【摘要】：目的為探討PRDM16、CIDE-B在成人脂肪組織中的表達(dá)水平及與肥胖的關(guān)系,本研究通過檢測PRDM16、CIDE-B蛋白分別在正常體重者和超重肥胖者的皮下脂肪和腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織中的表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)PRDM16、CIDE-B蛋白相對表達(dá)水平與超重肥胖的關(guān)系;同時(shí)檢驗(yàn)PRDM16、CIDE-B基因啟動(dòng)子甲基化水平與二者蛋白相對表達(dá)量的關(guān)系,探討PRDM16、CIDE-B基因甲基化與蛋白表達(dá)的關(guān)系。方法選取醫(yī)院的腹部手術(shù)患者126例,男性25例,女性101例,排除孕婦、殘障或精神障礙者、繼發(fā)性肥胖者、惡性腫瘤患者及乙肝、艾滋病、結(jié)核等傳染性疾病患者。收集各研究對象的身高、體重、年齡、血糖值等生理生化指標(biāo)。采用我國肥胖診斷標(biāo)準(zhǔn),將研究對象分為正常體重組(18.5kg/m2BMI24kg/m2)和超重肥胖組(BMI≥24kg/m2)。首先分別提取皮下脂肪和大網(wǎng)膜脂肪組織的總蛋白,然后采用蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù),其中PRDM16目的蛋白電泳采用8%分離膠,5%濃縮膠,CIDE-B蛋白電泳采用12%分離膠,5%分離膠,電泳過后轉(zhuǎn)膜2小時(shí),恒壓設(shè)為80V,最后進(jìn)行一抗二抗免疫反應(yīng),將配置混合好的ECL超敏發(fā)光液在凝膠成像系統(tǒng)中與免疫反應(yīng)后的PVDF膜接觸進(jìn)行發(fā)光反應(yīng),將所得條帶圖進(jìn)行拍照保存。采用Gel pro Analyzer軟件分析目的條帶的灰度值,每一個(gè)樣本的目的蛋白相對表達(dá)量以目的條帶的灰度值和相應(yīng)樣本GAPDH的條帶灰度值的比值表示。采用IBM SPSS Statistics 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,兩組差異比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或Mann-Whitney U檢驗(yàn),三組差異比較采用方方差分析或Kruskal-Wallis檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn);各生理生化因素對蛋白相對表達(dá)量的影響程度分析采用多重線性回歸;皮下和大網(wǎng)膜脂肪組織目的蛋白的表達(dá)量差異采用配對t檢驗(yàn)或Wilcoxon符號秩和檢驗(yàn);檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果1.配對樣本t檢驗(yàn)結(jié)果顯示,PRDM16蛋白在皮下脂肪組織中的相對表達(dá)量高于腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織,差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.001,P=0.319);CIDE-B蛋白在皮下脂肪組織中的相對表達(dá)量高于腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.340,P=0.021)。2.皮下脂肪組織的PRDM16蛋白的相對表達(dá)量在正常組和超重肥胖組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.587,P=0.011),且正常組的相對表達(dá)量高于超重肥胖組。大網(wǎng)膜脂肪組織的PRDM16基因的相對表達(dá)量在正常體重組和超重肥胖組之間的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.671,P=0.097)。3.皮下脂肪組織的CIDE-B基因的相對表達(dá)量在正常體重組和超重肥胖組的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.558,P=0.122)。大網(wǎng)膜脂肪組織的CIDE-B基因的相對表達(dá)量在正常體重組和超重肥胖組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.253,P=0.026),且超重肥胖組的CIDE-B的相對表達(dá)量高于正常體重組。4.皮下脂肪組織中,收縮壓140mm Hg的CIDE-B基因的蛋白相對表達(dá)量小于收縮壓≥140mm Hg的CIDE-B的蛋白相對表達(dá)量,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.319,P=0.025);大網(wǎng)膜脂肪組織中,舒張壓90mm Hg的CIDE-B基因的蛋白相對表達(dá)量小于舒張壓≥90mm Hg的CIDE-B的蛋白相對表達(dá)量,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.290,P=0.024)。三組總膽固醇水平的CIDE-B蛋白相對表達(dá)量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.160,P=0.028),進(jìn)一步多重比較結(jié)果顯示,3.0TC5.2mmol/L的CIDE-B蛋白表達(dá)低于TC≥5.2mmol/L的蛋白表達(dá),且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.026)。5.各生理生化指標(biāo)與蛋白相對表達(dá)量的多重線性回歸分析結(jié)果顯示,BMI與皮下PRDM16蛋白相對表達(dá)量有關(guān)(β=-0.282,P=0.004),BMI水平低者的PRDM16蛋白表達(dá)量高于BMI水平高者。BMI與皮下CIDE-B蛋白相對表達(dá)量有關(guān)(β=0.213,P=0.025),BMI水平高者的CIDE-B蛋白表達(dá)量高于BMI水平低者。6.皮下脂肪組織PRDM16蛋白相對表達(dá)量與大網(wǎng)膜PRDM16蛋白相對表達(dá)量呈顯著的正相關(guān)(r=0.482,P0.001),皮下脂肪組織CIDE-B蛋白相對表達(dá)量與大網(wǎng)膜CIDE-B相對表達(dá)量呈顯著正相關(guān)(r=0.363,P0.001)。而PRDM16與CIDE-B的蛋白相對表達(dá)量不存在線性相關(guān)(P0.05)。7.皮下脂肪組織中,PRDM16基因的CPG_28位點(diǎn)的甲基化水平與蛋白相對表達(dá)量的關(guān)系存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(β=-3.762,P=0.032),腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織中,PRDM16基因的CPG_28(β=-4.726,P=0.002)位點(diǎn)的甲基化水平與蛋白相對表達(dá)量的關(guān)系存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。甲基化水平高的蛋白表達(dá)水平較低。結(jié)論P(yáng)RDM16、CIDE-B蛋白表達(dá)與成人肥胖存在一定的相關(guān)性,皮下脂肪組織中,正常體重者的PRDM16蛋白相對表達(dá)量高于超重肥胖者;大網(wǎng)膜脂肪組織中,正常體重者的CIDE-B蛋白相對表達(dá)量低于超重肥胖者;CIDE-B蛋白相對表達(dá)量與收縮壓、舒張壓、TC水平可能存在聯(lián)系;此外,PRDM16基因啟動(dòng)子CPG_28位點(diǎn)的甲基化水平越高,蛋白表達(dá)水平越低。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R589.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2298125