【摘要】：血吸蟲病是一種人獸共患寄生蟲病,其主要病理機(jī)制蟲卵到達(dá)宿主肝臟組織引發(fā)的局部慢性炎癥反應(yīng)以及慢性感染造成的組織損傷過度修復(fù),進(jìn)而發(fā)展成肝纖維化。一直以來,人們認(rèn)為血吸蟲對(duì)人體是有害無益的,但相關(guān)研究顯示,血吸蟲除對(duì)機(jī)體造成一定損傷外,也能降低一些自身免疫性疾病和代謝性疾病的發(fā)病率。慢性炎癥反應(yīng)與肥胖等因素引起的胰島素抵抗和2型糖尿病等代謝性疾病的發(fā)生和發(fā)展聯(lián)系緊密。有研究顯示,曼氏血吸蟲感染或注射其蟲卵抗原均可通過誘導(dǎo)2型免疫反應(yīng)來改善宿主脂肪組織及肝臟中的胰島素敏感性。日本血吸蟲和曼氏血吸蟲在發(fā)病機(jī)制、感染過程、所致的病理變化等方面具有許多相似點(diǎn)。因此,我們推測(cè)日本血吸蟲感染亦可改善2型糖尿病患者全身及局部的胰島素敏感性。本研究以BALB/c小鼠、C57BL/6小鼠和Lepr~(db/db)小鼠為研究對(duì)象,建立日本血吸蟲感染模型,初步探索血吸蟲感染對(duì)宿主全身及肝臟胰島素敏感性的改善作用。本研究技術(shù)路線如下:以40條日本血吸蟲尾蚴感染小鼠來建立感染模型。本研究共設(shè)計(jì)6個(gè)實(shí)驗(yàn)組,即BALB/c小鼠對(duì)照組(BALB/c-con)、BALB/c小鼠感染組(BALB/c-inf)、C57BL/6小鼠對(duì)照組(C57BL/6-con)、C57BL/6小鼠感染組(C57BL/6-inf)以及Lepr~(db/db)小鼠對(duì)照組(Lepr~(db/db)-con)、Lepr~(db/db)小鼠感染組(Lepr~(db/db)-inf)。我們采用如下實(shí)驗(yàn)方法對(duì)葡萄糖耐量、胰島素敏感性、外周血胰島素濃度、炎性細(xì)胞因子及相關(guān)的miRNAs等指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè),包括GTT檢測(cè)葡萄糖耐量情況、ITT檢測(cè)胰島素敏感性、自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)高密度脂蛋白(HDL-L)、低密度脂蛋白(LDL-L)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)水平、ELISA檢測(cè)外周血胰島素濃度、HE染色評(píng)價(jià)肝臟炎癥程度、油紅染色判斷肝臟脂肪沉積情況、熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)肝臟炎癥基因及相關(guān)miRNA的表達(dá)水平等,以期初步探索血吸蟲感染對(duì)宿主肝臟胰島素敏感性的改善作用及相關(guān)的機(jī)制。本研究主要結(jié)果如下:1.肝臟miRNA基因芯片結(jié)果顯示:與對(duì)照組小鼠相比,日本血吸蟲感染組小鼠肝臟miR-155、miR-146b、miR-802等多種miRNAs的表達(dá)水平發(fā)生顯著改變。2.RT-PCR檢測(cè)肝臟miR-802及其靶基因Hnf1b結(jié)果顯示:感染日本血吸蟲后,小鼠肝臟miR-802表達(dá)降低,其靶基因Hnf1b表達(dá)量升高。由此推測(cè),日本血吸蟲感染抑制宿主肝臟miR-802表達(dá),可弱化其對(duì)靶基因Hnf1b的抑制作用。3.GTT、ITT結(jié)果顯示:感染日本血吸蟲后,糖尿病小鼠(Lepr~(db/db))的葡萄糖耐量和胰島素敏感性均有顯著改善。4.肝臟油紅染色結(jié)果顯示:Lepr~(db/db)小鼠與正常組小鼠相比,感染組肝臟切片中顯示脂滴的紅染面積與密度明顯減少,提示肝臟中脂肪沉積減少。5.ELISA結(jié)果顯示:日本血吸蟲感染后的Lepr~(db/db)小鼠和C57BL/6小鼠外周血胰島素濃度均低于各自對(duì)照組。6.自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)結(jié)果顯示:與對(duì)照組小鼠相比,感染小鼠血清HDL-L、LDL-L、TC、TG水平顯著下降。7.RT-PCR檢測(cè)miR-802和靶基因結(jié)果顯示:感染6周組后,兩組小鼠肝臟局部的miR-802表達(dá)量低于各自對(duì)照組,其靶基因Hnf1b表達(dá)量升高,在Lepr~(db/db)小鼠中變化更加顯著。8.RT-PCR檢測(cè)肝臟炎性細(xì)胞因子結(jié)果顯示:感染6周組后,兩組小鼠肝臟局部的IL-22、IL-4、TNF-α和IL-6的m RNA水平顯著高于對(duì)照組,在Lepr~(db/db)小鼠中變化更加顯著。9.體外驗(yàn)證IL-22、TNF-α對(duì)肝細(xì)胞miR-802表達(dá)調(diào)控的結(jié)果顯示:TNF-α可使小鼠肝細(xì)胞系miR-802表達(dá)量升高,IL-22可降低肝細(xì)胞miR-802表達(dá)水平。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)日本血吸蟲感染可改善糖尿病鼠的胰島素敏感性,通過負(fù)向調(diào)控肝臟局部miR-802的表達(dá),弱化其對(duì)靶基因Hnf1b的抑制作用,以此改善肝臟局部胰島素敏感性,為2型糖尿病的防治研究提供新的思路。
[Abstract]:Schistosomiasis is a zoonotic parasitic disease. Its main pathological mechanism is the local chronic inflammation caused by eggs reaching the host liver and the excessive repair of tissue damage caused by chronic infection, which leads to liver fibrosis. Chronic inflammation is closely related to the occurrence and development of insulin resistance and metabolic diseases such as type 2 diabetes caused by obesity and other factors. Studies have shown that Schistosoma mansoni infection or injection of egg antigens can reduce the incidence of some autoimmune and metabolic diseases. Insulin sensitivity in adipose tissue and liver can be improved by inducing type 2 immune response. Schistosoma japonicum and Schistosoma mansoni have many similarities in pathogenesis, infection process, pathological changes and so on. Therefore, we speculate that Schistosoma japonicum infection can also improve systemic and local pancreas in type 2 diabetes mellitus. In this study, BALB / C mice, C57BL / 6 mice and Lepr ~ (db / db) mice were used to establish a model of Schistosoma japonicum infection, and to explore the effect of