目的:瘦素抵抗在2型糖尿病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要意義,本研究通過(guò)高脂飲食誘導(dǎo)形成瘦素抵抗肥胖大鼠模型,綜合比較經(jīng)皮穴位電刺激、游泳運(yùn)動(dòng)和藥物干預(yù)對(duì)肥胖大鼠血糖血脂相關(guān)指標(biāo)及下丘腦中PTP-1B及SOCS-3水平的不同影響,探討其在改善機(jī)體瘦素抵抗?fàn)顟B(tài)和胰島素敏感性中的可能機(jī)制,以期為臨床干預(yù)瘦素抵抗導(dǎo)致的肥胖及相關(guān)疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:50只8周齡SPF級(jí)雄性wistar大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=10)和高脂組(n=40),分別予以正常飼料喂養(yǎng)和高脂飼料喂養(yǎng)8周造模。造模期間一周一次記錄各組大鼠體重、進(jìn)食量、肛鼻長(zhǎng),計(jì)算Lee's指數(shù),評(píng)定肥胖模型。造模成功后將高脂組大鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組(n=8)、電刺激組(n=8)、游泳運(yùn)動(dòng)組(n=8)、西藥立普妥降脂組(西藥降脂組)(n=8)、中藥山楂籽油降脂組(中藥降脂組)(n=8),各組仍予以高脂飲食。于干預(yù)第8周末立即處死并取材,處死前測(cè)定各組大鼠的體重及肛鼻長(zhǎng),計(jì)算Lee's指數(shù)。大鼠心尖取血,生化試劑盒檢測(cè)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游離脂肪酸(FFA)、糖化血紅蛋白(GHb)含量;ELISA試劑盒檢測(cè)大鼠血清胰島素(Insulin)、瘦素(Leptin)、抵抗素(Resistin)含量;HE染色法觀察大鼠肝臟肝小葉的組織形態(tài)學(xué)變化;透射電鏡觀察大鼠肝臟細(xì)胞內(nèi)線粒體形態(tài)變化及相關(guān)結(jié)構(gòu)變化狀況;RT-PCR法檢測(cè)下丘腦蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)、細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子-3(SOCS-3)的mRNA水平及白色脂肪組織內(nèi)Leptin、Resistin蛋白表達(dá)水平;Western Blotting法檢測(cè)大鼠下丘腦PTP-1B、SOCS-3蛋白相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果:1.高脂喂養(yǎng)8周后,高脂組大鼠的體重、Lee's指數(shù)及飲食量均高于正常對(duì)照組(P0.01),表明肥胖模型造模成功。與正常對(duì)照組相比,高脂組大鼠血清胰島素、瘦素、抵抗素含量及糖化血紅蛋白、空腹血糖、餐后2h血糖等均高于正常對(duì)照組(P0.01),表明肥胖大鼠模型同時(shí)具備瘦素抵抗?fàn)顟B(tài)。2.干預(yù)8周后各組脂代謝變化情況總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游離脂肪酸(FFA):與正常對(duì)照組比較,其余五組TC、TG、FFA均升高(P0.01)。與模型對(duì)照組相比,其余四組TC、TG、FFA均降低(P0.01);與游泳運(yùn)動(dòng)組比較,電刺激組、西藥降脂組TC、TG、FFA均升高(P0.01),中藥降脂組除TC稍升高外(P0.05),TG、FFA與正常對(duì)照組無(wú)明顯差異(P0.05)。3.HE染色和透射電鏡結(jié)果:與模型對(duì)照組比較,經(jīng)游泳運(yùn)動(dòng)干預(yù)后的肥胖大鼠肝臟組織及細(xì)胞形態(tài)有明顯的改善,中央靜脈明顯,肝小葉形態(tài)基本清晰,肝索排列相對(duì)規(guī)則,凋亡細(xì)胞減少,脂質(zhì)細(xì)胞數(shù)量較少,炎性浸潤(rùn)不明顯,細(xì)胞排列相對(duì)緊密;細(xì)胞結(jié)構(gòu)相對(duì)完整,凋亡現(xiàn)象不明顯;電刺激組大鼠表現(xiàn)為肝臟組織結(jié)構(gòu)相對(duì)清晰,肝小葉結(jié)構(gòu)基本恢復(fù),細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)相對(duì)完整,線粒體數(shù)量減少;中藥降脂組大鼠表現(xiàn)為肝臟組織結(jié)構(gòu)相對(duì)完整,肝小葉形態(tài)基本正常,突出表現(xiàn)為細(xì)胞內(nèi)脂肪聚集增多,細(xì)胞形態(tài)變大;西藥降脂組大鼠表現(xiàn)為肝臟基本結(jié)構(gòu)可見(jiàn),顯著存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)溶解,線粒體增多及部分融合,細(xì)胞形態(tài)偏瘦。4.白色脂肪組織內(nèi)Leptin、Resistin表達(dá)水平:與正常對(duì)照組比較,其余五組白色脂肪組織內(nèi)Leptin、Resistin表達(dá)水平均升高(P0.01)。與模型對(duì)照組比較,不同干預(yù)組均顯著降低了白色脂肪組織內(nèi)Leptin及Resistin的表達(dá)(P0.01)。且西藥降脂組與游泳運(yùn)動(dòng)組無(wú)顯著差異(P0.05);電刺激組和中藥降脂組則顯著高于游泳運(yùn)動(dòng)組(P0.01)。5.下丘腦內(nèi)PTP-1B及SOCS-3蛋白相對(duì)表達(dá)量和mRNA水平:正常對(duì)照組下丘腦內(nèi)PTP-1B及SOCS-3蛋白相對(duì)表達(dá)量和mRNA水平均顯著低于其余五組(P0.01),模型對(duì)照組PTP-1B蛋白相對(duì)表達(dá)量和mRNA水平則顯著高于不同干預(yù)組(P0.05或(P0.01))。其中,游泳運(yùn)動(dòng)組在抑制下丘腦神經(jīng)元內(nèi)PTP-1B及SOCS-3的mRNA水平方面顯著優(yōu)于電刺激組及中藥降脂組(P0.05),西藥降脂組則與游泳運(yùn)動(dòng)組無(wú)顯著差異(P0.05)。結(jié)論:1.不同干預(yù)方式對(duì)改善機(jī)體瘦素抵抗?fàn)顟B(tài)和胰島素敏感性均有明顯作用,其中游泳和西藥降脂組作用優(yōu)于經(jīng)皮穴位電刺激和中藥降脂組。2.機(jī)體瘦素抵抗?fàn)顟B(tài)和胰島素敏感性的改善與下丘腦內(nèi)PTP-1B及SOCS-3的蛋白表達(dá)和轉(zhuǎn)錄活性下調(diào)有關(guān)。
【學(xué)位單位】：武漢體育學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R589.2
【部分圖文】：

