【摘要】：第一部分：乙酰輔酶A羧化酶B基因rs2268388多態(tài)性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)條件研究目的：建立一種快速、準(zhǔn)確、特異的定量檢測(cè)ACACB基因rs2268388多態(tài)性的方法。方法：針對(duì)ACACB基因序列設(shè)計(jì)引物和Taqman探針,探索實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)ACACB基因rs2268388多態(tài)性的最佳條件,設(shè)立不同濃度,并檢測(cè)其靈敏度和特異性。結(jié)果：PCR反應(yīng)預(yù)變性時(shí)間為10min,退火、延伸時(shí)間為1min時(shí)擴(kuò)增產(chǎn)物效果理想。Taqman實(shí)時(shí)熒光定量PCR探針及引物濃度0.5ul (0.2uM), TaqMan Genotyping Master Mix 5ul, dH2O 2.5ul總體系為10ul時(shí)擴(kuò)增產(chǎn)物效果理想并節(jié)約了實(shí)驗(yàn)費(fèi)用。檢測(cè)特異性良好。結(jié)論：優(yōu)化Taqman探針法的實(shí)驗(yàn)條件能夠靈敏、特異、穩(wěn)定地對(duì)ACACB基因rs2268388多態(tài)性進(jìn)行定量檢測(cè),并有效節(jié)約了實(shí)驗(yàn)成本。第二部分：乙酰輔酶A羧化酶B基因多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性研究目的：探討乙酰輔酶A羧化酶B (ACACB)基因rs2268388及rs2268393多態(tài)性與中國(guó)昆明地區(qū)漢族人群2型糖尿病(T2DM)的相關(guān)性。方法：分別運(yùn)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)及Taqman探針技術(shù),在昆明地區(qū)漢族人群中對(duì)184例2型糖尿病(T2DM)患者和70例健康對(duì)照組(NC)的ACACB基因rs2268388及rs2268393多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè),并比較分析各組間基因型、等位基因頻率、相關(guān)臨床和生化指標(biāo)。結(jié)果：(1)T2DM組和NC組ACACB基因rs2268393各基因型和等位基因頻率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x2=4.810,p=0.09, x2=1.29,p=0.24); (2) T2DM組ACACB基因rs2268388 C/C基因型和C等位基因頻率高于NC組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=10.469,p=0.005,χ2=4.71,p=0.007)；(3)二分類Logistic回歸分析表明：ACACB基因rs2268388 C/C基因型及高甘油三酯(TG)是T2DM發(fā)生的危險(xiǎn)因素。結(jié)論：在昆明地區(qū)漢族人群中,ACACB基因rs2268388 C/C基因型可能與T2DM發(fā)生相關(guān)。第三部分：乙酰輔酶A羧化酶B基因多態(tài)性與糖尿病腎臟疾病的相關(guān)性研究目的：探討乙酰輔酶A羧化酶B(ACACB)基因rs2268388多態(tài)性與我國(guó)昆明地區(qū)漢族人群糖尿病腎臟疾病(DKD)的相關(guān)性。方法：選取T2DM患者248例,根據(jù)兩次UAlb/Cr或24 h UAlb結(jié)果分為DKDo組85例、DKD1組99例及DKD2組64例,另選取健康對(duì)照(NC)組70名。采用Taqman PCR(Three-star)法對(duì)各組ACACB基因rs2268388多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè),并比較分析各組基因型、等位基因頻率、風(fēng)險(xiǎn)因素及相關(guān)臨床和生化指標(biāo)。結(jié)果：(1)DKD各組C/T基因型頻率均低于NC組(Z=2.391,P=0.017)；DKD1組和DKD2組ACACB基因rs2268388T/T基因型頻率高于DKD0組(Z=-2.522,P=0.012；Z=-4.981,P=0.001)；DKD1組和DKD2組T/T基因型頻率及各組等位基因頻率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05).(2)Logistic回歸分析表明,糖尿病病程、rs2268388T/T基因型、高TG、高HbA1c及高尿酸血癥(HUA)是DKD發(fā)生的危險(xiǎn)因素。結(jié)論：在昆明地區(qū)漢族人群中,ACACB基因rs2268388 T/T基因型可能與DKD發(fā)生相關(guān)。
[Abstract]:Part I: experimental conditions for detecting rs2268388 Polymorphism of Acetyl CoA carboxylase B Gene objective: to establish a rapid, accurate and specific method for quantitative detection of ACACB gene rs2268388 polymorphism. Methods: primers and Taqman probes were designed for the sequence of ACACB gene. The optimal conditions for detecting rs2268388 polymorphism of ACACB gene by real-time fluorescence quantitative PCR were explored. Different concentrations were set up and their sensitivity and specificity were detected. Results: the pre-denaturation time of PCR reaction was 10 min, the annealing time and the extension time were 1min. The Taqman real-time fluorescence quantitative PCR probe and 0.5ul (0.2uM), TaqMan Genotyping Master Mix 5 ull) concentration were obtained. When the total dH2O 2.5ul system was 10ul, the effect of amplification product was ideal and the cost of experiment was saved. The specificity of detection was good. Conclusion: the optimized Taqman probe method can be used to detect the rs2268388 polymorphism of ACACB gene in a sensitive, specific and stable manner, and the cost of the experiment can be effectively saved. Part II: Association between acetyl coA carboxylase B gene polymorphism and type 2 diabetes objective: to explore the relationship between rs2268388 and rs2268393 polymorphism of acetyl coA carboxylase B (ACACB) gene and type 2 glucose in Han nationality population in Kunming, China. Correlation of urinary disease (T2DM). Methods: polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) and Taqman probe technique were used, respectively. The polymorphisms of ACACB gene rs2268388 and rs2268393 were detected in 184 patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) and 70 healthy controls in Kunming Han population, and the genotypes and allelic frequencies were compared and analyzed. Related clinical and biochemical indicators. Results: (1) there was no significant difference in the frequency of rs2268393 genotypes and alleles of ACACB gene between T2DM group and NC group (x24.810p0.09, x2o1.29hp 0.24). (2) the frequency of rs2268388 C / C genotype and C allele of ACACB gene in T2DM group was significantly higher than that in NC group (蠂 2 + 10.469% P 0.005, 蠂 2 + 4.71% P 0.007). (3) Two-classification Logistic regression analysis showed that ACACB gene rs2268388 C / C genotype and high triglyceride (TG) were risk factors of T2DM. Conclusion: rs2268388 C / C genotype of ACACB gene may be associated with T2DM in Kunming Han population. Part three: Association between acetyl CoA carboxylase B gene polymorphism and diabetic kidney disease objective: to explore the relationship between rs2268388 polymorphism of acetyl coA carboxylase B (ACACB) gene and diabetes mellitus in Han nationality in Kunming, China. Correlation of (DKD) in renal disease. Methods: 248 patients with T2DM were divided into DKDo group (n = 85), DKD1 group (n = 99) and DKD2 group (n = 64) according to the results of twice UAlb/Cr or 24 h UAlb. The rs2268388 polymorphism of ACACB gene in each group was detected by Taqman PCR (Three-star method, and the genotype, allele frequency, risk factors and related clinical and biochemical indexes were compared and analyzed. Results: (1) the frequency of C / T genotype in DKD group was lower than that in NC group (Z 2.391P0. 017), and the rs2268388T/T genotype frequency of ACACB gene in DKD1 group and DKD2 group was higher than that in DKD0 group. There was no significant difference in T / T genotype frequency and allele frequency between DKD1 group and DKD2 group (P0.05). (2) Logistic regression analysis showed that the course of diabetes, rs2268388T/T genotype and high TG, were significant. High HbA1c and hyperuricemia (HUA) are risk factors of DKD. Conclusion: rs2268388 T / T genotype of ACACB gene may be associated with DKD in Kunming Han population.
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R587.1

