【摘要】：目的:我們的實驗研究證明,芍藥苷(PF)在晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)誘導人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)損傷中有保護作用,并進一步探討其潛在的作用機制。方法:1.以人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)為研究對象,通過晚期糖基化終產(chǎn)物(AGE-BSA)作用建立細胞損傷模型。采用MTT法檢測晚期糖基化終產(chǎn)物作用6 h后細胞活力的改變,及用25μM芍藥苷預處理0.5 h后對細胞活力的影響;用蛋白印跡(Western blot)法測定LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白的表達水平的變化。2.利用si RNA進行對Atg5基因及RAGE基因行基因沉默或基因敲減,觀察基因敲減后細胞活力及LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白表達水平的改變。結(jié)果:1.MTT法檢測結(jié)果顯示,與對照組相比,AGE-BSA作用于HUVECs6h后細胞活力明顯下降(P0.001),芍藥苷預處理組細胞活力的改變與芍藥苷濃度呈劑量依賴關系。同樣,western blot結(jié)果顯示,與對照組相比,AGE-BSA組LC3-II及RAGE蛋白表達顯著增加;P62蛋白稍有表達增加,但無明顯統(tǒng)計學意義;與AGE-BSA組相比,25μM PF預處理組LC3-II、RAGE進一步升高(P0.05),P62表達降低(P0.05)。2.利用si RNA對Atg5基因及RAGE基因進行基因沉默或敲減后,結(jié)果顯示,與AGE-BSA和PF+AGE-BSA組相比,si RNA敲減后細胞活力明顯下降,LC3-II的表達較前明顯減少。結(jié)論:芍藥苷(PF)通過上調(diào)自噬作用,保護晚期糖基化終產(chǎn)物對臍靜脈內(nèi)皮細胞的損傷,并且其能夠促進自噬流的完成。晚期糖基化終產(chǎn)物受體(RAGE)在這一自噬保護作用中發(fā)揮了重要作用。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2
【圖文】：

藥苷對晚期糖基化終產(chǎn)物引起的內(nèi)皮細胞損傷有一定的保μM 及 100μM 預處理組細胞生存率無明顯差別，因此本實驗選AGE-BSA 誘導內(nèi)皮細胞損傷起保護作用的濃度。（圖 1）

P62 蛋白明顯下降。從以上結(jié)果表明，100 μg/mL AGE-活，但自噬流沒有完成，25μM PF 預處理組進一步上調(diào)，對細胞有一定的保護作用。（圖 2）；

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相關碩士學位論文 前1條

1 陳玉防;芍藥苷在晚期糖基化終產(chǎn)物誘導內(nèi)皮細胞損傷中的作用及其機制探討[D];蘇州大學;2015年

本文編號：2727809