Schistosoma japonicum infection on the insulin sensitivity of the whole body and liver of the host. In this study, six experimental groups were designed, namely BALB/c mice control group (BALB/c-con), BALB/c mice infection group (BALB/c-inf), C57BL/6 mice control group (C57BL/6-con), C57BL/6 mice infection group (C57BL/6-inf) and Lepr ~ (db/db) mice control group (Lepr ~ (db/db) - con, Lepr ~ (db/db) mice infection group (db/db) - inf. Methods Glucose tolerance, insulin sensitivity, peripheral blood insulin concentration, inflammatory cytokines and related microRNAs were measured, including GTT, ITT, high density lipoprotein (HDL-L), low density lipoprotein (LDL-L), triglyceride (TG), total. Cholesterol (TC) level, serum insulin concentration detected by ELISA, liver inflammation evaluated by HE staining, liver fat deposition detected by oil red staining, and liver inflammation gene and related microRNA expression detected by real-time fluorescence quantitative PCR were used to explore the role and phase of schistosomiasis infection in improving insulin sensitivity of host liver. The main results of this study are as follows: 1. Compared with the control mice, the expression levels of multiple microRNAs in the liver of mice infected with Schistosoma japonicum, such as microRNAs-155, microRNAs-146b, microRNAs-802 and so on, were significantly changed. 2. Detection of liver microRNAs-802 and its target gene Hnf1b by RT-PCR showed that: after infection with Schistosoma japonicum, the expression levels of microRNAs in the liver of mice infected with Schistosoma japonicum It was speculated that Schistosoma japonicum infection could inhibit the expression of hepatic microRNA-802 and weaken its inhibitory effect on the target gene Hnf1b. 3. GTT, ITT results showed that the glucose tolerance and insulin sensitivity of diabetic mice (Lepr ~ (db / db)) infected with Schistosoma japonicum were both increased. The results of liver oil red staining showed that the area and density of lipid droplets in liver slices of infected mice were significantly reduced compared with those of normal mice, suggesting a reduction of lipid deposition in liver. 5. The results of ELISA showed that the levels of insulin in peripheral blood of Lepr ~ (db / db) mice and C57BL / 6 mice infected with Schistosoma japonicum were high. The results of automatic biochemical analyzer showed that the levels of HDL-L, LDL-L, TC and TG in serum of infected mice were significantly lower than those of control group. 7. RT-PCR detection of microarray-802 and target gene showed that after 6 weeks of infection, the expression of microarray-802 in liver of infected mice in both groups was lower than that of control group, and the expression of Hnf1b was lower than that of control group. The levels of IL-22, IL-4, TNF-alpha and IL-6 m RNA in the liver of the mice infected with Lepr~ (db/db) were significantly higher than those of the control group after 6 weeks of infection. The changes were more significant in Lepr~ (db/db) mice. 9. In vitro validation of IL-22, TNF-alpha on hepatocyte microRNA802 In conclusion, this study found that Schistosoma japonicum infection can improve insulin sensitivity in diabetic mice, and weaken its inhibition of target gene Hnf1b by negatively regulating the expression of local hepatic microRNAs-802. In order to improve the local insulin sensitivity of the liver, it will provide new ideas for the prevention and treatment of type 2 diabetes.
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R532.21;R587.1

