【摘要】：目的:本研究通過觀察乳鐵蛋白(Lactoferrin LF)對(duì)去卵巢大鼠骨量的影響,以及對(duì)股骨IGF-I、IGFBP-3和IGFBP-5 m RNA表達(dá)的影響,來探究乳鐵蛋白對(duì)骨質(zhì)疏松的作用及其可能的分子機(jī)制。方法:將70只6月齡的雌性SD(Sprague-Dawley)大鼠按1:6比例隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)與去卵巢模型組(Ovx),再將去卵巢大鼠隨機(jī)平均分為6組:骨質(zhì)疏松模型組(Con)(生理鹽水2ml/只·天,灌胃)、雌激素治療組(E2)(0.1mg/kg·周,肌肉注射)、牛血清白蛋白組(BSA)(0.1g/kg·d,灌胃)和不同劑量的乳鐵蛋白治療組LF1(0.1g/kg·d,灌胃)、LF2(1g/kg·d,灌胃)、LF3(2g/kg·d,灌胃)。連續(xù)干預(yù)24周后,采用生物光學(xué)顯微鏡觀察大鼠左側(cè)脛骨骺線下干骺端骨組織HE染色病理切片并用圖像分析軟件(Image-Pro Plus 6.0)分析各組骨小梁平均面積所占骨髓腔比例,再結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real Time RT-PCR)來觀察大鼠右側(cè)股骨胰島素樣生長(zhǎng)因子I(IGF-I)、胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)與胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果:1.各組大鼠在乳鐵蛋白干預(yù)前,體重?zé)o明顯差異(均P0.05),大鼠去卵巢手術(shù)后,各組體重均有所增加,以Con組增加最快,乳鐵蛋白干預(yù)6個(gè)月后,各組大鼠體重均明顯升高,以Con組增加最多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05),Con組大鼠明顯重于Sham組和E2組(均P0.05),BSA組和不同劑量乳鐵蛋白治療組大鼠體重均低于Con組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05)。2.各組大鼠治療6個(gè)月后,顯微鏡下觀察骨組織HE染色病理切片發(fā)現(xiàn)Sham組和E2組較Con組和BSA組的骨小梁更為致密,LF1-3(0.1g/kg·d,1g/kg·d,2g/kg·d)骨小梁較Con組也更為致密,但不如Sham組和E2組顯著。LF1-3各組之間骨小梁的疏密程度在肉眼觀差異不大。圖像分析提示骨小梁面積占骨髓腔的比例Sham組和E2組明顯高于Con組、BSA組和LF1-3各組(均P0.01),Sham組和E2組、BSA組和Con組、LF1-3各組之間均無明顯差異(均P0.05)。3.各組大鼠治療6個(gè)月后,Con組IGF-I m RNA表達(dá)量顯著低于Sham組和E2組(均P0.01),也低于LF1-3(0.1g/kg·d,1g/kg·d,2g/kg·d)各組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.01)。Con組IGFBP-3 m RNA表達(dá)量明顯低于Sham組和E2組(P0.01),但高于LF1-3(0.1g/kg·d,1g/kg·d,2g/kg·d)各組,差別有顯著性(均P0.01)。Con組IGFBP-5 m RNA表達(dá)量顯著低于Sham組和E2組(均P0.01),也低于LF2-3(1g/kg·d,2g/kg·d)各組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05和P0.01)。結(jié)論:1.成功建立去卵巢大鼠的骨質(zhì)疏松模型。2.乳鐵蛋白可提高去卵巢大鼠的骨量,減少因去卵巢而誘發(fā)的骨丟失,這可能對(duì)骨質(zhì)疏松的治療有潛在作用。3.乳鐵蛋白改善骨質(zhì)疏松可能通過提高IGF-I和IGFBP-5水平,抑制IGFBP-3水平,從而促進(jìn)骨形成,抑制骨吸收。
[Abstract]:Objective: to observe the effect of lactoferrin (Lactoferrin LF) on bone mass and the expression of IGF-I,IGFBP-3 and IGFBP-5 m RNA in femur of ovariectomized rats. To explore the role of lactoferrin in osteoporosis and its possible molecular mechanisms. Methods: seventy 6-month-old female SD (Sprague-Dawley) rats were randomly divided into sham operation group (Sham) and ovariectomized model group (Ovx),) at 1:6. Then the ovariectomized rats were randomly divided into 6 groups: osteoporosis model group (Con) (saline 2ml/, intragastric perfusion), estrogen treatment group (0.1mg/kg week, intramuscular injection), ovariectomized rats (ovariectomized rats), ovariectomized rats (ovariectomized rats). Bovine serum albumin (BSA) group (BSA) (0.1g/kg d) and different doses of lactoferrin treatment group (0.1g/kg d, gavage), LF2 (1g/kg d, gavage), LF3 (2g/kg d, gavage). After 24 weeks of continuous intervention, the HE staining pathological sections of the left tibial epiphyseal bone of the rats were observed under a biomicroscopy and the ratio of the average trabecular area to the medullary cavity in each group was analyzed