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內(nèi)蒙古地區(qū)2型糖尿病患者脂聯(lián)素基因多態(tài)性與環(huán)境危險因素交互作用研究

發(fā)布時間:2020-05-25 02:01
【摘要】:目的:探討內(nèi)蒙古地區(qū)2型糖尿病患者環(huán)境及生活方式危險因素與脂聯(lián)素基因rs10937273、rs1501299、rs182052、rs2241767、rs266729多態(tài)性交互作用。方法:病例組來源于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附院、內(nèi)蒙古自治區(qū)中蒙醫(yī)院以及內(nèi)蒙古國際蒙醫(yī)醫(yī)院糖尿病患者共203例,對照組來源于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院體檢中心共203例。運用imLDR技術(shù)檢測脂聯(lián)素(ADIPOQ)基因rs10937273、rs1501299、rs182052、rs2241767、rs266729位點多態(tài)性。采用廣義多因子降維法(GMDR)分析脂聯(lián)素基因多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性,并且進(jìn)行基因與基因、基因與環(huán)境交互作用分析。結(jié)果:ADIPOQ基因rs10937273、rs1501299、rs182052、rs2241767、rs266729多態(tài)性等位基因頻率分布符合Hardy-Weinberg定律HWE-P值分別為0.73、0,6、0.94、0.59、0.47;基因多態(tài)性位點與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)得出rs1501299,TT vs.GG(χ~2=5.238,P=0.022)與TT vs.TG+GG(χ~2=6.377,P=0.012)。由脂聯(lián)素基因5個SNP位點連鎖不平衡和及單體型分析得到:G G A A C為T2DM易感單體型(χ~2=14.529,P0.001);交互作用分析結(jié)果表明:rs10937273、rs1501299、rs182052、rs2241767、rs266729位點間不存在交互作用;rs1501299與高血壓史、高脂飲食存在交互作用(χ~2=14.529,P0.001,OR=6.723)。結(jié)論:rs1501299與2型糖尿病發(fā)病相關(guān);G G A A C為T2DM易感單體型;rs1501299基因多態(tài)性與高血壓史、高脂飲食存在交互作用。
【圖文】:

DNA瓊脂糖凝膠電泳


圖 1. 部分 DNA 瓊脂糖凝膠電泳圖3)DNA 濃度測定以超純水作為陰性對照,應(yīng)用紫外分光儀檢測 OD260/ OD280 的比值在1.8 左右,,提示 DNA 純度合格。核酸定量儀器檢測 DNA 的濃度范圍為 18-90ng/L。4) ELISA 檢測脂聯(lián)素血清水平①從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條。②標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μl;③樣本孔先加待測樣本 10μl,再加樣本稀釋液 40μl;空白孔不加。④除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)

技術(shù)原理


①實驗設(shè)計及操作說明使用由天昊生物(中國上海)開發(fā)改進(jìn)的多重連接反應(yīng)(IMLDR)技術(shù)進(jìn)行 SNP 基因分型工作。目標(biāo) SNP 位點所在區(qū)段先采重 PCR 反應(yīng)在一個體系中獲得擴增。擴增產(chǎn)物經(jīng)外切核酸酶及蝦堿酶oI/SAP)純化后用于后續(xù)連 接酶反應(yīng)的模板。通過不同熒光標(biāo)記的特異性核探針對等位基因區(qū)分。不同的 SNP 通過 3'端的不同延伸長度進(jìn)一步區(qū)分。產(chǎn)物通過 ABI3730XL 的毛細(xì)管電泳來區(qū)分。原始數(shù)據(jù)文件用 GeneMapper4.1 軟件(Appliedbio systems)來分析。設(shè)置個陰性對照:一個用雙蒸水作為模板,另一個用 DNA 模板但沒有引 物,而有其他條件在一個平板中保持相同。隨機選擇的一組 45(5%)樣品由 不同人一式兩份進(jìn)行測試,結(jié)果 100%一致。
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R587.1

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