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4 姚小皓,沈凱,李學(xué)軍;胰島素對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的影響[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2003年01期

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6 常桂娟;胰島素抵抗的環(huán)境因素[J];現(xiàn)代診斷與治療;2004年02期

7 米杰 ,張力;胰島素抵抗[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

8 王繼旺,張素華,任偉,杜娟,陳靜,包柄楠,汪志紅,苗青;吸煙與胰島素抵抗的相關(guān)性調(diào)查與分析[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2004年08期

9 陽柳雪;劉紅;;可溶性腫瘤壞死因子受體2與胰島素抵抗[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)文摘.內(nèi)科學(xué);2004年01期

10 康艷明;陽躍忠;;胰島素抵抗與缺血性心腦血管病變[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)文摘.內(nèi)科學(xué);2004年02期

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2 ;胰島素抵抗，，怎么辦？[N];解放日?qǐng)?bào);2004年

3 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院老年病科副教授 陳化;什么是“胰島素抵抗”[N];健康報(bào);2001年

4 張家慶 （教授）;適度鍛煉身體改善胰島素抵抗[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2003年

5 本報(bào)記者 韓曉英;注射胰島素會(huì)成癮嗎[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2002年

6 張怡梅 劉 斌;惡性腫瘤與胰島素抵抗[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

7 健康時(shí)報(bào)特約記者 陳錦屏;胖人易發(fā)“胰島素抵抗”[N];健康時(shí)報(bào);2007年

8 殳雪怡;胰島素抵抗 有辦法“抵抗”嗎[N];家庭醫(yī)生報(bào);2007年

9 劉文山;胰島素抵抗[N];家庭醫(yī)生報(bào);2007年

10 孟懷東;“致命四重奏”與胰島素抵抗[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

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