圖１－４游泳運(yùn)動(dòng)組?圖１－５西藥降脂組?圖１－６中藥降脂組??：各片均為２００倍鏡下觀。ａ中央靜脈（肝竇區(qū)）；ｂ肝細(xì)胞生（雙核細(xì)胞）；ｃ脂質(zhì)異位沉（脂肪變性或壞死）??如圖１－１示，正常肝臟鏡下觀組織界線清晰，肝小葉完整，以中央靜脈（一般為）為中心，肝索排列整齊，肝臟細(xì)胞大小均勻，細(xì)胞核居中，細(xì)胞形態(tài)以梭形為夾少量脂質(zhì)沉積，無(wú)空泡狀細(xì)胞出現(xiàn)，肝內(nèi)膽管排列相對(duì)規(guī)則，在肝竇區(qū)匯集，可量壞死細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，未見(jiàn)明顯炎性浸潤(rùn)，無(wú)假包膜形成。圖１－２是造模完成后對(duì)照組大鼠的肝臟染色鏡下觀，可見(jiàn)中央靜脈缺如，細(xì)胞排列紊亂，肝索形態(tài)不常肝小葉出現(xiàn)分離現(xiàn)象，有假小葉形成，肝臟細(xì)胞彌漫性肥大，中央靜脈附近出現(xiàn)肝細(xì)胞再生，再生肝細(xì)胞體積較大、細(xì)胞核超出正常肝細(xì)胞細(xì)胞核體積、染色較深雙核現(xiàn)象；此外可見(jiàn)彌漫性的細(xì)胞壞死及脂質(zhì)沉積，壞死細(xì)胞被吞噬后出現(xiàn)大量空性浸潤(rùn)明顯。圖１－３，經(jīng)電刺激處理后可見(jiàn)肝小葉形態(tài)相對(duì)完整，但仍可見(jiàn)肝臟細(xì)

