本文關(guān)鍵詞：hsa-miR-143在人脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中的表達(dá)變化及調(diào)控因素分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】豬鏈球菌2型(Streptocuccussuis2,S.suis2)是一種非常重要的豬病原菌,可以引發(fā)豬的關(guān)節(jié)炎,心內(nèi)膜炎,腦膜炎,肺炎和敗血癥,同時(shí)也可以引發(fā)人的致死性感染。近些年中國(guó)爆發(fā)的兩次大規(guī)模S.suis2感染均引起人的中毒休克綜合癥,伴隨有急性高熱,多器官衰竭,病程短,致死率高的特點(diǎn)。這引發(fā)世界公共衛(wèi)生的極大關(guān)注。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外針對(duì)S.suis2開(kāi)展了大量研究工作,然而對(duì)其迅速增強(qiáng)毒力的潛在機(jī)制知之甚少。雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)(two-componentsignaltransductionsystems,TCSTS)廣泛存在于細(xì)菌中,該系統(tǒng)通過(guò)感受外界刺激來(lái)影響特定基因或操縱子的轉(zhuǎn)錄并調(diào)節(jié)細(xì)胞的變化,從而在調(diào)節(jié)細(xì)胞周期,發(fā)育途徑,致病性等重要過(guò)程當(dāng)中發(fā)揮的龐大的功能。關(guān)于雙組分NisK/NisR,有報(bào)道認(rèn)為它在乳酸乳球菌中調(diào)控乳鏈球菌素Z的合成；關(guān)于雙組分BceR/BceS,它被證明在枯草芽胞桿菌參與形成四組分系統(tǒng)BceRS-BceAB,可以感知環(huán)境中抗菌肽并通過(guò)ABC運(yùn)輸?shù)鞍讓⑵鋸淖饔梦稽c(diǎn)移走,從而提高細(xì)胞抵抗能力。然而這兩對(duì)TCSTS在鏈球菌中的功能尚不清楚。NisK/NisR位于89K毒力島上,該島上另一對(duì)TCSTSSalK/SalR已報(bào)道是S.suis2高致病性的一個(gè)至關(guān)重要的因子。事實(shí)上很多雙組分比如CiaRH,Ihk/Irr,VirR/VirS,RevSandCovR都已報(bào)道和S.suis2的致病性有關(guān)。因此,本課題以NisK/NisR和BceR/BceS為研究對(duì)象,探討了這兩對(duì)雙組分對(duì)S.suis2毒力的影響,同時(shí)初步研究了兩對(duì)系統(tǒng)可能調(diào)控的一些基因。主要研究?jī)?nèi)容：1.S.suis2雙組分系統(tǒng)NisKR和BceRS基因缺失突變株的構(gòu)建和鑒定依據(jù)豬鏈球菌二型05ZYH33全基因組序列設(shè)計(jì)引物。以SC19基因組為模板,溫敏自殺性質(zhì)粒pSET4s為穿梭載體,利用同源重組原理成功獲得二次交換基因缺失突變株AnisKR和AbceRS,并通過(guò)PCR和Southernblot驗(yàn)證。2.S.suis2雙組分系統(tǒng)NisKR和BceRS基因缺失突變株的生物學(xué)特性研究我們研究了突變株的生長(zhǎng)特性和溶血活性,結(jié)果表明：野生株SC19相比,突變株在10%新生牛血清里的生長(zhǎng)曲線無(wú)顯著差異,但是溶血效價(jià)要降低2倍以上。我們進(jìn)一步以小鼠和細(xì)胞為模型對(duì)基因缺失突變株AnisKR和AbceRS的毒力進(jìn)行評(píng)價(jià)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：AnisKR和AbceRS對(duì)Hela細(xì)胞的粘附能力顯著降低(分別下降85.4%和53.05%),對(duì)該細(xì)胞的侵入能力也顯著下降(分別下降90.9%和76.77%)；抵抗中性粒細(xì)胞(PMN)介導(dǎo)的殺菌作用的能力顯著下降；更容易被小鼠肺泡巨噬細(xì)胞(RAW264.7)吞噬同時(shí)也更容易被該細(xì)胞殺死。