by image analysis software (Image-Pro Plus 6.0). The right femur insulin-like growth factor I (IGF-I) was observed by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (Real Time RT-PCR). Expression of insulin-like growth factor binding protein 3 (IGFBP-3) and insulin-like growth factor binding protein 5 (IGFBP-5) m RNA). The result is 1: 1. Before lactoferrin intervention, there was no significant difference in body weight in each group (P0.05). After ovariectomy, the body weight of each group increased, especially in Con group. After 6 months of lactoferrin intervention, the body weight of each group increased significantly. The increase of Con group was the most, and the difference was statistically significant (P0.05), Con group rats were significantly heavier than Sham group and E2 group (P0.05), BSA group and different doses of lactoferrin treatment group) rats were lower than Con group. However, there was no statistical significance (P0.05). 2. After 6 months of treatment, the pathological sections of HE staining of bone tissue were observed under microscope. The bone trabeculae of Sham group and E2 group were denser than those of Con group and BSA group, LF1-3 (0.1g/kg dU 1 g / kg / kg d). The trabecular density of 2g/kg d was also more compact than that of Con group, but it was less significant than that of Sham group and E2 group. The degree of trabecular density in LF1-3 group was not significantly different from that in Con group. The ratio of trabecular area to medullary cavity in Sham group and E2 group was significantly higher than that in Con group, BSA group and LF1-3 group (P0.01), Sham and E2 group, BSA group and Con group). There was no significant difference between LF1-3 groups (P0.05). After 6 months of treatment, the expression of IGF-I m RNA in Con group was significantly lower than that in Sham group and E2 group (P0.01), and also lower than that in LF1-3 group (1 g / kg 0.1g/kg dai 2g / kg d). The expression of IGFBP-3 m RNA in the P0.01). Con group was significantly lower than that in the Sham group and E2 group (P0.01), but higher than that in the LF1-3 (0.1g/kg 1 g / kg / kg d ~ (2) g / kg) group. The expression of IGFBP-5 m RNA in P0.01). Con group was significantly lower than that in Sham group and E2 group (P0.01), and was also lower than that in LF2-3 (2 g / kg 1g/kg d) group. The difference was statistically significant (P0.05 and P0.01). Conclusion: 1. Successful establishment of osteoporosis model in ovariectomized rats. 2. Lactoferrin can increase bone mass and reduce bone loss induced by ovariectomy in ovariectomized rats, which may play a potential role in the treatment of osteoporosis. The improvement of osteoporosis by lactoferrin may promote bone formation and inhibit bone resorption by increasing the levels of IGF-I and IGFBP-5 and inhibiting the level of IGFBP-3.
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R580

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本文編號(hào)：2337230