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內(nèi)蒙古地區(qū)2型糖尿病患者脂聯(lián)素基因多態(tài)性與環(huán)境危險(xiǎn)因素交互作用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-25 02:01
【摘要】:目的:探討內(nèi)蒙古地區(qū)2型糖尿病患者環(huán)境及生活方式危險(xiǎn)因素與脂聯(lián)素基因rs10937273、rs1501299、rs182052、rs2241767、rs266729多態(tài)性交互作用。方法:病例組來(lái)源于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附院、內(nèi)蒙古自治區(qū)中蒙醫(yī)院以及內(nèi)蒙古國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院糖尿病患者共203例,對(duì)照組來(lái)源于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院體檢中心共203例。運(yùn)用imLDR技術(shù)檢測(cè)脂聯(lián)素(ADIPOQ)基因rs10937273、rs1501299、rs182052、rs2241767、rs266729位點(diǎn)多態(tài)性。采用廣義多因子降維法(GMDR)分析脂聯(lián)素基因多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性,并且進(jìn)行基因與基因、基因與環(huán)境交互作用分析。結(jié)果:ADIPOQ基因rs10937273、rs1501299、rs182052、rs2241767、rs266729多態(tài)性等位基因頻率分布符合Hardy-Weinberg定律HWE-P值分別為0.73、0,6、0.94、0.59、0.47;基因多態(tài)性位點(diǎn)與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)得出rs1501299,TT vs.GG(χ~2=5.238,P=0.022)與TT vs.TG+GG(χ~2=6.377,P=0.012)。由脂聯(lián)素基因5個(gè)SNP位點(diǎn)連鎖不平衡和及單體型分析得到:G G A A C為T(mén)2DM易感單體型(χ~2=14.529,P0.001);交互作用分析結(jié)果表明:rs10937273、rs1501299、rs182052、rs2241767、rs266729位點(diǎn)間不存在交互作用;rs1501299與高血壓史、高脂飲食存在交互作用(χ~2=14.529,P0.001,OR=6.723)。結(jié)論:rs1501299與2型糖尿病發(fā)病相關(guān);G G A A C為T(mén)2DM易感單體型;rs1501299基因多態(tài)性與高血壓史、高脂飲食存在交互作用。
【圖文】:

DNA瓊脂糖凝膠電泳


圖 1. 部分 DNA 瓊脂糖凝膠電泳圖3)DNA 濃度測(cè)定以超純水作為陰性對(duì)照,應(yīng)用紫外分光儀檢測(cè) OD260/ OD280 的比值在1.8 左右,,提示 DNA 純度合格。核酸定量?jī)x器檢測(cè) DNA 的濃度范圍為 18-90ng/L。4) ELISA 檢測(cè)脂聯(lián)素血清水平①?gòu)氖覝仄胶?20min 后的鋁箔袋中取出所需板條。②標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μl;③樣本孔先加待測(cè)樣本 10μl,再加樣本稀釋液 40μl;空白孔不加。④除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)

技術(shù)原理


①實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及操作說(shuō)明使用由天昊生物(中國(guó)上海)開(kāi)發(fā)改進(jìn)的多重連接反應(yīng)(IMLDR)技術(shù)進(jìn)行 SNP 基因分型工作。目標(biāo) SNP 位點(diǎn)所在區(qū)段先采重 PCR 反應(yīng)在一個(gè)體系中獲得擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)外切核酸酶及蝦堿酶oI/SAP)純化后用于后續(xù)連 接酶反應(yīng)的模板。通過(guò)不同熒光標(biāo)記的特異性核探針對(duì)等位基因區(qū)分。不同的 SNP 通過(guò) 3'端的不同延伸長(zhǎng)度進(jìn)一步區(qū)分。產(chǎn)物通過(guò) ABI3730XL 的毛細(xì)管電泳來(lái)區(qū)分。原始數(shù)據(jù)文件用 GeneMapper4.1 軟件(Appliedbio systems)來(lái)分析。設(shè)置個(gè)陰性對(duì)照:一個(gè)用雙蒸水作為模板,另一個(gè)用 DNA 模板但沒(méi)有引 物,而有其他條件在一個(gè)平板中保持相同。隨機(jī)選擇的一組 45(5%)樣品由 不同人一式兩份進(jìn)行測(cè)試,結(jié)果 100%一致。
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R587.1

【相似文獻(xiàn)】

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6 王金花;黃秀峰;周慶輝;林朝文;楊園園;;脂聯(lián)素基因單核苷酸多態(tài)性與壯族男性超重的相關(guān)性研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2013年年會(huì)論文文摘匯編[C];2013年

7 龍勤強(qiáng);雷霆;朱小s

本文編號(hào):2679370


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