發(fā)布時(shí)間：2020-10-24 20:00

　　 背景:眾所周知,肥胖已成為影響全球人類健康的重要因素。世界衛(wèi)生組織稱,至2030年,全球肥胖的發(fā)病率將達(dá)到57.8%。肥胖可以引發(fā)全身各個(gè)系統(tǒng)的疾病,全球有50%以上的死亡是由肥胖相關(guān)的慢性疾病造成的。因此,肥胖問題亟待解決。血管生成素樣蛋白8(angiopoietin like protein 8,Angptl8)是由肝臟分泌的的腦腸肽,可通過抑制脂蛋白酯酶的活性調(diào)節(jié)脂代謝,另外,與機(jī)體的攝食狀態(tài)存在緊密的聯(lián)系。目的:(1)觀察Angptl8在下丘腦攝食調(diào)節(jié)相關(guān)核團(tuán)的分布。(2)探究外周(尾靜脈)及中樞(側(cè)腦室)注射Angptl8對(duì)于攝食的調(diào)節(jié)作用。(3)研究尾靜脈及側(cè)腦室注射Angptl8對(duì)于下丘腦攝食相關(guān)核團(tuán)c-Fos表達(dá)的影響。(4)探討尾靜脈及側(cè)腦室注射Angptl8調(diào)控?cái)z食的相關(guān)分子機(jī)制。(5)觀察尾靜脈及側(cè)腦室注射Angptl8對(duì)于小鼠白色脂肪堆積及棕色脂肪組織產(chǎn)熱的影響。方法:(1)通過尾靜脈注射觀察外周Angptl8對(duì)C57BL/6J小鼠攝食的影響及長期給藥對(duì)體重的影響。(2)通過側(cè)腦室置管、側(cè)腦室微量注射探究中樞Angptl8對(duì)C57BL/6J小鼠攝食的影響及長期給藥對(duì)體重的影響。(3)通過免疫組化技術(shù)檢測Angplt8在下丘腦攝食相關(guān)核團(tuán)的分布、外周及中樞注射Angptl8對(duì)下丘腦攝食相關(guān)核團(tuán)c-Fos及Neuropeptide-Y(NPY)表達(dá)的影響。(4)通過蘇木素伊紅(hematoxylineosin,HE)染色法研究棕色脂肪組織形態(tài),蛋白質(zhì)印跡法、實(shí)時(shí)熒光定量PCR等分子生物學(xué)技術(shù)檢測解偶聯(lián)蛋白-1(uncoupling protein-1,Ucp-1)表達(dá)水平。結(jié)果:(1)尾靜脈注射0.1ml濃度為3μg/ml或30μg/ml的Angptl8可明顯減少小鼠的夜間12小時(shí)累積攝食量,并且抑食作用呈現(xiàn)劑量依賴性(3μg/ml:5.14±0.26 g vs.5.95±0.21 g,P0.05;30μg/ml:4.58±0.28 g vs.5.95±0.21 g,P0.05);側(cè)腦室注射2μl濃度0.3μg/μl的Angptl8可明顯減少小鼠夜間6小時(shí)累積攝食(2.00±0.28 vs.3.82±0.25 g,P0.05)。單次尾靜脈(30μg/ml)和側(cè)腦室(0.3μg/μl)注射Angptl8均可減少小鼠24h體重增加量。(2)Angptl8在下丘腦攝食相關(guān)核團(tuán)室旁核(paraventricular nucleus,PVN),背內(nèi)側(cè)核(dorsomedial hypothalamus,DMH),腹內(nèi)側(cè)核(ventromedial hypothalamus,VMH)和弓狀核(arcuate nucleus,ARC)均有表達(dá),但免疫組化和PCR結(jié)果顯示禁食前后上述核團(tuán)Angptl8表達(dá)無明顯變化。(3)尾靜脈注射Angptl8可顯著減少DMH中c-Fos免疫陽性神經(jīng)元的數(shù)量(103.70±8.55 vs.73.50±11.52個(gè),P0.05)。側(cè)腦室注射Angptl8可顯著減少PVN(161.00±5.41 vs.66.33±9.65個(gè),P0.05)、DMH(125.13±8.86 vs.98.00±9.02個(gè),P0.05)和ARC(100.80±26.26 vs.154.08±35.15個(gè),P0.05)中c-Fos免疫陽性神經(jīng)元的數(shù)量。側(cè)腦室注射Angptl8減少DMH(37.67±5.69 vs.20.25±7.18個(gè),P0.05)中c-Fos和NPY共染的免疫陽性神經(jīng)元數(shù)量。(4)連續(xù)9天長期給予尾靜脈注射Angptl8,小鼠總體重增量顯著降低(3.69±1.10g vs.6.88±0.64 g,P0.05),附睪脂肪占總體重比例降低(0.01±0.0008 vs.0.01±0.0031,P0.05),腹股溝脂肪占總體重比例(0.01±0.00 vs.0.01±0.00,P0.05)和血清游離脂肪酸含量(0.17±0.07μmol/mg vs.0.19±0.03μmol/mg,P0.05)未發(fā)生變化。連續(xù)9天給予中樞注射Angptl8,小鼠總體重增量顯著降低(0.79±0.60g vs.2.64±0.36 g,P0.05),附睪脂肪占總體重比例(0.11±0.04 vs.0.06±0.01,P0.05)和腹股溝脂肪占總體重比例(0.08±0.02 vs.0.05±0.01,P0.05)顯著升高,而血清游離脂肪酸含量顯著降低(0.15±0.05μmol/mg vs.0.10±0.03μmol/mg,P0.05)。(5)尾靜脈注射Angptl8顯著降低棕色脂肪組織(brown adipose tissue,BAT)占總體重比例(0.0030±0.0001 g vs.0.0037±0.0030 g,P0.05),側(cè)腦室注射Angptl8顯著升高BAT占總體重比例(0.02±0.01 g vs.0.01±0.00 g,P0.05),但兩者對(duì)BAT細(xì)胞形態(tài)和產(chǎn)熱相關(guān)蛋白Ucp-1表達(dá)均未產(chǎn)生影響。結(jié)論:(1)Angptl8廣泛存在于下丘腦攝食相關(guān)核團(tuán)PVN、VMH、DMH和ARC中。(2)Angptl8通過影響下丘腦DMH中NPY神經(jīng)元的活性發(fā)揮抑制攝食的作用。(3)Angptl8影響C57BL/6J小鼠脂肪堆積但對(duì)棕色脂肪組織產(chǎn)熱沒有影響。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步探究Angptl8在肥胖和能量代謝紊亂等疾病的調(diào)控中發(fā)揮的作用提供了一定的實(shí)驗(yàn)參考依據(jù)。
【學(xué)位單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R589.2
【部分圖文】：

