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基于液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對苦蕎改善血脂代謝紊亂的代謝組學(xué)研究

發(fā)布時間:2020-06-06 06:53
【摘要】:隨著經(jīng)濟發(fā)展,我國居民膳食結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,膳食中的脂類攝入增多,成為影響健康增加患高脂血癥、心血管疾病風險的主要因素之一。苦蕎具有改善血脂紊亂的功效,其中的蛋白與淀粉是其主要功效組分,但對其機理卻不完全明確。本研究通過高脂膳食誘導(dǎo)方式建立代謝紊亂小鼠模型,研究苦蕎蛋白、苦蕎淀粉飲食干預(yù)對小鼠血脂代謝的影響,并利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)對血漿進行代謝組學(xué)分析,有助于進一步認識高脂飲食誘發(fā)的血脂代謝異常發(fā)生的機制,為尋找代謝紊亂發(fā)生的規(guī)律及有效防治措施提供理論依據(jù)。(1)選取4周齡雄性C57BL/6小鼠,隨機分為4組(n=9):對照組(LFD)、模型組(HF-CS)、苦蕎蛋白組(HF-BWP)、苦蕎淀粉組(HF-BWS)。實驗結(jié)果表明:模型組與對照組相比,TG、TC及LDL-C含量均顯著提高(P0.05)。苦蕎蛋白組較模型組TG、TC和LDL-C含量均顯著降低,分別為85.6%、37.3%及58.7%,而HDL-C含量顯著提高32.5%,苦蕎淀粉組較模型組TG、TC分別降低54.6%,16.7%,表明苦蕎蛋白與苦蕎淀粉均具有改善脂代謝紊亂的作用且苦蕎蛋白改善作用更加明顯。(2)利用LC-MS技術(shù)獲得對照組、模型組、苦蕎蛋白組小鼠血漿代謝輪廓,并由血漿代謝輪廓分析可知對照組、模型組及苦蕎蛋白組區(qū)分明顯。相比模型組,苦蕎蛋白組更接近對照組樣本點,表明苦蕎蛋白組小鼠代謝表型更加接近對照組小鼠代謝表型。多元統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)對照組與模型組間存在31個差異代謝物,相比對照組,模型組血漿樣品花生四烯酸、鵝去氧膽酸、8,11,14-二十碳三烯酸、二十二碳五烯酸、腎上腺素酸水平降低;LysoPC(14∶1(9Z))、LysoPC(14:0)、瓜氨酸、;悄懰帷⒀趸入赘孰乃缴。與模型組相比,苦蕎蛋白組血漿樣品中五種不飽和脂肪酸含量(8,11,14-碳三烯酸、二十二碳五烯酸、亞油酸、腎上腺素酸和硬脂酸)顯著上升,棕櫚酸、油酸、皮質(zhì)醇、鵝去氧膽酸、LysoPC(14∶1(9Z))、LysoPC(14:0)、LysoPC(15:0)、瓜氨酸、牛磺酸顯著降低。結(jié)合KEGG、MetPA數(shù)據(jù)庫輔助分析,發(fā)現(xiàn)苦蕎蛋白主要通過主要參與亞油酸代謝、酮體的合成與降解、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、;撬岷团;撬岽x、乙醛酸鹽代謝、花生四烯酸代謝、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸的生物合成、檸檬酸循環(huán)(TCA循環(huán))、不飽和脂肪酸的生物合成途徑等9條代謝路徑調(diào)節(jié)高脂膳食誘導(dǎo)的小鼠代謝紊亂。(3)由多元組分分析可知對照組、模型組及苦蕎淀粉組小鼠血漿代謝輪廓分離明顯,進一步發(fā)現(xiàn)苦蕎淀粉組與模型組間存在23種差異代謝物?嗍w淀粉組和模型組相比牛磺脫氧膽酸、馬尿酸、牛磺膽酸、L-乙;鈮A、胞苷等在血漿中下調(diào),花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十二碳五烯酸、酮亮氨酸、鵝去氧膽酸等則發(fā)生上調(diào)。數(shù)據(jù)分析顯示,對苦蕎淀粉調(diào)節(jié)血脂紊亂作用有重要貢獻的潛在的生物標志物主要參與亞油酸代謝、酮體的合成與降解、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、乙醛酸鹽代謝、花生四烯酸代謝、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸的生物合成、嘌呤代謝、檸檬酸循環(huán)(TCA循環(huán))、不飽和脂肪酸的生物合成途徑等9條代謝路徑。(4)綜合各組血漿代謝代謝組學(xué)分析可知:相比模型組,苦蕎蛋白組、苦蕎淀粉組小鼠代謝表型與對照組更加接近,且苦蕎蛋白組作用效果更明顯。苦蕎蛋白及苦蕎淀粉組間分析并篩選出41種差異代謝物。與苦蕎淀粉組相比,苦蕎蛋白組血漿中鵝去氧膽酸、LysoPE(0:0/16:0)、苯基乳酸、L-乙;鈮A、硬脂酸、8,11,14-二十碳三烯酸、皮質(zhì)醇、LysoPE(16:1(9z)/0:0)、LysoPC(14∶1(9Z))、L-色氨酸等下調(diào),創(chuàng)傷酸、膽酸、;悄懰帷㈢晁、胞苷等則發(fā)生上調(diào)。數(shù)據(jù)分析顯示,苦蕎蛋白組及苦蕎淀粉組間潛在的生物標志物主要參與亞油酸代謝、酮體的合成與降解、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、乙醛酸鹽代謝、花生四烯酸代謝、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸的生物合成、檸檬酸循環(huán)(TCA循環(huán))、不飽和脂肪酸的生物合成途徑等8條代謝路徑。本課題通過對高脂飼料、苦蕎蛋白及苦蕎淀粉喂養(yǎng)小鼠血漿的代謝物分析,發(fā)現(xiàn)不同組別小鼠血漿代謝譜存在差異,而這些差異與動物干預(yù)后血脂指標出現(xiàn)不同反應(yīng)密切相關(guān)。各組間差異物質(zhì)種類主要包括氨基酸類、脂肪酸類、嘌呤類、有機酸類等。
【圖文】:

基于液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對苦蕎改善血脂代謝紊亂的代謝組學(xué)研究


苦蕎干預(yù)對血漿總甘油三酯(TG)影響

基于液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對苦蕎改善血脂代謝紊亂的代謝組學(xué)研究


苦蕎干預(yù)對血漿總膽固醇(TC)影響
【學(xué)位授予單位】:上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R589;TS231

【參考文獻】

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本文編號:2699321

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