圖１－４游泳運(yùn)動(dòng)組?圖１－５西藥降脂組?圖１－６中藥降脂組??：各片均為２００倍鏡下觀。ａ中央靜脈（肝竇區(qū)）；ｂ肝細(xì)胞生（雙核細(xì)胞）；ｃ脂質(zhì)異位沉（脂肪變性或壞死）??如圖１－１示，正常肝臟鏡下觀組織界線清晰，肝小葉完整，以中央靜脈（一般為）為中心，肝索排列整齊，肝臟細(xì)胞大小均勻，細(xì)胞核居中，細(xì)胞形態(tài)以梭形為夾少量脂質(zhì)沉積，無(wú)空泡狀細(xì)胞出現(xiàn)，肝內(nèi)膽管排列相對(duì)規(guī)則，在肝竇區(qū)匯集，可量壞死細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，未見(jiàn)明顯炎性浸潤(rùn)，無(wú)假包膜形成。圖１－２是造模完成后對(duì)照組大鼠的肝臟染色鏡下觀，可見(jiàn)中央靜脈缺如，細(xì)胞排列紊亂，肝索形態(tài)不常肝小葉出現(xiàn)分離現(xiàn)象，有假小葉形成，肝臟細(xì)胞彌漫性肥大，中央靜脈附近出現(xiàn)肝細(xì)胞再生，再生肝細(xì)胞體積較大、細(xì)胞核超出正常肝細(xì)胞細(xì)胞核體積、染色較深雙核現(xiàn)象；此外可見(jiàn)彌漫性的細(xì)胞壞死及脂質(zhì)沉積，壞死細(xì)胞被吞噬后出現(xiàn)大量空性浸潤(rùn)明顯。圖１－３，經(jīng)電刺激處理后可見(jiàn)肝小葉形態(tài)相對(duì)完整，但仍可見(jiàn)肝臟細(xì)

一電閡激組
【參考文獻(xiàn)】

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1 蘭海云;韓炳星;雷浪偉;趙偉;陳斌;;腸道菌群對(duì)胰島素敏感度的影響[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2017年02期

2 陳麗;陳瑞;梁鳳霞;舒晴;吳群;徐芬;王華;;NF-κB信號(hào)通路與胰島素抵抗[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2015年05期

3 徐凱旋;郁婷燕;管磊劍;王心如;夏彥愷;吳笛;;下丘腦中瘦素/瘦素受體的促發(fā)育作用被干擾引起成年期肥胖:肥胖新機(jī)制[J];中華疾病控制雜志;2015年09期

4 蒲詩(shī)云;鄺江瑩;何金汗;;SIRT6在能量代謝中的作用[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2014年06期

5 李強(qiáng);徐芬;梁鳳霞;陳瑞;吳松;劉建民;楊柳;閔霏;葉金甜;;“標(biāo)本配穴”電針對(duì)胰島素抵抗大鼠股四頭肌線粒體超微結(jié)構(gòu)和生物合成功能的影響[J];中國(guó)針灸;2014年06期

6 李瑞凱;陳潔;吳利平;張華;;線粒體與2型糖尿病[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年18期

7 宋桉;趙家軍;;肥胖致胰島素抵抗的機(jī)制研究新進(jìn)展[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2013年17期

8 朱洪;張震;劉義;陳燕;譚擁軍;;Foxa2調(diào)控P19胚胎癌細(xì)胞心肌分化過(guò)程的分子機(jī)制[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年04期

9 何勁松;廖皓宇;魏壽江;;蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1B與2型糖尿病的相關(guān)性研究進(jìn)展[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年05期

10 時(shí)麗麗;張莉;譚初兵;徐為人;杜冠華;;線粒體功能損傷與胰島素抵抗[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2012年11期

本文編號(hào)：2883189