【摘要】：目的:血中孕激素和雌激素水平與2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)胰島素抵抗的發(fā)生密切相關(guān),但目前孕激素和雌激素聯(lián)用在2型糖尿病胰島素抵抗發(fā)生發(fā)展中的相互作用和機(jī)制仍不明確。本文通過(guò)高脂飲食聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)建立T2DM小鼠胰島素抵抗模型,探討黃體酮和雌二醇聯(lián)用在T2DM胰島素抵抗發(fā)生發(fā)展中的相互作用和關(guān)系,為T(mén)2DM胰島素抵抗的診斷和治療提供理論依據(jù)。方法:通過(guò)高脂飲食喂養(yǎng)去勢(shì)小鼠4周,腹腔注射不同劑量STZ構(gòu)建T2DM小鼠胰島素抵抗模型,測(cè)定小鼠空腹血糖,STZ處理后4周,進(jìn)行糖耐量(Glucose Tolerance,GTT)和胰島素抵抗實(shí)驗(yàn)(Insulin Tolerance Tests,ITT),同時(shí)采用灌流實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同組小鼠離體組織的耗糖量,以確定T2DM胰島素抵抗小鼠模型構(gòu)建成功的最佳方案。模型構(gòu)建方案確定后,另購(gòu)置小鼠,去勢(shì)并高脂飲食喂養(yǎng)4周,隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組和給藥組。給藥組腹腔注射STZ的同時(shí)皮下注射黃體酮或17β-雌二醇。每周測(cè)量小鼠空腹血糖,性激素處理四周后進(jìn)行GTT、ITT和離體心肌、腓腸肌和肝臟灌流實(shí)驗(yàn)。采用ELISA分析血胰島素、C肽、血肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(Hepatocyte Growth Factor,HGF)水平。取部分組織分別固定和冰凍,采用HE染色檢測(cè)胰島形態(tài)和胰島細(xì)胞數(shù)量,利用qPCR和免疫熒光技術(shù)檢測(cè)小鼠肝臟和骨骼肌中胰島素受體、胰島素受體底物-1(Insulin receptor Substrate-1,IRS-1)和胰島素受體底物-2(Insulin receptor Substrate-2,IRS-2)的表達(dá)。結(jié)果:高脂飲食聯(lián)合不同劑量STZ構(gòu)建T2DM胰島素抵抗小鼠模型的最佳造模方法為高脂飲食喂養(yǎng)4周后,腹腔注射STZ 30 mg/kg體重,連續(xù)3天,第四天腹腔注射STZ 80 mg/kg體重。T2DM胰島素抵抗小鼠飲水量和進(jìn)食量明顯增加,尿糖呈現(xiàn)陽(yáng)性,體重降低,血糖明顯升高;糖耐量受損,胰島素分泌量和胰島素抵抗指數(shù)顯著增加,外周組織對(duì)胰島素敏感性明顯下降,HGF水平顯著升高,模型小鼠出現(xiàn)了明顯的胰島素抵抗;胰島β細(xì)胞受到損傷,功能明顯下降,胰島形態(tài)發(fā)生改變,胰島細(xì)胞數(shù)量顯著增加,出現(xiàn)了增生現(xiàn)象;無(wú)論在生理糖水平或高糖水平下進(jìn)行灌流,離體心肌、腓腸肌和肝臟的基礎(chǔ)耗糖量和在外源性胰島素作用下的耗糖量均顯著降低;小鼠肝臟胰島素受體、IRS-1和IRS-2表達(dá)明顯下調(diào),骨骼肌胰島素受體和IRS-1表達(dá)也下調(diào)。黃體酮8 mg/kg體重可以降低模型小鼠血糖,增加外周組織對(duì)胰島素的敏感性,改善糖耐量,緩解胰島素抵抗,延緩小鼠T2DM的發(fā)生,還可使小鼠肝臟IRS-2和骨骼肌IRS-1的表達(dá)顯著上調(diào);但三種劑量的黃體酮(0.1、2或8 mg/kg體重)使胰島明顯萎縮、胰島細(xì)胞的功能明顯受損;黃體酮0.1 mg/kg體重下調(diào)了肝臟IRS-1的表達(dá),上調(diào)了肝臟IRS-2的表達(dá),對(duì)肝臟中胰島素受體表達(dá)無(wú)明顯影響。17β-雌二醇0.1 mg/kg體重可以降低模型小鼠血糖和胰島素抵抗指數(shù),增強(qiáng)外周組織對(duì)胰島素敏感性,改善糖耐量和胰島素抵抗,減弱模型小鼠胰島的增生,對(duì)胰島細(xì)胞有保護(hù)作用;還可上調(diào)小鼠肝臟胰島素受體IRS-1和IRS-2的表達(dá),明顯延緩高脂飼料聯(lián)合STZ誘發(fā)的T2DM小鼠胰島素抵抗的發(fā)生。皮下注射黃體酮8 mg/kg體重,可通過(guò)降低血糖、改善糖耐量和延緩胰島素抵抗及上調(diào)肝臟胰島素受體蛋白的表達(dá),協(xié)同17β-雌二醇的抗糖尿病作用;相反,0.1 mg/kg體重黃體酮?jiǎng)t通過(guò)下調(diào)肝臟和骨骼肌胰島素受體、IRS-2的表達(dá)拮抗17β-雌二醇延緩T2DM的發(fā)生作用,加重了糖耐量損傷和胰島素抵抗。結(jié)論:1.高脂飲食聯(lián)合STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病小鼠出現(xiàn)了嚴(yán)重的胰島素抵抗。2.黃體酮對(duì)糖尿病的發(fā)生表現(xiàn)出雙重作用:一方面通過(guò)萎縮胰島,減少胰島細(xì)胞數(shù)量,促進(jìn)糖尿病的發(fā)生;另一方面通過(guò)增加外周組織對(duì)胰島素的敏感性,改善糖耐量,緩解胰島素抵抗,延緩T2DM胰島素抵抗的發(fā)生。3.17β-雌二醇可通過(guò)保護(hù)胰島細(xì)胞、上調(diào)肝臟胰島素受體、IRS-1和IRS-2的表達(dá)改善胰島素抵抗,延緩T2DM的發(fā)生。4.黃體酮8 mg/kg體重具有協(xié)同17β-雌二醇延緩T2DM胰島素抵抗發(fā)生的作用,而黃體酮0.1 mg/kg體重與17β-雌二醇聯(lián)用表現(xiàn)出一定的拮抗效應(yīng)。
【圖文】：

