IL-17F對大鼠成骨細(xì)胞的作用及與ERK1/2的關(guān)系
發(fā)布時(shí)間:2020-12-29 16:59
目的本實(shí)驗(yàn)在課題組前期對骨質(zhì)疏松大鼠成骨細(xì)胞代謝變化的研究基礎(chǔ)上,以IL-17F干預(yù)大鼠成骨細(xì)胞,進(jìn)一步探究IL-17F對大鼠成骨細(xì)胞礦化功能的影響,以及對特異性轉(zhuǎn)錄因子Osterix及相關(guān)調(diào)節(jié)因子Runx2蛋白表達(dá)及對ERK通路激酶ERK1/2磷酸化水平的影響,探討IL-17F對成骨細(xì)胞有否直接作用,及是否影響MAPK/ERK通路的激活,揭示其作用機(jī)制。方法1大鼠成骨細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定采用酶消化法和組織塊培養(yǎng)法分離提取新生24h內(nèi)Wistar大鼠顱蓋骨原代成骨細(xì)胞,采用差速貼壁法進(jìn)行細(xì)胞純化。用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、生長情況,并采用堿性磷酸酶染色(鈣鈷法)進(jìn)行細(xì)胞鑒定,取第4代成骨細(xì)胞進(jìn)行研究。2實(shí)驗(yàn)分組與處理將第4代的成骨細(xì)胞進(jìn)行分組處理和指標(biāo)檢測:2.1采用茜素紅染色法檢測IL-17F對成骨細(xì)胞礦化功能的影響分為兩組:對照組和IL-17F組。對照組用含10%胎牛血清低糖DMEM培養(yǎng)基,實(shí)驗(yàn)組在培養(yǎng)基中加入100ng/mL IL-17F。培養(yǎng)10d后,用pH 4.3,0.1%茜素紅染液進(jìn)行礦化結(jié)節(jié)染色。2.2采用Western blot法檢測Runx2、Osterix蛋白...
【文章來源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
符號說明
前言
材料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表文章及獲獎(jiǎng)項(xiàng)目
學(xué)位論文評閱及答辯情況表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]右歸飲通過Wnt/ERK信號通路交叉串?dāng)_影響成骨細(xì)胞相關(guān)蛋白的表達(dá)[J]. 范連霞,章建華,尹華,張成龍. 中華中醫(yī)藥雜志. 2016(10)
[2]葛根素通過ERK1/2信號通路調(diào)控成骨細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 康鑫,姜金,譚小義,張波,陳聰,楊晨暉,夏亞一. 世界科技研究與發(fā)展. 2015(06)
[3]唑來膦酸治療骨質(zhì)疏松性股骨粗隆間骨折的臨床研究[J]. 劉飛,史曉林,吳連國,劉康. 中國中醫(yī)骨傷科雜志. 2015(09)
[4]鏈脲佐菌素誘導(dǎo)1型糖尿病大鼠股骨生物力學(xué)變化及唑來膦酸的影響[J]. 張娜,叢靜,于靈芝,崔敏. 中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版). 2015(04)
[5]細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶ERK1/2在粗糙鈦表面影響成骨細(xì)胞分化中的作用[J]. 姜煥煥,董凱,劉樹泰,柳忠豪. 上?谇会t(yī)學(xué). 2014(01)
[6]優(yōu)化組織塊法體外培養(yǎng)新生SD大鼠原代成骨細(xì)胞與鑒定[J]. 陳強(qiáng),夏天,葉哲偉,宋謀珂. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(09)
[7]大鼠成骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)和鑒定[J]. 李先安,雷光華,劉文和,李康華,覃芙. 湘南學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(01)
[8]Runx2參與調(diào)控Osterix啟動子活性及其基因表達(dá)(英文)[J]. 孫冬梅,劉中博,趙巖,宮振偉,李丹,王溪原,曾憲錄,劉文廣. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2006(10)
[9]核心結(jié)合因子α1對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞標(biāo)志基因表達(dá)的影響[J]. 董世武,應(yīng)大君,段小軍,朱楚洪,劉光久,糜建紅. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2005(09)
本文編號:2945971
【文章來源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:48 頁
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參考文獻(xiàn)
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【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]右歸飲通過Wnt/ERK信號通路交叉串?dāng)_影響成骨細(xì)胞相關(guān)蛋白的表達(dá)[J]. 范連霞,章建華,尹華,張成龍. 中華中醫(yī)藥雜志. 2016(10)
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[4]鏈脲佐菌素誘導(dǎo)1型糖尿病大鼠股骨生物力學(xué)變化及唑來膦酸的影響[J]. 張娜,叢靜,于靈芝,崔敏. 中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版). 2015(04)
[5]細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶ERK1/2在粗糙鈦表面影響成骨細(xì)胞分化中的作用[J]. 姜煥煥,董凱,劉樹泰,柳忠豪. 上?谇会t(yī)學(xué). 2014(01)
[6]優(yōu)化組織塊法體外培養(yǎng)新生SD大鼠原代成骨細(xì)胞與鑒定[J]. 陳強(qiáng),夏天,葉哲偉,宋謀珂. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(09)
[7]大鼠成骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)和鑒定[J]. 李先安,雷光華,劉文和,李康華,覃芙. 湘南學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(01)
[8]Runx2參與調(diào)控Osterix啟動子活性及其基因表達(dá)(英文)[J]. 孫冬梅,劉中博,趙巖,宮振偉,李丹,王溪原,曾憲錄,劉文廣. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2006(10)
[9]核心結(jié)合因子α1對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞標(biāo)志基因表達(dá)的影響[J]. 董世武,應(yīng)大君,段小軍,朱楚洪,劉光久,糜建紅. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2005(09)
本文編號:2945971
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