【摘要】：【研究背景】【目的】本實驗觀察DHM是否促進WAT棕色化抵抗高脂飲食誘導的肥胖,其作用機制是否是通過AMPK-Sirt1-PGC1α信號通路來發(fā)揮的,該研究為肥胖的治療提供了新的思路和方向。【方法】將c57bl/6j小鼠隨機分成6組:1.正常對照組(normal diet,ND組):正常小鼠采用普通飼料喂養(yǎng),同時用雙蒸水(1次/天,灌胃)處理16周;2.正常對照+低劑量二氫楊梅素組(ND+L-DHM組):正常小鼠采用普通飼料喂養(yǎng),同時用125mg/kg/d的二氫楊梅素(1次/天,灌胃)處理16周;3.正常對照+高劑量二氫楊梅素組(ND+H-DHM組):正常小鼠采用普通飼料喂養(yǎng),同時用250mg/kg/d的二氫楊梅素(1次/天,灌胃)處理16周;4.高脂飲食組(high fat diet,HFD組):正常小鼠采用高脂飼料喂養(yǎng),同時用雙蒸水(1次/天,灌胃)處理16周;5.高脂飲食+低劑量二氫楊梅素組(HFD+L-DHM組):正常小鼠采用高脂飼料喂養(yǎng),同時用125mg/kg/d的二氫楊梅素(1次/天,灌胃)處理16周;6.高脂飲食+高劑量二氫楊梅素組(HFD+H-DHM組):正常小鼠用高脂飼料喂養(yǎng),并且用250mg/kg/d的二氫楊梅素(1次/天,灌胃)處理16周。每兩周測一次體重和空腹血糖,16周后,從小鼠眼眶靜脈取血測量血脂,處死動物后,測量體重和體長(從小鼠鼻尖到肛門的距離),算出Lee's指數(shù)(Lee's指數(shù)=(體重*1000)^(1/3)/體長(cm))。取肩胛下、腹股溝和附睪處脂肪組織稱重,隨后,將這些脂肪組織一部分甲醛固定,蘇木精-伊紅(Hematoxylin-eosin,HE)染色來觀察脂肪細胞大小,免疫組化檢測棕色化基因UCP1的表達;另一部分通過實時定量聚合酶鏈式反應(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,RT-q PCR)和蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western Blot,WB)檢測各組小鼠脂肪組織中WAT棕色化因子(UCP1,Prdm16)和AMPK-Sirt1-PGC1α信號通路相關(guān)蛋白的表達。【結(jié)果】高脂飲食喂養(yǎng)小鼠16W后,HFD組小鼠體重高于ND組體重20%,提示肥胖小鼠模型復制成功。從第8W開始,HFD組體重和血糖明顯高于ND組,HFD組體脂重量、Lee’s指數(shù)/血糖和血脂明顯高于ND組,L-DHM和H-DHM能顯著降低高脂飲食喂養(yǎng)的肥胖小鼠體重、體脂重量,Lee’s指數(shù)、血糖和血脂;但DHM對正常小鼠上述指標無顯著影響。HE染色所示:與ND組相比,HFD組小鼠肩胛下、腹股溝和附睪處的脂肪細胞大小明顯增大,HFD+L-DHM和HFD+H-DHM組的小鼠脂肪細胞明顯小于HFD組,但DHM對正常小鼠脂肪細胞并無明顯影響。免疫組化結(jié)果顯示:HFD組小鼠肩胛下,腹股溝和附睪處脂肪組織的棕色化因子UCP1的表達明顯低于ND組,HFD+L-DHM和HFD+H-DHM組脂肪組織中UCP1的表達明顯高于HFD組。PCR和Western Blot檢測結(jié)果顯示:與ND組相比,HFD組中的UCP1,Prdm16,AMPK,PGC1α,Sirt1的基因和UCP1,Prdm16,AMPK,PGC1α,Sirt1的蛋白表達明顯降低,L-DHM和H-DHM可以顯著提高肥胖小鼠的UCP1,Prdm16,AMPK,PGC1α,Sirt1的基因和UCP1,Prdm16,AMPK,PGC1α,Sirt1的蛋白的表達,但是DHM對正常小鼠上述指標無影響。【結(jié)論】楊梅素促進白色脂肪棕色化抵抗高脂飲食誘導的肥胖;二氫楊梅素可能經(jīng)AMPK-Sirt1-PGC1α信號通路促進WAT棕色化。
【圖文】：

圖 二氫楊梅素結(jié)構(gòu)式 (http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov)末，分子量 320.05 g/mol，高效液相色譜鑒定純度性的 C57bl/6j 小鼠，3-4 周齡，體重為 16-19 g，由

圖 3.1 二氫楊梅素降低高脂飼料喂養(yǎng)的 c57bl/6j 小鼠體重( ±s, n=13)：普通飼料喂養(yǎng)，用雙蒸水（1 次/天，灌胃）處理正常小鼠 16 w；ND+L-DHM：普通飼
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R589.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 Jun Xie;Jie Liu;Tu-Ming Chen;Qing Lan;Qing-Yu Zhang;Bin Liu;Dong Dai;Wei-Dong Zhang;Li-Ping Hu;Run-Zhi Zhu;;Dihydromyricetin alleviates carbon tetrachloride-induced acute liver injury via JNK-dependent mechanism in mice[J];World Journal of Gastroenterology;2015年18期

2 徐靜娟;姚茂君;鄔敏辰;;二氫楊梅素生物功效的研究[J];食品科學;2008年11期

3 陳玉瓊;倪德江;程倩;黃海波;孟燕;吳謀成;;藤茶總黃酮及二氫楊梅素降血脂作用研究[J];茶葉科學;2007年03期

4 周天達,周雪仙;藤茶中雙氫黃酮醇的分離、結(jié)構(gòu)鑒定及其藥理活性[J];中國藥學雜志;1996年08期

，

本文編號：2601451