1 小鼠置于定位儀上暴露前后囟、矢狀調(diào)整耳桿位置使得前囟、后囟在同e Brain in Stereotaxic Coordinates》一，中線旁開 0.3 mm，深度 2.2-2.3 位點(diǎn)鉆孔，將套管（26 gauge）植入位側(cè)腦室打孔（左）并將套管植入側(cè)腦水泥和牙科螺釘固定外套管，使外

材料與方法圖 1 小鼠置于定位儀上暴露前后囟、矢狀縫定位、置管：調(diào)整耳桿位置使得前囟、后囟在同一水平面且同考《The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates》一書定位小鼠側(cè)：前囟后 1 mm，中線旁開 0.3 mm，深度 2.2-2.3 mm[55]。標(biāo)記在顱骨表面定位點(diǎn)鉆孔，將套管（26 gauge）植入側(cè)腦室（圖 2

圖 3 牙科水泥固定套管鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（0.9%生理鹽水 Angptl8 組（0.3 μg/μl），用注射針連/μl 的 Angptl8 和 0.3 μg/μl 的 Angpt，停留 2 分鐘后緩慢拔針（注射針比
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3 Joseph O.Nnodim;體視學(xué)評(píng)定鼠肩■間棕色脂肪組織的脂滴表面積和血管容量與年齡變化的關(guān)系[J];廣東解剖學(xué)通報(bào);1989年02期

4 高本波,韓啟德;去甲腎上腺素對(duì)棕色脂肪組織募集反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1997年03期

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6 胡龍;何玉秀;;運(yùn)動(dòng)、肥胖與棕色脂肪組織[J];中國運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志;2013年10期

7 朱艷雯;萬倩;鄒超;程傳力;劉新;周軍;;棕色脂肪組織的影像學(xué)檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2019年35期

8 賀斌;王炳蔚;鄭瑞茂;;人類棕色脂肪組織產(chǎn)熱節(jié)律調(diào)控[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2016年05期

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10 楊帆;李曉南;;棕色脂肪組織在肥胖與代謝綜合征發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究[J];發(fā)育醫(yī)學(xué)電子雜志;2019年01期

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10 于洋;母代高脂飲食對(duì)子代代謝特征的影響及其機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2854917