發(fā)布時(shí)間：2020-06-24 11:30

【摘要】：目的:我們的實(shí)驗(yàn)研究證明,芍藥苷(PF)在晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)損傷中有保護(hù)作用,并進(jìn)一步探討其潛在的作用機(jī)制。方法:1.以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)為研究對(duì)象,通過(guò)晚期糖基化終產(chǎn)物(AGE-BSA)作用建立細(xì)胞損傷模型。采用MTT法檢測(cè)晚期糖基化終產(chǎn)物作用6 h后細(xì)胞活力的改變,及用25μM芍藥苷預(yù)處理0.5 h后對(duì)細(xì)胞活力的影響;用蛋白印跡(Western blot)法測(cè)定LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白的表達(dá)水平的變化。2.利用si RNA進(jìn)行對(duì)Atg5基因及RAGE基因行基因沉默或基因敲減,觀察基因敲減后細(xì)胞活力及LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白表達(dá)水平的改變。結(jié)果:1.MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,AGE-BSA作用于HUVECs6h后細(xì)胞活力明顯下降(P0.001),芍藥苷預(yù)處理組細(xì)胞活力的改變與芍藥苷濃度呈劑量依賴關(guān)系。同樣,western blot結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,AGE-BSA組LC3-II及RAGE蛋白表達(dá)顯著增加;P62蛋白稍有表達(dá)增加,但無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與AGE-BSA組相比,25μM PF預(yù)處理組LC3-II、RAGE進(jìn)一步升高(P0.05),P62表達(dá)降低(P0.05)。2.利用si RNA對(duì)Atg5基因及RAGE基因進(jìn)行基因沉默或敲減后,結(jié)果顯示,與AGE-BSA和PF+AGE-BSA組相比,si RNA敲減后細(xì)胞活力明顯下降,LC3-II的表達(dá)較前明顯減少。結(jié)論:芍藥苷(PF)通過(guò)上調(diào)自噬作用,保護(hù)晚期糖基化終產(chǎn)物對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,并且其能夠促進(jìn)自噬流的完成。晚期糖基化終產(chǎn)物受體(RAGE)在這一自噬保護(hù)作用中發(fā)揮了重要作用。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R587.2
【圖文】：

藥苷對(duì)晚期糖基化終產(chǎn)物引起的內(nèi)皮細(xì)胞損傷有一定的保μM 及 100μM 預(yù)處理組細(xì)胞生存率無(wú)明顯差別，因此本實(shí)驗(yàn)選AGE-BSA 誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷起保護(hù)作用的濃度。（圖 1）

P62 蛋白明顯下降。從以上結(jié)果表明，100 μg/mL AGE-活，但自噬流沒(méi)有完成，25μM PF 預(yù)處理組進(jìn)一步上調(diào)，對(duì)細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。（圖 2）；

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 陳玉防;芍藥苷在晚期糖基化終產(chǎn)物誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷中的作用及其機(jī)制探討[D];蘇州大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2727809