發(fā)布時(shí)間：2018-11-17 13:11

【摘要】：目的探討果蠅Mad基因3哺乳動(dòng)物類似基因(Smad3)對高糖環(huán)境下足細(xì)胞凋亡的影響。方法足細(xì)胞分為對照組、高糖組、干擾組,對照組、高糖組在實(shí)驗(yàn)開始前轉(zhuǎn)染siRNA control,干擾組轉(zhuǎn)染Smad3 siRNA。高糖組、干擾組用含有25 mmol/L的D葡萄糖細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng),對照組用含有5 mmol/L的D葡萄糖細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)。Western印跡檢測Smad3、磷酸化的Smad3(p-Smad3)、酶切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、B細(xì)胞淋巴瘤(Bcl)-2相關(guān)X蛋白(Bax)、Bcl/白血病-x基因長片段(Bcl-xl)水平,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果高糖組細(xì)胞中Smad3水平與對照組相比無明顯差異(P0.05),而p-Smad3水平明顯高于對照組(P0.05)。干擾組細(xì)胞中Smad3、p-Smad3水平均明顯低于高糖組(P0.05)。高糖組細(xì)胞凋亡率明顯高于對照組,干擾組明顯低于高糖組(均P0.05)。高糖組Cleaved Caspase-3、Bax水平明顯高于對照組,Bcl-xl水平明顯低于對照組(均P0.05),干擾組Cleaved Caspase-3、Bax水平均明顯低于高糖組,Bcl-xl水平明顯高于高糖組(均P0.05)。結(jié)論高糖環(huán)境下,足細(xì)胞中Smad3磷酸化水平升高,細(xì)胞凋亡增多,而下調(diào)Smad3可以抑制高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡,抑制Cleaved Caspase-3、Bax表達(dá),促進(jìn)Bcl-xl表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Mad gene 3 mammalian analogous gene (Smad3) of Drosophila melanogaster on apoptosis of podocyte in high glucose environment. Methods podocytes were divided into three groups: control group, high glucose group, interference group, control group and high glucose group. Before the experiment, the siRNA control, interference group was transfected with Smad3 siRNA.. High glucose group, interference group were cultured with D glucose cell culture medium containing 25 mmol/L, while control group were cultured with D glucose cell culture medium containing 5 mmol/L. Smad3, phosphorylation Smad3 (p-Smad3) was detected by Western blot. The level of (Bcl) 2 associated X protein (Bax), Bcl/ leukaemia X gene long fragment (Bcl-xl) in Cleaved Caspase-3), B cell lymphoma was determined by enzyme digestion of cysteine-containing aspartate protease 3 (Bcl) 2). Apoptosis was detected by flow cytometry. Results there was no significant difference in the level of Smad3 between the high glucose group and the control group (P0.05), but the level of p-Smad3 was significantly higher than that of the control group (P0.05). The level of Smad3,p-Smad3 in interference group was significantly lower than that in high glucose group (P0.05). The apoptosis rate of high glucose group was significantly higher than that of control group, and that of interference group was significantly lower than that of high glucose group (P0.05). The levels of Cleaved Caspase-3,Bax and Bcl-xl in high glucose group were significantly higher than those in control group (P0.05), Cleaved Caspase-3,Bax level in interference group was significantly lower than that in high glucose group, and Bcl-xl level was significantly higher than that in high glucose group (P0.05). Conclusion the level of Smad3 phosphorylation in podocytes was increased and apoptosis was increased under high glucose condition. Down-regulation of Smad3 could inhibit the apoptosis of podocytes induced by high glucose, inhibit the expression of Cleaved Caspase-3,Bax and promote the expression of Bcl-xl.
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院VIP內(nèi)科;新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院干一科;
【基金】：新疆維吾爾自治區(qū)科技攻關(guān)和重點(diǎn)科技項(xiàng)目(201233398)
【分類號】：R587.2

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本文編號：2337911