【摘要】：目的通過研究早期補充不同劑量雌激素對卵巢去勢大鼠各項骨參數(shù)、血管參數(shù)及局部骨組織相關蛋白血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、骨保護素(OPG)、雌激素受體beta(ERβ)和核因子κB受體活化因子配體(RANKL)表達的影響,探討絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的不同濃度雌激素替代治療中血管形成所發(fā)揮的不同作用。方法取6周齡SD大鼠共計120只,隨機分為假手術組(SHAM)、卵巢去勢組(OVX)、雌激素替代治療組(OVX+E2),其中雌激素替代治療組再根據(jù)不同濃度分為3組:高濃度50mg/kg/次(H)、正常濃度20mg/kg/次(N)、低濃度5mg/kg/次(L),實驗共分為5組,每組24只;卵巢切除后第三天隨即開始隔天注射不同濃度雌激素,模型組與假手術組注射同樣體積溶劑。術后6周,處死大鼠取出股骨,通過micro CT檢測骨密度和骨微結(jié)構(gòu),western blot檢測局部骨組織中ERβ、VEGF、Rankl和OPG蛋白表達量,通過CD31免疫熒光及硅膠灌注成像分析股骨近端的血管分布。結(jié)果(1)卵巢去勢大鼠破骨細胞破骨活動活躍,雌激素替代治療后,破骨細胞表達RANKL明顯抑制。卵巢去勢大鼠骨微結(jié)構(gòu)較假手術組明顯破壞,其破壞程度均可被不同濃度雌激素補充所改善。(2)卵巢切除大鼠股骨骨密度明顯低于假手術組,不同濃度雌激素替代治療組,但高劑量雌激素注射組骨密度低于正常劑量雌激素注射組。(3)雌激素替代治療后局部骨組織內(nèi)ERβ有所下降,VEGF上升,且與雌激素濃度相關。CD31免疫熒光及微血管硅膠灌注顯示,雌激素替代治療后局部微血管形成增加,且與雌激素濃度相關。結(jié)論卵巢去勢后大鼠骨質(zhì)疏松的雌激素替代治療可能與雌激素促進局部血管形成相關,該作用可能與ERβ介導的VEGF改變相關。與此同時,雌激素促進血管生成在骨骼中并不是完全有利的作用,當雌激素過量時,血管形成增加,骨密度反而低于正常劑量雌激素組,其中的具體機制還有待進一步的研究。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R580
【圖文】：

第二章 實驗材料和方法 不同濃度雌激素替代治療卵巢去勢大鼠骨質(zhì)疏松中血管形成的作用成一凹陷，從肉眼觀察下的脂肪凹陷處用無齒鑷輕提脂肪，就可發(fā)現(xiàn)呈粉紅色桑椹狀卵巢。1.1.5 切除： 用無齒鑷探入腹腔將卵巢及其周圍脂肪組織連帶輸卵管末端提出體外，注意動作輕柔，使用血管鉗在子宮末端與卵巢之間的最細處夾閉，0 號手術線結(jié)扎輸卵管與卵巢動脈，切除結(jié)扎遠端全部組織；松開止血鉗觀察是否是否仍有血液滲出，必要時再次結(jié)扎一道，將剩余還納入腹腔，過程中注意無菌操作，分別縫合肌肉層和皮膚，酒精棉球清理手術切口。1.1.6 術后復蘇：保持術后大鼠側(cè)臥位，防止舌后墜引發(fā)窒息，同時注意保暖。

9 2，A 將大鼠仰臥位固定于操作臺；B 分離皮下組織并游離腹主動脈；C 行置管；D 生理鹽水灌注；E 灌注 Microfil 溶液；F 足趾變黃表示灌注成功。骨組織冰凍切片1 取材：頸椎脫臼處死大鼠后立即取出股骨組織，盡快取材，防止組織發(fā)生2 速凍：將組織塊平放于特制小盒內(nèi)（直徑約 2cm），然后將特制小盒緩緩

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 陳瑛;藺莉;金華;;絕經(jīng)早期和絕經(jīng)晚期小鼠主動脈病理改變及雌激素受體表達的對比研究[J];中國全科醫(yī)學;2010年30期

2 劉曉東;鄧廉夫;王君;齊進;周琦;王晉申;魏立;朱雅萍;Clemens TL;;低氧誘導因子-1α在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松中調(diào)控作用的實驗研究[J];中華外科雜志;2007年18期

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本文編號：2731895