發(fā)布時(shí)間：2020-01-23 21:44

【摘要】：目的:原發(fā)性干燥綜合征(primary sj?gren’s syndrome,pSS)是一種以淚腺、唾液腺等外分泌腺體受累,具有高度淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為特征的彌漫性結(jié)締組織病。臨床上主要表現(xiàn)為干燥性角、結(jié)膜炎,口腔干燥癥,還可累及肺臟、肝臟、腎臟、血液、骨骼肌肉、神經(jīng)等多個(gè)臟器和系統(tǒng)。pSS病因和發(fā)病機(jī)制未明,研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)病與遺傳因素、環(huán)境因素、多種免疫細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子有關(guān)。調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(regulatory B cell,Breg)在pSS發(fā)病中的作用是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)之一。本研究通過檢測(cè)原發(fā)性干燥綜合征患者外周血中調(diào)節(jié)性B淋巴細(xì)胞數(shù)目及增殖誘導(dǎo)配體(a proliferation inducing ligand,APRIL)表達(dá)水平,分析研究其與免疫球蛋白水平、自身抗體表達(dá)、唇腺病理等級(jí)以及疾病活動(dòng)度的相關(guān)性,來探討CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg和APRIL在pSS發(fā)病發(fā)展中的作用,為pSS的診斷和治療提供新的靶點(diǎn)和思路。方法:1病例選擇及分組:選取河北省人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科自2015年4月至2015年10月初治的pSS患者30例作為實(shí)驗(yàn)組,所有患者均符合2002年修訂的pSS國際分類診斷標(biāo)準(zhǔn),并且排除有其他結(jié)締組織病、頸頭面部放療史、丙肝病毒感染、AIDS、淋巴瘤、移植物抗宿主病、應(yīng)用抗乙酰膽堿藥等。另外,選取年齡、性別與實(shí)驗(yàn)組pSS患者匹配的健康志愿者20例為對(duì)照組。將pSS患者按照自身抗體的有無、唇腺等級(jí)及ESSDAI評(píng)分等級(jí)進(jìn)行不同的分組。2實(shí)驗(yàn)方法:采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)表型為CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg的百分比;酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中APRIL的表達(dá)水平;收集入組患者的基本信息,臨床資料,其中臨床指標(biāo)包括WBC、RBC、Plt、Hb、ANA(anti-nuclear antibody,ANA)、ENA抗體譜、類風(fēng)濕因子(rheumatoid factor,RF)、免疫球蛋白(immune globulin,Ig)、C反應(yīng)蛋白(C reactive protein,CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、補(bǔ)體C3(complement3,C3)、C4(complement 4,C4)。3唇腺病理分級(jí):取患者下唇腺病理組織,福爾馬林液固定,石蠟包埋,切片,然后進(jìn)行HE染色。根據(jù)Chisholm標(biāo)準(zhǔn)分為I~Ⅳ級(jí)。4患者疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)估:依據(jù)2009年歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟制定的干燥綜合征疾病活動(dòng)度指數(shù)(ESSDAI)對(duì)患者疾病活動(dòng)度進(jìn)行評(píng)估。5采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料符合正態(tài)分布的結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(xˉ±SD)表示,兩組間比較應(yīng)用t檢驗(yàn);多組樣本間均數(shù)比較采用單因素方差分析。非正態(tài)分布的資料采用中位數(shù)(四分位間距)[M(P25,P75)],兩組資料比較采用非參數(shù)Mann-Whitney U檢驗(yàn)。符合正態(tài)、方差齊的計(jì)量資料采用Pearson相關(guān)分析,非正態(tài)或方差不齊的計(jì)量資料采用Spearman相關(guān)分析。結(jié)果:1 pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg及APRIL的表達(dá)水平:pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg占CD19~+細(xì)胞百分比為5.06±0.69%,較健康對(duì)照組2.55±0.54%顯著升高(P0.001)。血清APRIL的表達(dá)水平為7.40±2.20ng/ml,較健康對(duì)照組1.99±0.44ng/ml顯著升高(P0.001)。2 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)和APRIL水平與自身抗體的關(guān)系:按照自身抗體的存在與否,將pSS患者分為ANA陰性組(7例)、陽性組(23例);抗SSA陰性組(11例)、陽性組(19例);抗SSB陰性組(20例)、陽性組(10例);RF陰性組(19例)、陽性組(11例)�？