【摘要】:目的:探討鈣、鎂、鋅、銅、維生素D與蛋白質對燃煤型氟中毒雌鼠卵巢顆粒細胞凋亡的干預作用及可能機制。方法:1.將SD雌性大鼠120只隨機分為對照組、染氟組、多維元素干預組、多維元素加蛋白干預組,每組30只,自由食用添加鈣、鎂、銅、鋅、維生素D和強化大豆不同配方的織金病區(qū)原煤加拌泥煤烘烤的玉米飼料構建動物模型;2.動態(tài)觀察雌鼠染氟期間牙齒的變化情況;3.采用離子選擇電極法、高溫灰化-氟離子選擇電極法測定雌鼠尿氟、骨氟含量;4.于不同時間段(60d、120d、180d)動情期處死雌鼠,分離卵巢。①采用比色法測定雌鼠新鮮卵巢組織超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;②電鏡下觀察卵巢組織超微結構;③原位末端標記(TUNEL)法檢測卵巢顆粒細胞凋亡率;④免疫組化法檢測卵巢顆粒細胞凋亡相關因子Fas、Caspase-3的表達情況。結果:1.成功建立燃煤型氟中毒雌鼠模型和干預模型。2.染氟時間相同的組別,雌鼠卵巢SOD活性為對照組多維元素加蛋白干預組多維元素干預組染氟組(P0.05),雌鼠卵巢MDA含量為染氟組多維元素干預組多維元素加蛋白干預組對照組(P0.05);3.卵巢超微結構顯示顆粒細胞凋亡現(xiàn)象:對照組和兩干預組未見,染氟組出現(xiàn),隨時間延長,凋亡加重;4.染氟時間相同的組別,雌鼠卵巢顆粒細胞凋亡率為染氟組多維元素干預組多維元素加蛋白干預組對照組(P0.05),隨時間延長,僅染氟組60d與180d比較有統(tǒng)計學意義(P0.05);5.染氟時間相同的組別,雌鼠卵巢顆粒細胞Fas、Caspase-3蛋白表達量均為染氟組多維元素干預組多維元素加蛋白干預組對照組(P0.05),隨時間延長,染氟組、多維元素干預組、多維元素加蛋白干預組雌鼠Caspase-3蛋白表達量逐漸降低,除多維元素加蛋白干預組120d與180d比較無統(tǒng)計學意義,其余各組各時間點比較均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1.過量氟可誘導卵巢顆粒細胞發(fā)生凋亡,而氧化應激促進凋亡相關因子Fas表達和激活Caspase-3蛋白表達可能是氟誘導卵巢顆粒細胞凋亡的作用機制之一;2.鈣、鎂、銅、鋅、維生素D可通過降低氟負荷、升高卵巢SOD活性、降低MDA含量、增強卵巢抗氧化能力、減輕卵巢顆粒細胞超微結構損傷、下調Fas死亡受體和Caspase-3蛋白表達,拮抗氟的生殖毒性,抑制氟中毒致雌鼠卵巢顆粒細胞凋亡,聯(lián)合蛋白質干預效果更佳;3.鈣、鎂、銅、鋅、維生素D與蛋白質對氟中毒致雌鼠卵巢顆粒細胞凋亡的拮抗作用與時間無明顯相關性。
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【學位授予單位】:貴陽醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R599.1
【參考文獻】
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本文編號:
2482552
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