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糖尿病牙周炎患者牙齦卟啉單胞菌rag基因型檢測及其發(fā)病機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-01 14:03
【摘要】:研究背景:慢性牙周炎(Chronic Periodontitis,CP)是一種慢性炎癥性疾病,由牙菌斑引起,從而導(dǎo)致結(jié)締組織附著喪失、牙槽骨支持喪失和牙周袋形成。糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一種慢性終身性疾病,是世界上最為嚴(yán)重的慢性健康問題之一。大量流行病學(xué)及臨床資料顯示,糖尿病與牙周炎相互影響,牙周炎可以誘發(fā)糖尿病,糖尿病可以增加牙周炎的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)及嚴(yán)重程度。牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)是引起牙周炎的主要病原菌,rag位點(diǎn)是牙齦卟啉單胞的致病島基因之一,有研究表明rag基因與P.gingivalis致病性呈正相關(guān),其毒性會(huì)影響牙周組織的損傷程度。rag-1、rag-2、rag-3和rag-4,是該位點(diǎn)在臨床菌株中的四種不同基因分型,不同的基因分型其致病的能力也有所不同。研究表明將伴糖尿病的牙周炎患者同慢性牙周炎患者進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)前者牙周組織的損傷和炎癥程度都高于后者。可能是因?yàn)槌掷m(xù)高水平的血糖狀態(tài),引起的機(jī)體的氧化應(yīng)激反應(yīng)加重了牙周組織的損傷,另外還有可能和口腔微生態(tài)平衡的失調(diào)有關(guān)。不同分型rag基因在伴糖尿病牙周炎患者及慢性牙周炎患者之間的是否存在差異,從而導(dǎo)致前者牙周炎的炎癥和破壞程度是否更為嚴(yán)重,目前尚無確切的研究報(bào)道,本文探討了相關(guān)機(jī)制的研究。研究目的:通過分析P.gingivalis的陽性率和其rag基因型在正常人組、伴糖尿病牙周炎組及牙周炎組的分布情況,探討糖尿病參與牙周炎發(fā)病的機(jī)制。研究方法:本試驗(yàn)共分為3組,每組選取20名受試者,分別為伴糖尿病牙周炎組,慢性牙周炎組,正常人組,其中伴糖尿病牙周炎患者及慢性牙周炎患者均選取重度牙周炎患者,分別采取唾液樣本。通過PCR定性方法檢測唾液中P.gingivalis及rag基因分型,然后采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析P.gingivalis的檢出率以及rag基因分型在這三組的差異。研究結(jié)果:測試結(jié)果經(jīng)16 S rDNA PCR法檢測,結(jié)果顯示唾液樣本中P.gingivalis陽性檢出率在伴糖尿病牙周炎患者中為[65%(13/20)],慢性牙周炎組為[70%(14/20)],正常人組為[40%(8/20)],三組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);rag-1基因在慢性牙周炎組的檢出率為[45%(9/20)]明顯高于伴糖尿病牙周炎組[5%(1/20)];有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);rag-2基因在正常人組的檢出率為[62.5%(5/8)]明顯高于其他兩組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);rag-4基因在三組中的檢出率無差異(P0.05),rag-3基因在三組中均未檢測到。研究結(jié)論:1.伴糖尿病牙周炎患者唾液中rag-1型的牙齦卟啉單胞菌的檢出率明顯低于慢性牙周炎組,可能與伴糖尿病牙周炎患者的口腔微環(huán)境發(fā)生改變從而使rag-1表達(dá)降低有關(guān);另外伴糖尿病牙周炎患者的牙周炎癥狀態(tài)也可能啟動(dòng)了牙齦卟啉單胞菌逃避宿主的免疫應(yīng)答,使rag-1表達(dá)降低。2.正常人組中rag-2的檢出率顯著高于其他兩組,表明存在于正常人口腔中的牙齦卟啉單胞菌主要以毒低的rag-2型為主,這也可能是正常人不發(fā)生牙周炎的原因之一。
【圖文】:

電泳圖,電泳圖,產(chǎn)物,慢性牙周炎


結(jié)果結(jié) 果1P.gingivalis的PCR檢測結(jié)果在本次實(shí)驗(yàn)的 60 個(gè)唾液標(biāo)本中,總共檢測出 P.gingivalis35 例,陽性率為 58.3%,其中伴糖尿病牙周炎組 13 例,慢性牙周炎組 14 例,正常人組 8 例,陽性檢出率分別為 65%、70%、40%,P.gingivalis 在三組中的陽性檢出率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異( P>0.05)。P.gingivalis16S rDNA PCR 產(chǎn)物電泳結(jié)果見圖 1,P.gingivalis 在三組中的分布見圖 2,,P.gingivalis 在三組中的檢出情況見表 4。

電泳圖,慢性牙周炎,牙周炎,基因型


圖2 P.gingivalis在三組中的分布Figure 2 Distribution of P. gingivalis in three groupsg-1基因型在各組間的檢測結(jié)果將三組中35個(gè)P.gingivalis陽性的標(biāo)本進(jìn)行rag-1基因型特異性引物檢測,共檢1型12例,其中伴糖尿病的牙周炎組1例,慢性牙周炎組9例,正常人組2例,結(jié)性牙周炎組與伴糖尿病慢性牙周炎組存在顯著差異,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。型特異性引物檢測電泳圖見圖3,rag-1基因型在三組中的分布見圖4,rag-1基組間的陽性檢出例數(shù)及檢出率見表5。
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R781.42;R587.1

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本文編號(hào):2691592

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