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1 曹建成;腎臟疾病抗心磷脂抗體檢測(cè)及其臨床意義[J];寧波醫(yī)學(xué);2000年04期

2 李淑葵;腎臟疾病的實(shí)驗(yàn)室檢查(一)[J];中國(guó)臨床醫(yī)生;2000年02期

3 李秋榮,周建萍,郜青,趙黎明,龐保柱,張玉潔;腎臟疾病的食物交換份[J];現(xiàn)代康復(fù);2001年15期

4 胡亦新;血管緊張素受體拮抗劑與血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑、制劑在腎臟疾病治療中的異同[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊(cè));2002年11期

5 吳玉梅;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在腎臟疾病中的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).泌尿系統(tǒng)分冊(cè);2002年03期

6 殷培;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在腎臟疾病中的表達(dá)及意義[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).泌尿系統(tǒng)分冊(cè);2002年06期

7 孫艷,胡望平;尿γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶在炎癥或非炎癥性腎臟疾病中的應(yīng)用價(jià)值[J];現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2003年06期

8 丁潔;基因檢測(cè)在遺傳性腎臟疾病診治和研究中的作用[J];中華腎臟病雜志;2005年11期

9 鄭君芙;邢淑麗;宋瑞芬;韓華英;;降鈣素基因相關(guān)肽與腎臟疾病[J];遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2006年03期