Fig. 2 The contracting activity of isolated myocardium in mice圖 2 小鼠離體心肌的收縮活動(dòng)(A): The Rhythm contraction of isolated mice myocardium. (B): The contraction of imice myocardium after stimulation.2.2.4.2 離體腓腸肌灌流實(shí)驗(yàn)處死小鼠，取小鼠左腿置于供有混合氣體并含有 K-H 溶液的培養(yǎng)皿中斷結(jié)締組織與神經(jīng)分支，分離出腓腸肌用鋅銅弓檢查腓腸肌的興奮性，一線結(jié)扎與雙極電極連接，另一端縛線結(jié)扎肌腱并連接至張力傳感器，以 11 ms 和閾值（15 ± 5V）的電刺激刺激腓腸肌，溫育 20 min，，采用 BL-420S信號(hào)采集系統(tǒng)記錄腓腸肌收縮活動(dòng)，同時(shí)在換液和加入胰島素前后 0 mimin，60min，90 min 測(cè)肌槽中糖濃度，記錄不同處理組小鼠離體腓腸肌在糖水平和高糖水平時(shí)胰島素處理前后的耗糖量。

Fig. 2 The contracting activity of isolated myocardium in mice圖 2 小鼠離體心肌的收縮活動(dòng)(A): The Rhythm contraction of isolated mice myocardium. (B): The contraction of isolatedmice myocardium after stimulation.2.2.4.2 離體腓腸肌灌流實(shí)驗(yàn)處死小鼠，取小鼠左腿置于供有混合氣體并含有 K-H 溶液的培養(yǎng)皿中，剪斷結(jié)締組織與神經(jīng)分支，分離出腓腸肌用鋅銅弓檢查腓腸肌的興奮性，一端縛線結(jié)扎與雙極電極連接，另一端縛線結(jié)扎肌腱并連接至張力傳感器，以 1 Hz、1 ms 和閾值（15 ± 5V）的電刺激刺激腓腸肌，溫育 20 min，采用 BL-420S 生物信號(hào)采集系統(tǒng)記錄腓腸肌收縮活動(dòng)，同時(shí)在換液和加入胰島素前后 0 min，30min，60min，90 min 測(cè)肌槽中糖濃度，記錄不同處理組小鼠離體腓腸肌在生理糖水平和高糖水平時(shí)胰島素處理前后的耗糖量。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R587.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 崔艷華;嚴(yán)繼萍;趙文莉;張小紅;崔遠(yuǎn)平;;超聲評(píng)價(jià)青年人群胰島素抵抗對(duì)頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度的影響[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)影像雜志;2019年03期

