【摘要】：目的:初步探討腺病毒36型(adenovirus type 36,Ad36)在誘導(dǎo)人脂肪源性干細(xì)胞分化為棕色脂肪細(xì)胞中的作用。方法:(1)分別用雞尾酒法和Ad36誘導(dǎo)hADSC分化為脂肪細(xì)胞,于誘導(dǎo)第2、4、6、8天油紅O染色觀察細(xì)胞成脂情況。(2)分別收取雞尾酒法誘導(dǎo)組和Ad36誘導(dǎo)組第0、2、4、6、8天的細(xì)胞,RT-qPCR方法檢測(cè)兩組中的LncRNA ROR,棕色脂肪細(xì)胞分化標(biāo)記基因Cidea、Dio2、Fgf21、Ucp1、Prdm16,線粒體呼吸鏈和氧化磷酸化相關(guān)酶基因Cox5b、Atp5o、Atp6、Nd2以及Leptin mRNA表達(dá)水平;Western-blotting檢測(cè)兩組中上述基因蛋白質(zhì)表達(dá)水平。(3)siRNA敲低LncRNA ROR后,Ad36誘導(dǎo)hADSC分化為脂肪細(xì)胞過程中,分別收取敲低組和對(duì)照組第0、1、2、3、4天的細(xì)胞,RT-qPCR和Western-blotting方法分別檢測(cè)上述基因的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平。(4)利用透射電鏡的方法觀察并計(jì)算在誘導(dǎo)分化過程中雞尾酒法誘導(dǎo)組和Ad36誘導(dǎo)組線粒體數(shù)量的變化和差異。結(jié)果:(1)油紅O染色結(jié)果顯示:hADSC分化為脂肪細(xì)胞過程中,雞尾酒誘導(dǎo)組的脂肪細(xì)胞中脂滴較大,而Ad36誘導(dǎo)組則是顆粒狀較小脂滴。(2)RT-qPCR和Western-blotting結(jié)果顯示,hADSC分化為脂肪細(xì)胞過程中,與雞尾酒法誘導(dǎo)組相比,Ad36誘導(dǎo)組中LncRNA ROR、Cidea、Dio2、Fgf21、Ucp1、Prdm16、Cox5b、Atp5o、Atp6、Nd2mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平較雞尾酒法誘導(dǎo)組顯著升高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01或P0.05);Leptin mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平較雞尾酒法誘導(dǎo)組顯著降低,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(3)siRNA敲低LncRNA ROR后,Ad36誘導(dǎo)hADSC分化為脂肪細(xì)胞過程中,與對(duì)照組相比,Cidea、Dio2、Fgf21、Ucp1、Prdm16、Cox5b、Atp5o、Atp6、Nd2 mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平較對(duì)照組顯著降低,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01或P0.05)。(4)透射電鏡觀察到,在脂肪細(xì)胞分化過程中,與雞尾酒法誘導(dǎo)組相比,Ad36誘導(dǎo)組細(xì)胞內(nèi)的線粒體數(shù)量顯著升高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01或P0.05)。結(jié)論:Ad36可能通過上調(diào)LncRNA ROR加快了線粒體氧化磷酸化和能量消耗,進(jìn)而促進(jìn)了hADSC向棕色脂肪細(xì)胞分化。
【圖文】：

2336 和雞尾酒誘導(dǎo) hADSC 細(xì)胞成脂比較(油紅 O 染色）(放大倍數(shù)：400×，，比例尺 Oil red O staining hADSC cells after induced by adinovirus 36 or cocktail meth(magnification: 400 x, scale: 50 microns)A、B、C、D 分別為 Ad36 誘導(dǎo)第 2、4、6、8 天的細(xì)胞 C and D,respectively, induce the cells of the 2nd, 4th, 6th and 8th days of Ad36 mE、F、G、H 分別為雞尾酒法誘導(dǎo)第 2、4、6、8 天的細(xì)胞 G, and H, respectively, induce the cells of the 2nd, 4th, 6th and 8th days of the c

脂肪細(xì)胞過程中，Ad36 誘導(dǎo)組和雞尾酒法胞分化標(biāo)記基因、線粒體呼吸鏈和氧化磷酸化檢測(cè)脂肪細(xì)胞過程中，Ad36 誘導(dǎo)組和雞尾酒法誘測(cè)雞尾酒法誘導(dǎo) hADSC 分化過程中，LncRNA ROADSC differentiation ,Ad36 induction and cocktail merences in the levels of mRNA expression of LncRNA均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差第 0 天 第 2 天 第 4 天 第1.14±0.163.26±0.45 10.6±0.66 19.0 1.87±2.19 4.03±0.56 6.6P=0.008 P=0.006 P=
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R589.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 HAN Guo Xin;XIA Lei;LI Shuo Shuo;JIN Qin Hua;SONG Yang;SHEN Hong;WANG Li Li;KONG Ling Jie;LI Tan Shi;ZHU Hai Yan;;The Association between the C5263T Mutation in the Mitochondrial ND2 Gene and Coronary Heart Disease among Young Chinese Han People[J];Biomedical and Environmental Sciences;2017年04期

2 Anna Park;Won Kon Kim;Kwang-Hee Bae;;Distinction of white,beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells[J];World Journal of Stem Cells;2014年01期

本文編號(hào)：2694539