BALB/c小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：以8×108CFU劑量的野生株和突變株分別腹腔注射1ml后觀察到突變株組的臨床癥狀較輕,死亡率顯著低于野生株組；以5×107CFU劑量的野生株和突變株分別感染小鼠后,統(tǒng)計(jì)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血,心,肺,腦組織中的載菌量,發(fā)現(xiàn)突變株的含量顯著低于野生株。這表明NisK/NisR和BceR/BceS在S.suis2致病過(guò)程中有著重要的地位。3.S.suis2雙組分系統(tǒng)NisK/NisR和BceR/BceS調(diào)控機(jī)制的初步研究本研究提取各菌株RNA,通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-seq)比較分析野生株和突變株的差異表達(dá)基因。結(jié)果顯示：AnisKR中有22個(gè)基因下調(diào)2倍以上,7個(gè)基因上調(diào)2倍以上；AbceRS中有4個(gè)基因下調(diào)2倍以上,15個(gè)基因上調(diào)2倍以上。同時(shí)本研究成功的可溶性表達(dá)純化了兩個(gè)雙組分的反應(yīng)調(diào)控蛋白NisR和BceR,并首次嘗試在S.suis2中建立DAP-seq(DNAAffinityPurificationSequencing)技術(shù)來(lái)尋找調(diào)控蛋白的結(jié)合位點(diǎn),以便深入研究其調(diào)控機(jī)制。
【作者】徐娟；
【導(dǎo)師】陳煥春；譚臣；
【作者基本信息】華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，預(yù)防獸醫(yī)學(xué)，2014，，碩士
【關(guān)鍵詞】豬鏈球菌2型；雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)；毒力；調(diào)控機(jī)制；

【參考文獻(xiàn)】
[1]王青青.玉米秸稈揉絲微貯飼料的制作及飼用效果研究[D].河南科技大學(xué),養(yǎng)殖（專業(yè)學(xué)位）,2013,碩士.
[2]王剛.基于支持向量機(jī)的滾動(dòng)軸承故障智能診斷研究[D].沈陽(yáng)工業(yè)大學(xué),機(jī)械工程,2013,碩士.
[3]謝嬌.唐代婚姻成立的禁止條件[D].青海師范大學(xué),中國(guó)古代史,2012,碩士.
[4]陳凌育,孫復(fù)川.辨識(shí)閱讀眼動(dòng)注視點(diǎn)參數(shù)的級(jí)聯(lián)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)[J].自動(dòng)化學(xué)報(bào),1997,04:59-65.
[5]耿盈晴.學(xué)齡初期兒童所應(yīng)掌握的諸多音樂(lè)能力及其訓(xùn)練[D].西安音樂(lè)學(xué)院,視唱練耳,2014,碩士.
[6]虞志龍.數(shù)據(jù)挖掘在醫(yī)院藥品采購(gòu)系統(tǒng)中的應(yīng)用[J].商場(chǎng)現(xiàn)代化,2005,26:106-107.
[7]韋英益.豬瘟病毒SM株單克隆抗體的制備、初步鑒定及應(yīng)用研究[D].廣西大學(xué),預(yù)防獸醫(yī)學(xué),2004,碩士.
[8]張秀.《劍橋國(guó)際英語(yǔ)教程》與《交際英語(yǔ)教程》中任務(wù)的對(duì)比研究[D].廣東外語(yǔ)外貿(mào)大學(xué),外語(yǔ)教學(xué)技術(shù)與評(píng)估,2013,碩士.
[9]邱曉初.彩色鋁板涂層機(jī)列增加清洗工作模式的實(shí)現(xiàn)[J].冶金自動(dòng)化,2007,02:41-44.
[10]李思佳.木聚糖酶1YNA及其突變體在畢赤酵母中的表達(dá)和酶特性鑒定[D].中南民族大學(xué),生物化學(xué)與分子生物學(xué),2013,碩士.
