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晚期氧化蛋白終產(chǎn)物對(duì)破骨細(xì)胞分化的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-02-12 13:23
【摘要】:目的探討晚期氧化蛋白終產(chǎn)物(AOPPs)對(duì)破骨細(xì)胞分化的影響。方法體外分離培養(yǎng)大鼠骨髓單核細(xì)胞,分為空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組(RSA)、AOPPs組、陽(yáng)性對(duì)照組(RANKL)、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制劑組(AOPPs+夾竹桃麻素),干預(yù)6 d后,通過(guò)抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色觀察TRAP陽(yáng)性多核細(xì)胞,鬼筆環(huán)肽熒光染色觀察F肌動(dòng)蛋白(F-actin)環(huán),甲苯胺藍(lán)染色觀察骨磨片的骨吸收陷窩。此外,AOPPs刺激2 h后,通過(guò)DCFH-DA熒光探針?lè)z測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)生成。結(jié)果 AOPPs及陽(yáng)性對(duì)照組RANKL均可誘導(dǎo)TRAP陽(yáng)性多核細(xì)胞、F-actin環(huán)及骨吸收陷窩形成,并且AOPPs刺激后細(xì)胞ROS生成明顯增多。AOPPs所致以上效應(yīng)均能被NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃麻素阻斷。結(jié)論 AOPPs可誘導(dǎo)大鼠骨髓單核細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of late oxidative protein end product (AOPPs) on osteoclast differentiation. Methods Rat bone marrow monocytes were isolated and cultured in vitro and divided into three groups: blank control group, negative control group (RSA), AOPPs group and positive control group (RANKL),. Reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase (AOPPs dinucleotide) inhibitor group was treated with AOPPs for 6 days. TRAP positive multinucleated cells were observed by tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining. The F-actin (F-actin) ring was observed by fluorescence staining and the bone resorption fossa was observed by toluidine blue staining. In addition, after AOPPs stimulation for 2 h, reactive oxygen species (Ros) (ROS) production was detected by DCFH-DA fluorescence probe assay. Results both AOPPs and RANKL in the positive control group could induce the formation of TRAP positive multinucleated cells, F-actin ring and bone resorption lacunae, and the ROS production of the cells stimulated by AOPPs was significantly increased. All of the above effects induced by AOPPs could be blocked by NADPH oxidase inhibitor olefinin. Conclusion AOPPs can induce rat bone marrow monocytes to differentiate into osteoclasts.
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院脊柱骨科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81000785,81472135)
【分類(lèi)號(hào)】:R580

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本文編號(hào):2420474

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