【摘要】：目的:探討砷中毒與糖尿病的關(guān)聯(lián)性及鋅α2糖蛋白(ZAG)在其中的生物學(xué)效應(yīng),為砷暴露與糖尿病發(fā)病關(guān)聯(lián)及診療提供新思路。方法:將40只SPF級SD大鼠,按體重隨機(jī)分為對照組,糖尿病組,亞砷酸鈉低、中、高劑量染毒組(低砷組、中砷組、高砷組),每組8只,雌雄各半。對染砷組大鼠(經(jīng)口)連續(xù)染砷15周,劑量從低到高依次為0.45mg/kg、2.25mg/kg和11.25mg/kg。實(shí)驗(yàn)期間每周測定各組大鼠體重。第5周后糖尿病組大鼠腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病SD大鼠模型。每間隔2周測定1次各組大鼠空腹血糖、尿糖。實(shí)驗(yàn)第15周,腹腔麻醉后摘取各組大鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器組織稱重,并將血樣按需求離心分裝于-80℃保存。用COD-PAP酶法測定大鼠血樣中總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG),酶標(biāo)儀直接法測定低密度脂蛋白膽固醇(ligh-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C),酶比色法測定糖化血紅蛋白(glycosylated hemoglobin,HAbC1),ELISA法測定胰島素(insulin,INS)、胰島素樣生長因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)。HE染色觀察肝、腎組織病理學(xué)變化。石墨爐原子吸收法測定大鼠尿砷、血砷及肝、腎組織中砷含量。ELISA法測定肝組織中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量,化學(xué)熒光法測定肝組織中活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性。實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)測定大鼠肝組織中鋅-α2糖蛋白(zinc-α2glycoprotein,ZAG)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α(peroxisomal Proliferators-activated receptorγ-coactivator-1α,PGC-1α)、胰島素(insulin,INS)及胰島素受體底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)基因mRNA表達(dá)水平。蛋白免疫印跡法(Western-blot,WB)測定大鼠肝組織中ZAG、PGC-1α、IRS-1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)第15周時,糖尿病組與高砷組大鼠體重低于對照組(P0.05),各染砷組大鼠與糖尿病組的體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.實(shí)驗(yàn)第11、13、15周高砷組大鼠空腹血糖水平均高于對照組,并且15周時高砷組大鼠尿糖檢測結(jié)果為陽性(P0.05)。3.糖尿病組與各染砷組大鼠TC、TG、LDL-C和HAbC1水平高于對照組,INS、IGF-1與HDL-C則低于對照組(P0.05);高砷組大鼠與糖尿病組的LDL-C、HDL-C、INS、IGF-1差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.糖尿病組與高砷組大鼠的肝、腎臟臟器系數(shù)均高于對照組(P0.001),高砷組大鼠與糖尿病組的肝臟臟器系數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5.對照組肝、腎組織結(jié)構(gòu)正常,無明顯病變;糖尿病組肝、腎組織出現(xiàn)病變;染砷大鼠病理改變隨著劑量升高愈加嚴(yán)重。6.染砷組大鼠的尿砷、血砷及肝、腎組織中砷含量明顯高于對照組(P0.05)。7.糖尿病組與各染砷組大鼠GSH與SOD活性依次下降,而MDA、ROS活性則依次上升(P0.05)。高砷組大鼠與糖尿病組的SOD差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);低、中砷組與糖尿病組的GSH、MDA、SOD、ROS差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。8.隨著亞砷酸鈉染毒濃度增加,低、中、高砷組大鼠肝組織ZAG、PGC-1α、INS及IRS-1基因mRNA與蛋白表達(dá)依次降低(P0.05)。中砷組與糖尿病組大鼠肝組織ZAG、PGC-1α、INS及IRS-1基因mRNA表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。高砷組與糖尿病組大鼠肝組織中的ZAG、PGC-1α、IRS-1蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:砷可能通過氧化應(yīng)激作用使ZAG表達(dá)下調(diào)進(jìn)而影響PGC-1α功能,導(dǎo)致肝臟糖脂代謝紊亂,加重胰島素分泌不足或障礙,促使血糖升高,提示砷有可能促使糖尿病的發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R587.1;R595
【圖文】：