筍SA抗體陽性、抗SSB抗體陽性組pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)分別為5.44±0.46%和5.59±0.53%,顯著高于對(duì)應(yīng)抗體陰性患者的4.41±0.49%和4.79±0.61%(t=-5.70,-3.53;P0.001)。上述其余各抗體陽性組和陰性組pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。pSS患者血清APRIL在各抗體陽性組和陰性組的表達(dá)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)和APRIL水平與臨床指標(biāo)的關(guān)系:pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)與年齡呈負(fù)相關(guān)(r=-0.43;P0.05),與Ig G呈正相關(guān)(r=0.44;P0.05);血清中APRIL的表達(dá)與ESR成正相關(guān)(r=0.91;P0.05)。4 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)和APRIL水平與唇腺病理分級(jí)的關(guān)系:實(shí)驗(yàn)組pSS患者唇腺病理等級(jí)為3級(jí)的有8例,唇腺病理等級(jí)為4級(jí)的有22例,兩組CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg的表達(dá)分別為4.84±0.69%和5.14±0.68%,二者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-1.07;P0.05);APRIL的表達(dá)分別為6.90±1.84ng/ml和7.59±2.34ng/ml,二者間差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.75;P0.05)。5 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)和APRIL水平與ESSDAI的關(guān)系:按ESSDAI評(píng)分將疾病活動(dòng)度分為4個(gè)等級(jí)。0-2分為1級(jí),3-5分為2級(jí),6-8分為3級(jí),9分以上為4級(jí)。實(shí)驗(yàn)組pSS患者ESSDAI評(píng)分分布1級(jí)6例,2級(jí)19例,3級(jí)5例,其CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg的表達(dá)分別為4.95±0.78%,5.09±0.68%和5.08±0.76%。APRIL的表達(dá)水平分別為8.73±3.11ng/ml,6.76±1.69ng/ml和8.27±2.17ng/ml;在疾病活動(dòng)度不同分級(jí)之間CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg及APRIL的表達(dá)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.10,0.93;P0.05)。6 pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)和血清APRIL水平的相關(guān)性:pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg與APRIL的表達(dá)不具有相關(guān)性(r=-0.04;P0.05)。結(jié)論:1 pSS患者外周血中CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg及APRIL的表達(dá)均較健康對(duì)照組顯著升高,提示CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg及血清APRIL參與了pSS的發(fā)病過程。2抗SSA抗體陽性和抗SSB抗體陽性pSS患者外周血CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)高于抗SSA陰性和抗SSB抗體陰性的患者;而且CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)水平與Ig G水平呈正相關(guān),提示pSS患者CD19~+CD5~+CD1d~(hi) Breg表達(dá)異常與抗SSA和抗SSB抗體的產(chǎn)生有關(guān)。3在pSS患者血清APRIL的表達(dá)與ESR呈正相關(guān),提示APRIL有可能作為一種體內(nèi)炎癥程度的判定指標(biāo)。
【圖文】：

圖 1 pSS 患者及健康對(duì)照者外周血中 CD19+CD5+CD1dhiBreg 及 APRIL 的表達(dá)Fig.1 Expression of CD19+CD5+CD1dhiBregs andAPRIL in pSS patients andhealthy individualsHCpSS0246CD19+CD5+CD1dhiBreg(%)HCpSS0510APRIL（ng/ml）

圖 3 pSS 患者外周血 CD19+CD5+CD1dhiBreg 表達(dá)水平與年齡的相關(guān)Fig.3 Correlation between CDl9+CD5+CD1dhiBregs and age in pSS patie
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R593.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 徐東;趙巖;;干燥綜合征疾病活動(dòng)及臟器損傷指數(shù)的研究進(jìn)展[J];實(shí)用醫(yī)院臨床雜志;2015年05期

2 吳敏;劉曉華;潘解萍;;B細(xì)胞激活因子和增殖誘導(dǎo)配體與原發(fā)性干燥綜合征發(fā)病機(jī)制的研究[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2010年02期

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本文編號(hào)：2572417