[11]徐曉君.基于ESDA的湘西自治州城鎮(zhèn)化空間格局研究[D].湖南師范大學(xué),人文地理,2013,碩士.
[12]黃華學(xué).組合式同相供電繼電保護(hù)方案研究[J].電氣化鐵道,2014,05:17-20.
[13]韋桂鋒.基于FPGA嵌入式實(shí)時(shí)目標(biāo)跟蹤系統(tǒng)設(shè)計(jì)[D].西安電子科技大學(xué),物理電子學(xué),2012,碩士.
[14]于會(huì)利.我國(guó)社會(huì)主義意識(shí)形態(tài)影響力研究[D].河北師范大學(xué),思想政治教育,2012,碩士.
[15]劉曉園.食品包裝設(shè)計(jì)中的色彩逆向思維研究[D].廣西藝術(shù)學(xué)院,設(shè)計(jì)藝術(shù)學(xué),2014,碩士.
[16]雷蕓,江瑩,錢坤,何靜,陳禹成.石墨烯/TiO_2復(fù)合材料的制備及其光催化性能的研究[J].硅酸鹽通報(bào),2012,02:243-246.
[17]馬春萍.六個(gè)圖的圖設(shè)計(jì)[D].河北師范大學(xué),基礎(chǔ)數(shù)學(xué),2004,碩士.
[18]董寧.股骨頭骨壞死合并髖關(guān)節(jié)感染的診斷和治療[D].吉林大學(xué),外科學(xué),2013,碩士.
[19]張軍.顱腦損傷后大鼠垂體遠(yuǎn)側(cè)部ACTH細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞SDH和3β-HSD的變化[D].山西醫(yī)科大學(xué),病理學(xué),2003,碩士.
[20]廖劍嵐.數(shù)據(jù)倉(cāng)庫(kù)環(huán)境下的信息分析[J].情報(bào)雜志,2003,12:93-94.
[21]顧平燦.電磁振動(dòng)給料器的建模與參數(shù)選擇[D].浙江海洋學(xué)院,農(nóng)業(yè)推廣（專業(yè)學(xué)位）,2013,碩士.
[22]董衛(wèi)華.越南、朝鮮、老撾、古巴執(zhí)政黨的社會(huì)管理理念比較[D].中南大學(xué),馬克思主義基本原理,2013,博士.
[23]馬祥慶,劉愛(ài)琴,何智英.杉木幼林生態(tài)系統(tǒng)凋落物及其分解作用研究[J].植物生態(tài)學(xué)報(bào),1997,06:77-83.
[24]鄭榮生.關(guān)于上海軌道交通多線運(yùn)營(yíng)的思考[J].城市軌道交通研究.2002(03)
[25]朱玲玲.hsa-miR-143在人脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中的表達(dá)變化及調(diào)控因素分析[D].南京醫(yī)科大學(xué),內(nèi)科學(xué),2013,碩士.
[26]黃銘石.利瑪竇中文著譯中的術(shù)語(yǔ)及專名研究[D].四川外國(guó)語(yǔ)大學(xué),漢語(yǔ)言文字學(xué),2013,碩士.
[27]于越.移動(dòng)警務(wù)實(shí)有人口信息采集中數(shù)據(jù)庫(kù)管理系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)[D].吉林大學(xué),軟件工程,2012,碩士.
[28]王罡琦.硝基化油酸（OA-NO2）調(diào)節(jié)脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)的表達(dá)及分子機(jī)制研究[D].吉林大學(xué),生物化學(xué)與分子生物學(xué),2014,碩士.
[29]馮紅海.基于網(wǎng)絡(luò)的虛擬咨詢系統(tǒng)[D].武漢理工大學(xué),控制理論與控制工程,2004,碩士.
[30]劉果.區(qū)域可持續(xù)發(fā)展指標(biāo)體系研究[D].重慶大學(xué),建筑與土木工程（專業(yè)學(xué)位）,2014,碩士.
[31]劉茂福,曹加恒,彭敏,葉可,林芝.多媒體文本數(shù)據(jù)的模式挖掘方法[J].武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版),2001,03:321-323.
