徽醫(yī)科大學碩士學位論文29相比較，細胞生存率都受到不同程度的抑制，而加入雌二醇預處理組，能改善酸誘導的軟骨細胞的死亡，在1000nM濃度下較為明顯；PcTX1預處理組也緩解了此現(xiàn)象；但雌激素受體阻斷劑ICI預處理后,雌二醇的保護作用被抑制。同時，PcTX1特異性阻斷ASIC1a通道后,雌二醇進一步的孵育并不會增加軟骨細胞的存活率。以上現(xiàn)象說明了雌二醇對酸性條件下細胞的生長具有促進作用，同時，也初步證明了ASIC1a可能參與雌二醇對軟骨細胞的保護作用。圖二雌二醇對酸誘導的大鼠關節(jié)軟骨細胞生長的影響Fig.2Effectsof17β-E2onacid-inducedchondrocytesinjury.A:Theeffectof17β-E2onchondrocytesviabilitywereassessedatdifferentconcentrationsafterpretreatmentbyMTTassay(500,1000,2000nM).B,C:AftertreatmentofICI,PcTX1andacidosis,themethodofMTTwereusedtodetectchondrocytesviability.#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001versuscontrol;*P<0.05，**P<0.01,***P<0.001versuspH6.0group.4.1.3雌二醇對酸化條件下軟骨細胞形態(tài)的影響在酸化處理一段時間后，軟骨細胞形態(tài)會發(fā)生根本的改變，由原本的飽滿芝麻狀變?yōu)榘櫩s，呈針尖樣分布，而在雌二醇和PcTX1預處理后，細胞避免了酸化所致的形態(tài)上的明顯變化，只呈現(xiàn)出少部分的形態(tài)變化并且改變并不明顯。如圖所示。圖三關節(jié)軟骨細胞的的形態(tài)學觀察和分析


本文編號：3108848