背景與目的：骨質(zhì)疏松癥（osteoporosis）是一種進(jìn)行性全身性骨代謝性疾病,以骨量減少和骨組織微結(jié)構(gòu)破壞為特征,導(dǎo)致骨質(zhì)脆性增加和易于骨折。目前全世界約2億人患有骨質(zhì)疏松癥,其發(fā)病率已躍居常見病、多發(fā)病的第7位。目前,用于治療骨質(zhì)疏松癥的藥物在一定程度上能減輕骨質(zhì)疏松癥患者的臨床癥狀,提高骨密度,改善骨微結(jié)構(gòu),降低骨折風(fēng)險(xiǎn),但大多數(shù)藥物長期療效不明確,缺乏安全性,長期用藥費(fèi)用昂貴,患者依從性差。課題組前期的研究發(fā)現(xiàn),黃精的主要活性成分黃精多糖可以抑制骨質(zhì)疏松癥大鼠模型的骨吸收,改善骨質(zhì)流失,起到防治骨質(zhì)疏松癥的作用,但其作用機(jī)制尚未明確。本實(shí)驗(yàn)基于Wnt/β-catenin信號(hào)通路探討黃精多糖對(duì)體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨分化的促進(jìn)作用及其可能的作用機(jī)制。方法：（1）小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng),顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化；（2）MTT法測定不同濃度黃精多糖對(duì)BMSCs細(xì)胞增殖的影響；（3）在成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)下,五個(gè)實(shí)驗(yàn)組給予終濃度為5、10、25、50、100mg/L的黃精多糖進(jìn)行干預(yù),對(duì)照組加等量的無血清培養(yǎng)基,顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化；（4）誘導(dǎo)14天后,PNPP法檢測堿性... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
個(gè)人簡歷
本文主要英文縮略詞索引
摘要
Abstract
前言
第一部分 黃精多糖促進(jìn)骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化
    1 材料和方法
        1.1 材料
            1.1.1 細(xì)胞株
            1.1.2 主要儀器設(shè)備
            1.1.3 主要耗材
            1.1.4 藥物與主要試劑
            1.1.5 主要試劑的配制
        1.2 方法
            1.2.1 小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)
            1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及細(xì)胞接種
            1.2.3 MTT法測定黃精多糖對(duì)BMSCs細(xì)胞增殖的影響
            1.2.4 堿性磷酸酶活性檢測
            1.2.5 茜素紅染色檢測礦化結(jié)節(jié)
            1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測成骨相關(guān)基因
            1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2 結(jié)果
        2.1 BMSCs細(xì)胞生長情況及形態(tài)學(xué)變化
        2.2 黃精多糖對(duì)細(xì)胞增殖的影響
        2.3 黃精多糖能顯著提高BMSCs堿性磷酸酶活性
        2.4 黃精多糖能明顯增強(qiáng)BMSCs細(xì)胞外基質(zhì)礦化
        2.5 黃精多糖能明顯促進(jìn)BMSCs成骨分化相關(guān)基因的mRNA的表達(dá)
    3 討論
    4 小結(jié)
第二部分 黃精多糖通過Wnt/β-catenin信號(hào)通路調(diào)控BMSCs向成骨細(xì)胞分化
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 細(xì)胞株
            1.1.2 主要儀器設(shè)備
            1.1.3 主要耗材
            1.1.4 主要試劑
            1.1.5 主要試劑的配制
        1.2 方法
            1.2.1 qRT-PCR檢測β-catenin基因的表達(dá)
            1.2.2 Western Blot檢測β-catenin蛋白的表達(dá)
            1.2.3 免疫熒光染色鑒定β-catenin入核
            1.2.4 雙熒光素酶報(bào)告基因的檢測
            1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2 結(jié)果
        2.1 黃精多糖上調(diào)BMSCs細(xì)胞總β-catenin和細(xì)胞核β-catenin的表達(dá)
        2.2 黃精多糖能促進(jìn)BMSCs β-catenin向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移和定位
        2.3 黃精多糖促進(jìn)β-catenin/TCF/LEF轉(zhuǎn)錄活性
    3 討論
    4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述：骨質(zhì)疏松癥藥物治療研究現(xiàn)狀
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]二膦酸鹽類藥物學(xué)術(shù)研究進(jìn)展——治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的療效和藥物性[J]. 崔凱,馬愛霞.  現(xiàn)代商貿(mào)工業(yè). 2016(09)
[2]骨質(zhì)疏松治療促骨形成與抗骨吸收藥物序貫或聯(lián)合應(yīng)用[J]. 盛志峰,陳瑜,廖二元.  中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志. 2015(03)
[3]骨質(zhì)疏松性骨折患者抗骨質(zhì)疏松治療與管理專家共識(shí)[J].   中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志. 2015(03)
[4]絕經(jīng)后女性骨質(zhì)疏松的治療[J]. 張慧欣,鄭源強(qiáng),韓新榮.  中國婦幼保健. 2015(12)
[5]中國大陸地區(qū)以-2.5SD為診斷的骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率文獻(xiàn)回顧性研究[J]. 張智海,劉忠厚,石少輝,李艷寧.  中國骨質(zhì)疏松雜志. 2015(01)
[6]調(diào)控成骨細(xì)胞分化及骨形成關(guān)鍵信號(hào)通路的研究進(jìn)展[J]. 徐練,孔清泉.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2014(12)
[7]鯽魚卵唾液酸糖蛋白對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的改善作用[J]. 王姍姍,周曉春,李秀秀,薛長湖,王靜鳳.  食品科學(xué). 2014(13)
[8]黃精多糖對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化中PINP和BMP-2表達(dá)的影響[J]. 曾高峰,宗少暉,鄒斌,李柯柯.  天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2014(08)
[9]中醫(yī)藥治療骨質(zhì)疏松癥研究現(xiàn)狀及進(jìn)展[J]. 江婷,方朝暉.  中醫(yī)藥臨床雜志. 2014(05)
[10]近五年中西醫(yī)結(jié)合治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的臨床研究進(jìn)展[J]. 李鼎鵬,謝興文,宋敏,侯費(fèi)祎,趙永利.  中國骨質(zhì)疏松雜志. 2014(03)



本文編號(hào)：3056843