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Hedgehog信號通路阻斷劑環(huán)巴胺體外對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖的影響

發(fā)布時間:2020-03-09 10:35
【摘要】:目的探討Hedgehog(Hh)信號通路抑制劑環(huán)巴胺體外對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠(AA)模型的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖的影響和部分機(jī)制。方法弗氏完全佐劑誘導(dǎo)AA大鼠,測量關(guān)節(jié)炎指數(shù)和繼發(fā)性足腫脹度,HE染色觀察兩組軟骨組織生長情況;取AA大鼠踝關(guān)節(jié)軟骨組織,采用胰蛋白酶-膠原酶法分離、培養(yǎng)、鑒定,環(huán)巴胺(0、0.05、0.5、5、20μmol/L)體外給藥,MTT法檢測AA大鼠踝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖,Annexin V-FITC/PI雙染檢測AA大鼠踝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡,Western blotting檢測AA大鼠踝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞Shh、Ptch1、Gli1的蛋白表達(dá)。結(jié)果弗氏完全佐劑誘導(dǎo)后,與正常大鼠相比,AA大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)和繼發(fā)性足腫脹度明顯升高,HE染色顯示,AA大鼠踝關(guān)節(jié)軟骨組織有破壞;甲苯胺藍(lán)和Ⅱ型膠原鑒定體外成功培養(yǎng)AA大鼠踝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞;體外給藥環(huán)巴胺(0.05、0.5、5、20μmol/L)可升高AA模型關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞檢測結(jié)果顯示,環(huán)巴胺能降低AA模型軟骨細(xì)胞凋亡率;與未用環(huán)巴胺組相比,環(huán)巴胺(0.5、5、20μmol/L)給藥對AA軟骨細(xì)胞中Hh信號通路相關(guān)蛋白(Shh、Ptch1、Gli1)表達(dá)顯著下降。結(jié)論弗氏完全佐劑誘導(dǎo)建立AA大鼠模型成立,體外給藥環(huán)巴胺可抑制AA大鼠軟骨細(xì)胞的增殖,抑制軟骨細(xì)胞的凋亡,該作用與抑制AA大鼠軟骨細(xì)胞Hh信號有關(guān)。

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本文編號:2585802


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