目的探討肌腱蛋白C （TNC）在百草枯（PQ）中毒小鼠肺損傷中的表達(dá)及作用。方法 C57BL/6雄性小鼠經(jīng)腹腔注射30 mg/kg PQ建立動物模型,對照組為同等劑量生理鹽水腹腔注射。分別于接觸PQ后2 d、7 d、14 d和28 d,麻醉后處死小鼠取出肺組織,蘇木精-伊紅染色法（HE）和膠原染色證明模型成功。逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-qPCR）、Western blotting和免疫組化（IHC）方法檢測TNC基因和蛋白在小鼠肺組織中隨時間的表達(dá)規(guī)律及定位,Western blotting檢測核因子-κB p65 （NF-κB p65）,α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）和轉(zhuǎn)化生長因子-β1 （TGF-β1）在肺組織中隨時間的表達(dá)規(guī)律。結(jié)果 TNC蛋白表達(dá)在接觸PQ后2 d升高,7 d達(dá)高峰,之后表達(dá)降低,在14 d和28 d與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。TNC基因表達(dá)高峰提前到2 d,之后降低,在14 d和28d表達(dá)與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。IHC染色發(fā)現(xiàn),TNC主要分布于損傷的肺泡間質(zhì)區(qū)。NF-κB p65在接觸PQ后2 d出現(xiàn)表達(dá)峰值,α-SMA在接觸后14 d和28 d高表達(dá)... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,49(08)北大核心

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PQ中毒小鼠模型肺組織中相關(guān)炎癥纖維化指標(biāo)的蛋白檢測結(jié)果

Western blotting檢測結(jié)果（圖2）顯示，NF-κB p65表達(dá)水平與對照組相比在2 d(1.466±0.147 7vs 0.835±0.094 4,P<0.05）和7 d(1.284±0.034 0 vs0.835±0.094 4,P<0.01）明顯升高，有統(tǒng)計學(xué)意義，并且在2 d達(dá)高峰。在2 d之后的表達(dá)開始下降，在14 d(0.853±0.064 3 vs 0.835±0.094 4,P>0.05）和28 d(0.792±0.063 0 vs 0.835±0.094 4,P>0.05）后與對照組持平，回歸正常水平。α-SMA在造模后的28 d內(nèi)表達(dá)呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，在早期無明顯升高，分別為2 d(1.315±0.453 vs 0.900±0.208 2,P>0.05),7 d(1.467±0.524 6 vs 0.900±0.208 2,P>0.05），均無統(tǒng)計學(xué)意義。14 d(2.804±0.467 7 vs 0.900±0.208 2,P<0.05）和28 d(3.296±0.735 0 vs 0.900±0.208 2,P<0.05）呈現(xiàn)有統(tǒng)計學(xué)意義的高表達(dá)。TGF-β1與對照組相比，從2 d(2.694±0.194 5 vs 1.000±0.152 8,P<0.01),7 d(1.849±0.088 8 vs 1.000±0.152 8,P<0.01),14 d(1.944±0.098 4 vs 1.000±0.152 8,P<0.01），并一直持續(xù)到28 d(2.467±0.260 3 vs1.000±0.152 8,P<0.01），均為有統(tǒng)計學(xué)意義的高表達(dá)。圖2 PQ中毒小鼠模型肺組織中相關(guān)炎癥纖維化指標(biāo)的蛋白檢測結(jié)果

對照組中TNC僅微量表達(dá)。但是PQ中毒小鼠肺組織中TNC在基因和蛋白水平均明顯高表達(dá)，見圖3�；虻谋磉_(dá)高峰早于蛋白表達(dá)，在2 d達(dá)高峰。TNC基因表達(dá)量與對照組相比各組結(jié)果如下：2 d(5.038±0.421 8 vs 1.212±0.427 7,P<0.01),7 d(3.508±0.640 5 vs 1.212±0.427 7,P<0.05),14d(2.177±0.915 8 vs 1.212±0.427 7,P>0.05),28 d(1.351±0.201 2 vs 1.212±0.427 7,P>0.05),2 d和7d時差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其余無統(tǒng)計學(xué)意義。TNC蛋白從2 d(2.575±0.435 1 vs 1.000±0.471 5,P<0.05）開始升高，7 d(5.525±0.256 0 vs 1.000±0.471 5,P<0.01）達(dá)高峰，之后表達(dá)降低。在14 d(2.511±0.568 9vs 1.000±0.471 5,P>0.05）和28 d(1.790±0.178 9vs 1.000±0.471 5,P>0.05）與對照組比較，蛋白表達(dá)量無統(tǒng)計學(xué)差異。IHC結(jié)果可見，對照組幾乎無黃染，PQ作用后的各個時間點均可見一定程度的黃染，7 d黃染最為明顯，并且主要分布于損傷的肺間質(zhì)區(qū)。3 討論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]血清肌腱蛋白C評估急性百草枯中毒患者肺損傷[J]. 劉倩倩,劉曉偉,張迪,蘭洪海,馬濤,劉志,劉偉.  中華急診醫(yī)學(xué)雜志. 2019 (03)



本文編號：3073388