2 陳芳建;胡朝暉;胡雅國(guó);陳秀花;祝素文;萬(wàn)金星;;2型糖尿病患者脂聯(lián)素、瘦素及其比值與血脂、胰島素抵抗的相關(guān)性[J];浙江檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2008年04期

3 張涵濤;王f ;付紅萍;;羅格列酮聯(lián)合胰島素短期強(qiáng)化治療的療效觀察[J];中國(guó)水電醫(yī)學(xué);2007年03期

4 王偉;郭素麗;屈愛(ài)靜;;胰島素及胰島素抵抗研究進(jìn)展[J];山西體育科技;2011年03期

5 張軼偉;郝春艷;李思敏;;老年人甲狀腺激素與胰島素抵抗和脂聯(lián)素的相關(guān)性分析[J];中國(guó)藥物與臨床;2019年01期

6 ;蜂膠在改善胰島素抵抗方面研究取得新進(jìn)展[J];食品安全導(dǎo)刊;2018年33期

7 欒金紅;趙龍剛;;淺談2型糖尿病胰島素抵抗的中醫(yī)策略[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2019年18期

8 杜洪艷;;首診2型糖尿病短期胰島素強(qiáng)化治療對(duì)患者胰島素抵抗和病情的影響[J];臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志;2017年64期

9 楊偉;華琦;;衰老相關(guān)的慢性炎癥與胰島素抵抗的研究進(jìn)展[J];中華老年多器官疾病雜志;2017年01期

10 劉峰;;2型糖尿病胰島素抵抗及其機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國(guó)處方藥;2018年08期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陳艷秋;宗敏;華莉;李臻;肖菲;孫建琴;;2型糖尿病患者肝臟脂肪與胰島素抵抗的關(guān)系[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)老年?duì)I養(yǎng)分會(huì)第七次全國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)交流會(huì)“營(yíng)養(yǎng)與成功老齡化”暨國(guó)家級(jí)繼續(xù)教育項(xiàng)目“神經(jīng)系統(tǒng)疾病醫(yī)學(xué)營(yíng)養(yǎng)治療”資料匯編[C];2010年

2 陳艷秋;陳敏;宗敏;華莉;李臻;張?chǎng)我?孫建琴;;2型糖尿病患者肝臟脂肪分布與胰島素抵抗[A];老年?duì)I養(yǎng)研究進(jìn)展與老年?duì)I養(yǎng)供餐規(guī)范研討會(huì)暨糖尿病腎病醫(yī)學(xué)營(yíng)養(yǎng)治療進(jìn)展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2011年

3 王天歌;畢宇芳;徐敏;黃韻;徐瑜;李小英;王衛(wèi)慶;寧光;;環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A與肥胖及胰島素抵抗的相關(guān)性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

4 陳海冰;;骨骼肌胰島素抵抗[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)第十六次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

5 楊國(guó)慶;杜錦;巴建明;呂朝暉;竇京濤;母義明;陸菊明;;嚴(yán)重胰島素抵抗臨床線索和診斷策略[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)第十六次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

6 雷萬(wàn)生;;胰島素抵抗與多器官功能不全綜合征[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2010年

7 崔濤;任艷;;α-糖苷酶抑制劑在臨床應(yīng)用中對(duì)體重和胰島素抵抗的影響的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

8 曹文洪;;胰島素在將過(guò)剩的能量轉(zhuǎn)變成胰島素抵抗和T2DM中起一個(gè)關(guān)鍵作用[A];營(yíng)養(yǎng)與糖尿病并發(fā)癥——達(dá)能營(yíng)養(yǎng)中心第十六屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

9 王香;邵萍;徐克煒;;OSAS與胰島素抵抗關(guān)系的探討[A];西部大開(kāi)發(fā) 科教先行與可持續(xù)發(fā)展——中國(guó)科協(xié)2000年學(xué)術(shù)年會(huì)文集[C];2000年

10 宋曉敏;耿秀琴;郭長(zhǎng)磊;;胰島素抵抗幾個(gè)相關(guān)因素在公安人群中的狀態(tài)與分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 唐鳳;香港大學(xué) 發(fā)現(xiàn)肥胖引起胰島素抵抗新機(jī)制[N];中國(guó)科學(xué)報(bào);2019年

2 廣西鐘山縣中醫(yī)院主治醫(yī)師 甘雨;胰島素和中藥合用更利于降血糖[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2016年

