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AMPK通路在飽和脂肪酸誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用研究

發(fā)布時間:2021-01-04 05:12
  研究目的:利用棕櫚酸(palmitate acids)處理體外分化成熟肌管,構(gòu)建飽和脂肪酸誘導(dǎo)肌肉內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)模型,研究飽和脂肪酸作用于骨骼肌的早期階段AMPK通路激活與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的相關(guān)性研究,以及不同程度激活A(yù)MPK通路對于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響,從而為預(yù)防肥胖誘導(dǎo)的病理變化提供理論指導(dǎo)。研究方法:(1)以體外誘導(dǎo)分化成熟的肌管為研究對象,利用飽和脂肪酸中主要成分palmitate處理肌管不同時間(3h、6h、12h、24h),提取總蛋白和RNA;利用Western blotting檢測p-AMPK和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PERK通路下游蛋白在palmitate處理肌管不同時間點(diǎn)后的動態(tài)變化。(2)選取AMPK通路激活程度與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激最為相關(guān)的時間點(diǎn),利用Compound C抑制AMPK信號通路的激活,利用Real-time PCR和Western blotting檢測AMPK阻斷后對于palmitate誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PERK通路下游基因與蛋白表達(dá)的影響。(3)利用不同濃度AICAR處理肌管,利用Western blotting和Real-time PCR檢測不同程度激活A(yù)MPK對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PER... 

【文章來源】:北京體育大學(xué)北京市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

AMPK通路在飽和脂肪酸誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用研究


骨骼肌中未折疊蛋白反應(yīng)途經(jīng)的示意圖

肌管,蛋白C,C2C12細(xì)胞,情況


表 9 Palmitate 處理不同時間點(diǎn) C2C12 細(xì)胞肌管,p-AMPK、AMPK 蛋白的表達(dá)情況Table9 Palmitate treatment of C2C12 cells at different time points, the expression ofp-AMPK,AMPK protein分組蛋白Con Palmitate 3h Palmitate 6h Palmitate 12h Palmitate 24hp-AMPK1.00±0.01 2.51±0.51 3.80±0.86** 4.93±1.06*** 0.52±0.61AMPK1.00±0.01 1.00±0.09 0.88±0.10 0.73±0.07* 0.40±0.14***

對照組,C2C12細(xì)胞,細(xì)胞


39圖 4.1.2 palmitate 處理不同時間點(diǎn) C2C12 細(xì)胞,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)記蛋白的表達(dá)情況(同對照組相比,**P<0.01,***P<0.001)Fig4.1.2. Palmitate treatment of C2C12 cells at different time points, the expression ofendoplasmic reticulum stress marker protein (**P<0.01, ***P<0.001 vs. Control group)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]A potential strategy for treating atherosclerosis: improving endothelial function via AMP-activated protein kinase[J]. Feng Gao,Jiemei Chen,Haibo Zhu.  Science China(Life Sciences). 2018(09)



本文編號:2956218

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