[32]牙啟康.南方紅豆杉各部位中紫杉醇的含量測(cè)定和其果蒂氯仿萃取部分的成分研究[D].廣西師范大學(xué),有機(jī)化學(xué),2003,碩士.
[33]劉磊.20世紀(jì)80年代以來(lái)法國(guó)華人文學(xué)的發(fā)展[D].四川外國(guó)語(yǔ)大學(xué),法語(yǔ)語(yǔ)言文學(xué),2014,碩士.
[34]邱萍.二語(yǔ)習(xí)得者道歉言語(yǔ)行為研究[D].華中師范大學(xué),英語(yǔ)語(yǔ)言文學(xué),2013,碩士.
[35]劉曰芳.談電腦在工業(yè)上的應(yīng)用前景[J].科學(xué)·經(jīng)濟(jì)·社會(huì).1984(01)
[36]呂永杰.半導(dǎo)體激光器溫濕度監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的研究[D].華中科技大學(xué),光電信息工程,2013,碩士.
[37]梁春燕,李旻智,謝劍英.抑制柔性機(jī)械臂殘留振蕩的時(shí)滯濾波器設(shè)計(jì)[J].控制與決策,2001,06:943-946.
[38]于峰.京劇現(xiàn)代戲《杜鵑山》藝術(shù)研究[D].天津音樂(lè)學(xué)院,音樂(lè)學(xué),2014,碩士.
[39]林俐,朱晨宸,鄭太一,焦邵華.風(fēng)電集群有功功率控制及其策略[J].電力系統(tǒng)自動(dòng)化,2014,14:9-16.
[40]石峰.動(dòng)荷載條件下凍土融化固結(jié)與變形研究[D].北京交通大學(xué),道路與鐵道工程,2014,博士.
[41]衣春雷.熔模鑄造薄壁鑄件工藝優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)及數(shù)值模擬研究[D].青島理工大學(xué),機(jī)械制造及其自動(dòng)化,2012,碩士.
[42]王冬梅.白城市初中實(shí)施體育中考的現(xiàn)狀調(diào)查及對(duì)策研究[D].東北師范大學(xué),體育（專業(yè)學(xué)位）,2012,碩士.
[43]劉博.全尺寸絕緣子恒壓覆冰閃絡(luò)特性及其機(jī)理初步研究[D].中國(guó)電力科學(xué)研究院,高電壓與絕緣技術(shù),2012,碩士.
[44]王丹純.海峽兩岸中級(jí)對(duì)外漢語(yǔ)教材對(duì)比研究[D].華中師范大學(xué),漢語(yǔ)國(guó)際教育,2014,碩士.
[45]王海云.江蘇弘業(yè)的出口營(yíng)銷策略優(yōu)化研究[D].南京理工大學(xué),工商管理,2012,碩士.
[46]譚忠盛,喻渝,王明年,楊建民.大斷面淺埋黃土隧道錨桿作用效果的試驗(yàn)研究[J].巖土力學(xué),2008,02:491-495+506.
[47]蔣式勤,石振榮,胡國(guó)四,王建橋,谷秋菊.合金稱重系統(tǒng)的多任務(wù)數(shù)據(jù)通信及管理[J].冶金自動(dòng)化,1998,03:20-23.
[48]馮惠珍.從中醫(yī)體質(zhì)與相關(guān)因素探索神經(jīng)性皮炎的難愈性[D].廣州中醫(yī)藥大學(xué),中醫(yī)學(xué)（專業(yè)學(xué)位）,2013,碩士.
[49]劉靜.聲音商標(biāo)法律問(wèn)題研究[D].海南大學(xué),民商法學(xué),2014,碩士.
[50]鄭志琴.基于D-InSAR技術(shù)的礦區(qū)地表沉陷監(jiān)測(cè)及其數(shù)據(jù)處理研究[D].西安科技大學(xué),大地測(cè)量學(xué)與測(cè)量工程,2014,碩士.

  本文關(guān)鍵詞：hsa-miR-143在人脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中的表達(dá)變化及調(diào)控因素分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。