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文22圖1 不同時間點(diǎn)各組大鼠體重的變化Figure 1 The change of weight of rats in each group at different time points2 大鼠不同時間點(diǎn)空腹血糖的變化糖尿病組中有6只大鼠空腹血糖高于11.1mmol/L，成模率75%。實(shí)驗(yàn)第11、13、15周高砷組大鼠空腹血糖水平高于對照組，并且實(shí)驗(yàn)第15周時中、高砷組大鼠空腹血糖水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)第11、13、15周低、中砷組大鼠空腹血糖水平低于高砷組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。詳細(xì)結(jié)果見表11，圖2。表11 不同時間點(diǎn)各組大鼠空腹血糖的變化（mmol/L，x ±s）Table11 Changes of fasting blood glucose in rats at different time points（mmol/L，x ±s）組別 例數(shù)（n） 第5周 第7周 第9周 第11周 第13周 第15周對照組 8 3.98±0.57 6.31±0.35 4.96±0.47 4.30±0.65 4.80±0.42 4.40±0.40糖尿病組 6 3.97±0.62 17.55±2.90a20.02±6.72a18.95±3.42a18.60±8.11a17.82±2.26a低砷組 8 4.06±1.03 6.43±0.77 5.16±0.59 4.71±0.39b4.79±0.49b5.38±0.85b中砷組 8 4.98±1.02 6.26±0.83 4.75±0.64 4.71±0.44b4.44±0.44b5.39±0.78ab高砷組 7 4.77±1.08 6.51±0.67 5.04±0.72 5.83±1.13a6.01±0.67a6.46±0.78aH 6.346 17.062 16.446 22.719 24.892 27.045P 0.175 0.002 0.002 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001[注]a與對照組比較

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文23圖2 不同時間點(diǎn)各組大鼠空腹血糖的變化Figure 2 Changes of fasting blood glucose in rats at different time points3 各組大鼠尿糖變化尿糖指標(biāo)判斷依據(jù)是根據(jù)尿糖試紙的顏色反應(yīng)顯示尿糖含量，其中檢測結(jié)果分別表示為－、±、1＋、≥2＋（包括2＋、3＋、4＋）。實(shí)驗(yàn)第5周各組大鼠尿糖檢測結(jié)果均為陰性，經(jīng)秩和檢驗(yàn)無統(tǒng)計學(xué)意義（H=0，P=1.000）；實(shí)驗(yàn)第15周，糖尿病組大鼠尿糖檢測結(jié)果均呈“≥2＋”，高砷組大鼠尿糖檢測結(jié)果均呈“1＋”，中砷組有4只大鼠尿糖檢測結(jié)果呈“±”，經(jīng)秩和檢驗(yàn)有統(tǒng)計學(xué)意義（H=33.040

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文27圖4 各組大鼠腎臟病理損傷情況（HE，×200）Figure 4 Pathological damage of kidney in each group（HE，×200）7 各組大鼠砷含量的比較隨著亞砷酸鈉染毒劑量升高，大鼠的尿砷、血砷及肝、腎組織中砷含量均呈上升趨勢。各染砷組大鼠的尿砷、血砷及肝、腎組織中砷含量明顯高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；低、中砷組大鼠的尿砷、血砷及肝、腎組織中砷含量均低于高砷組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。尿砷、血砷與肝、腎組織中砷含量兩兩之間均呈正相關(guān)（P＜0.05）。詳細(xì)結(jié)果見表16-18。

【參考文獻(xiàn)】

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1 任冬燕;徐夢偉;孫高峰;謝惠芳;;大鼠砷染毒與糖尿病的相關(guān)性[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);2018年02期

2 徐夢偉;任冬燕;孫高峰;謝惠芳;;亞砷酸鈉對SD大鼠臟器損傷的實(shí)驗(yàn)研究[J];新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2018年02期

3 李麗萍;黃凌燕;張亞娟;李玲;張鵬舉;劉賀榮;德小明;;DEHP低劑量慢性暴露對雌性大鼠糖代謝的影響[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);2017年08期

4 李述剛;徐孟川;芮東升;徐上知;牛強(qiáng);馮剛玲;;無機(jī)砷誘導(dǎo)鼠類氧化損傷的Meta分析[J];毒理學(xué)雜志;2017年04期

5 LI Xiu Ting;YU Peng Fei;GAO Yan;GUO Wen Hui;WANG Jun;LIU Xin;GU Ai Hua;JI Gui Xiang;DONG Qiu;WANG Bo Shen;CAO Ying;ZHU Bao Li;XIAO Hang;;Association between Plasma Metal Levels and Diabetes Risk: a Case-control Study in China[J];Biomedical and Environmental Sciences;2017年07期

6 楊歡;王素華;蘇鑫;高艷榮;;亞砷酸鈉對雄性大鼠炎癥因子和氧化應(yīng)激的影響[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);2017年06期

7 袁花;;血糖檢驗(yàn)和尿糖檢驗(yàn)在糖尿病患者中的臨床價值研究[J];臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐;2017年03期

8 賈昊川;金秀平;魏劍芬;;甘油三酯對2型糖尿病患者血清胰島素水平的影響[J];華北理工大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2017年01期

9 劉恩;鄭楠;范彩云;張養(yǎng)東;王尚;黃帥;程建波;;砷和鉛對HepG2細(xì)胞毒性和氧化損傷的研究[J];中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2016年08期

10 周德鵬;梁英杰;曹東華;徐華;;糖尿病大鼠肺組織PI3K/Akt表達(dá)的變化及意義[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2016年04期

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1 張煥莉;鋅α2糖蛋白對線粒體生物合成相關(guān)因子的影響及其信號通路機(jī)制[D];南華大學(xué);2011年

本文編號：2790009