3 記者 陶婷婷;治療胰島素抵抗智能傳感器研究獲得重要成果[N];上�？萍紙�(bào);2017年

4 首席記者 譚嘉;糖尿病患者腫瘤患病率明顯增高[N];健康報(bào);2017年

5 北京朝陽(yáng)醫(yī)院內(nèi)分泌科副教授 范慧;胖糖友用藥 需兼顧減重[N];健康報(bào);2017年

6 黃艾嬌 記者 王春;“以糖治糖”：這思路治糖尿病是不是“腦洞”夠大[N];科技日?qǐng)?bào);2017年

7 記者 衣曉峰;胰島素抵抗或是流產(chǎn)重要“推手”[N];健康報(bào);2017年

8 記者 張夢(mèng)然;胰島素竟可改變大腦反應(yīng)[N];科技日?qǐng)?bào);2017年

9 上海市東方醫(yī)院婦產(chǎn)科副主任醫(yī)師 楊曉菊;“糖媽媽” 5招擁有健康寶寶[N];健康報(bào);2017年

10 石柏;游離糖雖好，但也會(huì)引發(fā)多種疾病[N];21世紀(jì)藥店;2017年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 韓新軍;基礎(chǔ)軍訓(xùn)對(duì)健康青年男性的胰島素敏感度，血脂及脂聯(lián)素的影響的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2019年

2 薛帥;設(shè)計(jì)、構(gòu)建精準(zhǔn)可控定制細(xì)胞用于糖尿病治療的研究[D];華東師范大學(xué);2019年

3 孫世碩;脂肪酸感知與修飾的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)功能[D];蘇州大學(xué);2018年

4 卓梅琴;黃顙魚(yú)PI3Ks功能解析及其通路在胰島素調(diào)控脂類(lèi)代謝中的作用機(jī)制[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

5 陳廣道;胰島素在膿毒癥誘導(dǎo)急性腎損傷中改善線粒體功能障礙機(jī)制的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

6 阮玉婷;LncRNA-p3134在調(diào)控胰島β細(xì)胞功能和胰島素信號(hào)通路中的作用機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

7 張紫微;MiR-99a抑制胰島素促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖、遷移、去分化及雷帕霉素抵抗的作用及機(jī)制[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2017年

8 念馨;內(nèi)臟脂肪FOXC2表達(dá)調(diào)控與脂肪細(xì)胞分化和胰島素抵抗的關(guān)系及機(jī)制[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

9 龐邵杰;成年人血脂及磷脂譜與胰島素抵抗的關(guān)系研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2018年

10 賴業(yè)瑞;DOCK5參與長(zhǎng)期代謝紊亂及高脂誘導(dǎo)下肝胰島素抵抗調(diào)控及其機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2018年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 鄧露;脂聯(lián)素/胰島素抵抗及其信號(hào)通路對(duì)子宮內(nèi)膜癌影響的基礎(chǔ)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2018年

2 楊春霞;SGLT-2抑制劑藥物聯(lián)合胰島素治療1型糖尿病系統(tǒng)評(píng)價(jià)與meta分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2019年

3 黎梅;多囊卵巢綜合征脂質(zhì)蓄積指數(shù)與胰島素抵抗的相關(guān)性Meta分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2019年

4 黃亞博;不同糖耐量老年人群血清NUCB2/nesfatin-1水平與血糖和胰島素抵抗的相關(guān)性研究[D];鄭州大學(xué);2019年

5 朱娜;阿托伐他汀對(duì)胰島素抵抗小鼠心室重構(gòu)的影響及機(jī)制研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2019年

6 翟文虎;術(shù)前飲用碳水化合物對(duì)老年高危手術(shù)患者麻醉前胃容量及術(shù)后胰島素抵抗的影響[D];西南醫(yī)科大學(xué);2019年

7 羅秀梅;2型糖尿病患者認(rèn)知功能障礙的相關(guān)危險(xiǎn)因素分析[D];遵義醫(yī)科大學(xué);2019年

8 程玉華;內(nèi)臟脂肪素對(duì)胰島素抵抗L6細(xì)胞叉頭框蛋白1的影響[D];遵義醫(yī)科大學(xué);2019年

9 邵飛;基于PI3K/AKT/GLUT4通路探討津力達(dá)顆粒改善多囊卵巢綜合征胰島素抵抗的機(jī)制研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2019年

10 塔娜;新診斷2型糖尿病患者經(jīng)短期胰島素強(qiáng)化治療對(duì)生物節(jié)律和Clock mRNA水平的影響[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2019年

本文編號(hào)：2641238