【摘要】：目的:原發(fā)性干燥綜合征(primary sj?gren’s syndrome,pSS)是一種以淚腺、唾液腺等外分泌腺體受累,具有高度淋巴細胞浸潤為特征的彌漫性結締組織病。臨床上主要表現為干燥性角、結膜炎,口腔干燥癥,還可累及肺臟、肝臟、腎臟、血液、骨骼肌肉、神經等多個臟器和系統。pSS病因和發(fā)病機制未明,研究發(fā)現其發(fā)病與遺傳因素、環(huán)境因素、多種免疫細胞及相關細胞因子有關。調節(jié)性B細胞(regulatory B cell,Breg)在pSS發(fā)病中的作用是當前研究的熱點之一。本研究通過檢測原發(fā)性干燥綜合征患者外周血中調節(jié)性B淋巴細胞數目及增殖誘導配體(a proliferation inducing ligand,APRIL)表達水平,分析研究其與免疫球蛋白水平、自身抗體表達、唇腺病理等級以及疾病活動度的相關性,來探討CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg和APRIL在pSS發(fā)病發(fā)展中的作用,為pSS的診斷和治療提供新的靶點和思路。方法:1病例選擇及分組:選取河北省人民醫(yī)院風濕免疫科自2015年4月至2015年10月初治的pSS患者30例作為實驗組,所有患者均符合2002年修訂的pSS國際分類診斷標準,并且排除有其他結締組織病、頸頭面部放療史、丙肝病毒感染、AIDS、淋巴瘤、移植物抗宿主病、應用抗乙酰膽堿藥等。另外,選取年齡、性別與實驗組pSS患者匹配的健康志愿者20例為對照組。將pSS患者按照自身抗體的有無、唇腺等級及ESSDAI評分等級進行不同的分組。2實驗方法:采用流式細胞術檢測表型為CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg的百分比;酶聯免疫吸附法檢測血清中APRIL的表達水平;收集入組患者的基本信息,臨床資料,其中臨床指標包括WBC、RBC、Plt、Hb、ANA(anti-nuclear antibody,ANA)、ENA抗體譜、類風濕因子(rheumatoid factor,RF)、免疫球蛋白(immune globulin,Ig)、C反應蛋白(C reactive protein,CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、補體C3(complement3,C3)、C4(complement 4,C4)。3唇腺病理分級:取患者下唇腺病理組織,福爾馬林液固定,石蠟包埋,切片,然后進行HE染色。根據Chisholm標準分為I~Ⅳ級。4患者疾病活動指數評估:依據2009年歐洲抗風濕病聯盟制定的干燥綜合征疾病活動度指數(ESSDAI)對患者疾病活動度進行評估。5采用SPSS17.0統計軟件進行統計分析,計量資料符合正態(tài)分布的結果以均數±標準差(xˉ±SD)表示,兩組間比較應用t檢驗;多組樣本間均數比較采用單因素方差分析。非正態(tài)分布的資料采用中位數(四分位間距)[M(P25,P75)],兩組資料比較采用非參數Mann-Whitney U檢驗。符合正態(tài)、方差齊的計量資料采用Pearson相關分析,非正態(tài)或方差不齊的計量資料采用Spearman相關分析。結果:1 pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg及APRIL的表達水平:pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg占CD19~+細胞百分比為5.06±0.69%,較健康對照組2.55±0.54%顯著升高(P0.001)。血清APRIL的表達水平為7.40±2.20ng/ml,較健康對照組1.99±0.44ng/ml顯著升高(P0.001)。2 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達和APRIL水平與自身抗體的關系:按照自身抗體的存在與否,將pSS患者分為ANA陰性組(7例)、陽性組(23例);抗SSA陰性組(11例)、陽性組(19例);抗SSB陰性組(20例)、陽性組(10例);RF陰性組(19例)、陽性組(11例)�？筍SA抗體陽性、抗SSB抗體陽性組pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達分別為5.44±0.46%和5.59±0.53%,顯著高于對應抗體陰性患者的4.41±0.49%和4.79±0.61%(t=-5.70,-3.53;P0.001)。上述其余各抗體陽性組和陰性組pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達差異無統計學意義(P0.05)。pSS患者血清APRIL在各抗體陽性組和陰性組的表達差異均無統計學意義(P0.05)。3 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達和APRIL水平與臨床指標的關系:pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達與年齡呈負相關(r=-0.43;P0.05),與Ig G呈正相關(r=0.44;P0.05);血清中APRIL的表達與ESR成正相關(r=0.91;P0.05)。4 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達和APRIL水平與唇腺病理分級的關系:實驗組pSS患者唇腺病理等級為3級的有8例,唇腺病理等級為4級的有22例,兩組CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg的表達分別為4.84±0.69%和5.14±0.68%,二者間差異無統計學意義(t=-1.07;P0.05);APRIL的表達分別為6.90±1.84ng/ml和7.59±2.34ng/ml,二者間差異亦無統計學意義(t=-0.75;P0.05)。5 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達和APRIL水平與ESSDAI的關系:按ESSDAI評分將疾病活動度分為4個等級。0-2分為1級,3-5分為2級,6-8分為3級,9分以上為4級。實驗組pSS患者ESSDAI評分分布1級6例,2級19例,3級5例,其CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg的表達分別為4.95±0.78%,5.09±0.68%和5.08±0.76%。APRIL的表達水平分別為8.73±3.11ng/ml,6.76±1.69ng/ml和8.27±2.17ng/ml;在疾病活動度不同分級之間CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg及APRIL的表達差異均無統計學意義(F=0.10,0.93;P0.05)。6 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達和血清APRIL水平的相關性:pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg與APRIL的表達不具有相關性(r=-0.04;P0.05)。結論:1 pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg及APRIL的表達均較健康對照組顯著升高,提示CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg及血清APRIL參與了pSS的發(fā)病過程。2抗SSA抗體陽性和抗SSB抗體陽性pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達高于抗SSA陰性和抗SSB抗體陰性的患者;而且CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達水平與Ig G水平呈正相關,提示pSS患者CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達異常與抗SSA和抗SSB抗體的產生有關。3在pSS患者血清APRIL的表達與ESR呈正相關,提示APRIL有可能作為一種體內炎癥程度的判定指標。
【圖文】：

圖 1 pSS 患者及健康對照者外周血中 CD19+CD5+CD1dhiBreg 及 APRIL 的表達Fig.1 Expression of CD19+CD5+CD1dhiBregs andAPRIL in pSS patients andhealthy individualsHCpSS0246CD19+CD5+CD1dhiBreg(%)HCpSS0510APRIL（ng/ml）

圖 3 pSS 患者外周血 CD19+CD5+CD1dhiBreg 表達水平與年齡的相關Fig.3 Correlation between CDl9+CD5+CD1dhiBregs and age in pSS patie
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R593.2

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 徐東;趙巖;;干燥綜合征疾病活動及臟器損傷指數的研究進展[J];實用醫(yī)院臨床雜志;2015年05期

2 吳敏;劉曉華;潘解萍;;B細胞激活因子和增殖誘導配體與原發(fā)性干燥綜合征發(fā)病機制的研究[J];中華風濕病學雜志;2010年02期

，

本文編號：2572417