【摘要】：目的：觀察miR-335-5p對(duì)高糖狀態(tài)下成骨細(xì)胞增殖、凋亡的影響并探討其可能分子機(jī)制。方法：用不同濃度葡萄糖培養(yǎng)MC3T3-E1成骨細(xì)胞,并分為正常對(duì)照組(葡萄糖濃度5.5mmol/L)、高糖組(葡萄糖濃度22.0mmol/L)、 agomir-335-5p組(轉(zhuǎn)染agomir-335-5p,與濃度為22.0mmol/L的葡萄糖共培養(yǎng))及agomir NC組(轉(zhuǎn)染agomir陰性對(duì)照,與濃度為22.0mmol/L的葡萄糖共培養(yǎng))。培養(yǎng)7天后,采用MTT比色分析法測(cè)定細(xì)胞增殖率,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞miR-335-5p與DKK1 mRNA的表達(dá),Western Blot檢測(cè)DKK1 及 caspase-3的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：(1)高糖組MC3T3-E1成骨細(xì)胞miR-335-5p的表達(dá)水平較正常對(duì)照組顯著下調(diào),agomir-335-5p組MC3T3-E1成骨細(xì)胞miR-335-5p的表達(dá)水平較高糖組與agomir NC組均明顯上調(diào)(P0.05),而DKK1的mRNA表達(dá)水平在各組之間無(wú)顯著差異。(2)與正常對(duì)照組相比,高糖組MC3T3-E1成骨細(xì)胞的增殖率明顯降低,凋亡率顯著增加,而與高糖組比較,agomir-335-5p組MC3T3-E1成骨細(xì)胞的增殖率明顯增加,凋亡率顯著降低(P0.05)。(3)高糖組MC3T3-E1成骨細(xì)胞DKK1和caspase-3的蛋白表達(dá)水平均顯著高于正常對(duì)照組,而agomir-335-5p 組 MC3T3-E1成骨細(xì)胞DKKl與caspase-3的蛋白表達(dá)水平較高糖組與agomir NC組均顯著降低(P0.05)。結(jié)論：高糖狀態(tài)下,niR-335-5p可能通過(guò)轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控機(jī)制抑制DKK1的蛋白表達(dá),從而促進(jìn)MC3T3-E1成骨細(xì)胞的增殖,抑制細(xì)胞凋亡,提示niR-335-5p可能成為防治糖尿病性骨質(zhì)疏松的潛在目標(biāo)。
【圖文】：

骨細(xì)胞的調(diào)ｔ率較高糖沮降低了邋３６．１３％，，較巧ｏｍｉｒＮＣ絕降低了邋３２．４０％，差異均逡逑有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（戶＜０．０５），但與正常對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（戶＞０．０５）；高逡逑糖組與巧ｏｍｉｒＮＣ組之間無(wú)顯著性差異（戶＞０．０５），見

細(xì)胞ｍｉＲ－巧５－５ｐ的表達(dá)水平較高糖組與巧ｏｍｉｒ邋ＮＣ組均明顯升高（Ｐ邋＜邋０．０５邋），但高逡逑糖組與巧ｏｍｉｒ邋ＮＣ組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（b6＞０．０５），ＤＫＫ１的ｍ民ＮＡ表達(dá)水平逡逑在四組間無(wú)顯著性差異（戶＞化0５）。見圖２．３。逡逑１．２０邋１逡逑Ｉ：：：W邐．逡逑！：：：邐Ｉ邐ｉ逡逑含：：１邋Ｍ邋Ｍ邐Ｂ＿＿＿逡逑Ｃ饑１止0］邐Ｈｉｄｉ邋＾ｈｉｃｏＦｃ邋ｍｉＲ－５Ａ５＊？ｐ邋ｎｇｏｉｕｉｉ邋ＫＣ逡逑ａ）逡逑■邋ｌｉ邋１１１逡逑Ｃｏｎｔｒｏｌ邋Ｈｉｇｉｉ邋ａｌｕｃｏｓｃ邋ｉｎｉＲ－３３５－５ｐ邐巧ｏｍｉｒＮＣ逡逑ｂ）逡逑困２．３各組細(xì)胞ｍ瓜－巧５－５ｐ與ＤＫＫｌ邋ｍＲＮＡ表達(dá)情化逡逑Ｆｉｇｕｉ＊ｅ邋２．３邋Ｒｅｌａｔｉｖｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ邋ｏｆ邋ｎｉｉＲ－３３５－５ｐ邋ａｎｄ邋ＤＫＫｌ邋ｍＲＮＡ邋ｉｎ邋ｅａｃｈ邋ｇｒｏｕｐ．逡逑注：？b6邋＜邋０．０５邋Ｖ玉．Ｃｏｎｔｒｏｌ作邋＜邋０．０５邋Ｖ義邋Ｈｉｇｈ邋ｇｌｕｃｏｓｅ．逡逑２０逡逑
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R580;R587.1

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本文編號(hào)：2585105