發(fā)布時(shí)間：2020-03-05 11:28

【摘要】：電離輻射會(huì)對(duì)生物體的遺傳物質(zhì)造成損傷,引發(fā)細(xì)胞壞死和凋亡。會(huì)對(duì)機(jī)體損傷嚴(yán)重的電離輻射,常出現(xiàn)于醫(yī)院用于治療腫瘤病人的放療以及太空上的宇宙射線。人的大腦作為重要器官之一,結(jié)構(gòu)復(fù)雜且功能強(qiáng)大,當(dāng)腦部受到輻射損傷,往往會(huì)伴隨這一系列炎癥反應(yīng)。因?yàn)樯矬w過于復(fù)雜,所以在本文中使用細(xì)胞系建立了神經(jīng)免疫相互作用的細(xì)胞模型,探索受到γ射線輻射損傷的神經(jīng)細(xì)胞會(huì)對(duì)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的效應(yīng)。本文使用SH-SY5Y細(xì)胞(神經(jīng)細(xì)胞的體外模型)、U87 MG(膠質(zhì)細(xì)胞的體外模型)、THP-1/U937(單核巨噬細(xì)胞的體外模型)和Jurkat(T細(xì)胞的體外模型)這五種細(xì)胞系構(gòu)建體外神經(jīng)免疫作用模型。共培養(yǎng)時(shí),神經(jīng)細(xì)胞SH-SY5Y和U87 MG細(xì)胞是混合培養(yǎng)的,在輻射后換液再培養(yǎng)24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí),并將收集的神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)基再次用于培養(yǎng)免疫細(xì)胞,24小時(shí)后,收集免疫細(xì)胞,并對(duì)免疫細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。首先,進(jìn)行輻射劑量和培養(yǎng)時(shí)間的確定,然后在選取了10Gy培養(yǎng)72小時(shí)作為THP-1后續(xù)研究的條件,選取了7Gy培養(yǎng)24小時(shí)作為研究Jurkat研究和實(shí)驗(yàn)條件。THP-1細(xì)胞進(jìn)行了Brd U增殖實(shí)驗(yàn)、免疫熒光染色、活化細(xì)胞表面糖蛋白流式檢測(cè)以及趨化實(shí)驗(yàn)。對(duì)Jurkat細(xì)胞進(jìn)行了細(xì)胞計(jì)數(shù)、周期流式檢測(cè)和凋亡流式檢測(cè)。從實(shí)驗(yàn)中可以得知,受到輻射損傷的共培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)在10、15Gy時(shí)會(huì)對(duì)THP-1產(chǎn)生抑制增殖促活化作用,并會(huì)對(duì)THP-1細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用。受到輻射損傷的共培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)抑制Jurkat的增殖。因此,我們推斷當(dāng)神經(jīng)系統(tǒng)受到輻射后損傷時(shí),會(huì)活化單核巨噬細(xì)胞并產(chǎn)生趨化因子募集更多免疫細(xì)胞,但此時(shí),適應(yīng)性免疫中T細(xì)胞的增殖是被抑制的。
【圖文】：

北京理工大學(xué)碩士學(xué)位論文.2 不同輻射劑量損傷的神經(jīng)膠質(zhì) U87 MG 單獨(dú)培養(yǎng)的培養(yǎng)基對(duì)免疫細(xì)胞的作用為了觀測(cè)單獨(dú)培養(yǎng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 U87 MG 在受到輻射損傷后會(huì)對(duì)免疫細(xì)生何種作用，將 U87 MG 按 4.5%s105 接種量種于 T25 的培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)了48、72 小時(shí)后收集培養(yǎng)上清，將培養(yǎng)上清繼續(xù)用于培養(yǎng)免疫細(xì)胞 24 小時(shí)使用 MTS 法來檢測(cè)細(xì)胞的存活率。（1）不同輻射劑量的神經(jīng)膠質(zhì)單獨(dú)培養(yǎng)的培養(yǎng)基對(duì) THP-1 的作用受到不同程度輻射損傷的 U87 MG 細(xì)胞的培養(yǎng)基對(duì) THP-1 細(xì)胞的作用主要為，在低劑量 5Gy 時(shí)無反應(yīng)，在高劑量 7、10、15Gy 對(duì) THP-1 產(chǎn)生促活作用。因?yàn)?U87 MG 細(xì)胞的半致死劑量為 10Gy，所以 5Gy 的輻射劑量可于 U87 MG 來說，只是造成輕微的損傷，所以基本沒有效應(yīng)。從 7Gy 開始 72 小時(shí)的 U87 MG 細(xì)胞的培養(yǎng)基對(duì) THP-1 產(chǎn)生促活化作用。

北京理工大學(xué)碩士學(xué)位論文.2 不同輻射劑量損傷的神經(jīng)膠質(zhì) U87 MG 單獨(dú)培養(yǎng)的培養(yǎng)基對(duì)免疫細(xì)胞的作用為了觀測(cè)單獨(dú)培養(yǎng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 U87 MG 在受到輻射損傷后會(huì)對(duì)免疫細(xì)生何種作用，將 U87 MG 按 4.5%s105 接種量種于 T25 的培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)了48、72 小時(shí)后收集培養(yǎng)上清，將培養(yǎng)上清繼續(xù)用于培養(yǎng)免疫細(xì)胞 24 小時(shí)使用 MTS 法來檢測(cè)細(xì)胞的存活率。（1）不同輻射劑量的神經(jīng)膠質(zhì)單獨(dú)培養(yǎng)的培養(yǎng)基對(duì) THP-1 的作用受到不同程度輻射損傷的 U87 MG 細(xì)胞的培養(yǎng)基對(duì) THP-1 細(xì)胞的作用主要為，在低劑量 5Gy 時(shí)無反應(yīng)，，在高劑量 7、10、15Gy 對(duì) THP-1 產(chǎn)生促活作用。因?yàn)?U87 MG 細(xì)胞的半致死劑量為 10Gy，所以 5Gy 的輻射劑量可于 U87 MG 來說，只是造成輕微的損傷，所以基本沒有效應(yīng)。從 7Gy 開始 72 小時(shí)的 U87 MG 細(xì)胞的培養(yǎng)基對(duì) THP-1 產(chǎn)生促活化作用。
【學(xué)位授予單位】：北京理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R594.8

【參考文獻(xiàn)】

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1 吳少雄,鄧美玲,李巧巧,趙充,盧泰祥,李鳳巖,崔念基;腦膠質(zhì)瘤放射治療的預(yù)后因素分析[J];癌癥;2004年S1期

本文編號(hào)：2584991