10 馬紅;;腎臟疾病的自我調(diào)理與防治[J];中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(綜合版);2007年19期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫曉麗;高嵩;;全段甲狀旁腺激素測(cè)定在腎臟疾病中的應(yīng)用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

2 柯昌興;王劍松;王家平;李迎春;袁曙光;閆東;童玉云;朱全勝;;選擇性動(dòng)脈造影栓塞術(shù)在腎臟疾病中的臨床應(yīng)用[A];第十六屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

3 邢娜;;非濃縮尿蛋白電泳在腎臟疾病中的應(yīng)用[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

4 劉章鎖;;進(jìn)展性腎臟疾病中趨化因子的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)專題講座[C];2006年

5 陳楠;;遺傳性腎臟疾病的篩查[A];2008年浙江省腎臟病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

6 劉志紅;;腎臟疾病的分子診斷[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

7 邢昌贏;;炎癥因子在腎臟疾病中的意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2010學(xué)術(shù)年會(huì)專題講座匯編[C];2010年

8 查艷;;糖皮質(zhì)激素治療腎臟疾病專家共識(shí)的解讀[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)腎病專業(yè)委員會(huì)成立暨中西醫(yī)結(jié)合診治腎臟病學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2011年

9 王偉銘;陳楠;王朝暉;張文;任紅;陳曉農(nóng);徐耀文;;腎臟疾病中的脂質(zhì)異常及其危險(xiǎn)因素分析[A];“中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2004年年會(huì)”暨“第二屆全國(guó)中青年腎臟病學(xué)術(shù)會(huì)議”論文匯編[C];2004年

10 江黎明;陳孝文;;白細(xì)胞介素—13與腎臟疾病[A];第六屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2000年

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1 郝長(zhǎng)生 施濤;核心區(qū)域市場(chǎng)固定 熱點(diǎn)投放月度集中[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

2 ;中老年人謹(jǐn)防腎臟疾病[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

3 衛(wèi)生部中日友好醫(yī)院腎病中心主任醫(yī)師 李文歌;中老年人要重視腎臟疾病的防治[N];中國(guó)老年報(bào);2009年

4 孫國(guó)根;我國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)腎臟疾病治療新靶點(diǎn)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

5 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 尹愛萍　(主任醫(yī)師);腎臟疾病的信號(hào)[N];家庭醫(yī)生報(bào);2009年

6 張群 吳倪娜 蔣廷玉;專家為預(yù)防腎臟疾病支招[N];新華日?qǐng)?bào);2006年

7 吳一福;我國(guó)腎臟疾病發(fā)病呈低齡化趨勢(shì)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

8 邱英;尿起泡沫警惕腎臟疾病[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2008年

9 吳紅梅;追擊腎臟病致病元兇[N];新華日?qǐng)?bào);2011年

10 尹愛平;腎臟疾病的信號(hào)[N];健康報(bào);2002年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王冬燕;建國(guó)以來中西醫(yī)結(jié)合治療腎臟病研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊慧;補(bǔ)腎溫陽化瘀法治療早期2型糖尿病腎臟疾病及對(duì)CD68、MCP-1mRNA表達(dá)的影響[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 董自強(qiáng);25（OH）D水平與腎臟疾病的相關(guān)性研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

3 唐俊婷;乙酰輔酶A羧化酶B基因多態(tài)性與2型糖尿病及糖尿病腎臟疾病的相關(guān)性研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

4 張芝平;原發(fā)性腎病綜合征與糖尿病腎臟疾病血脂異常特點(diǎn)的分析[D];吉林大學(xué);2011年

5 李佳;遼寧中醫(yī)腎內(nèi)科從肺防治腎臟疾病經(jīng)驗(yàn)總結(jié)[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2011年

6 杜罕;一氧化氮對(duì)梗阻性腎臟疾病非血流動(dòng)力學(xué)保護(hù)作用機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2008年

7 施素華;中國(guó)36379例腎小球疾病病理分型及流行病學(xué)分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

8 王進(jìn)雪;HIF-1α、CTGF在腎臟疾病中表達(dá)關(guān)系的研究[D];青島大學(xué);2007年

9 馬麗;中西醫(yī)結(jié)合治療糖尿病腎臟疾病的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2008年

10 郭呈林;蓯歸益腎膠囊對(duì)2型糖尿病腎臟疾病大鼠OPN、TGF-β1的影響及對(duì)2型糖尿病早期腎臟疾病患者臨床療效的觀察[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：2331111