【摘要】：研究目的肥胖及其相關(guān)代謝紊亂疾病問題日益突出,目前缺少行之有效的減肥方法。人體內(nèi)的棕色脂肪組織因?yàn)榭梢源龠M(jìn)能量代謝,調(diào)節(jié)葡萄糖和脂質(zhì)水平,成為研究熱點(diǎn)。n-3和n-6多不飽和脂肪酸(PUFAs)能夠調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞分化和功能,改善肥胖。本研究旨在采用n-3系的二十二碳六烯酸(Docosahexaenoicacid,DHA)、二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA),以及 n-6 系的花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)處理各個(gè)階段的3T3-L1脂肪細(xì)胞,觀察其糖脂水平與棕色化相關(guān)標(biāo)志基因的表達(dá),以及線粒體數(shù)量變化,探討n-3、n-6兩類多不飽和脂肪酸對(duì)白色脂肪的棕色化作用及機(jī)制。研究方法采用濃度為10 μ和100 μM的DHA、EPA、AA分別處理3T3-L1各階段的脂肪細(xì)胞。用試劑盒檢測(cè)葡萄糖消耗量與甘油三酯水平,用Q-PCR和蛋白免疫印跡法檢測(cè)棕色化標(biāo)記基因的mRNA與蛋白表達(dá)量,,Q-PCR和Mito-Tracker Green染色法檢測(cè)線粒體含量。結(jié)果DHA處理3T3-L1前脂肪細(xì)胞2天后,出現(xiàn)了白色脂肪棕色化的細(xì)胞表征。DHA和EPA處理處于分化階段的3T3-L1脂肪細(xì)胞8天后,棕色脂肪標(biāo)志性基因UCP1蛋白表達(dá)量顯著增加,線粒體含量和葡萄糖消耗量增加。100 μ作用濃度下,DHA處理組的3T3-L1脂肪細(xì)胞甘油三酯水平下降,EPA處理組的細(xì)胞甘油三酯水平升高。EPA和AA處理已經(jīng)完全分化成熟的脂肪細(xì)胞2天后,出現(xiàn)了棕色脂肪細(xì)胞表征,但是線粒體數(shù)目沒有變化。在3T3-L1細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中,DHA在分化早期促進(jìn)白色脂肪細(xì)胞棕色化,而EPA在分化后期促進(jìn)白色脂肪細(xì)胞棕色化。結(jié)論DHA、EPA和AA在10μM和1000μM濃度下均可以促進(jìn)不同階段的3T3-L1脂肪細(xì)胞獲得棕色脂肪細(xì)胞的表型,促進(jìn)其線粒體生成以及葡萄糖消耗。在合適時(shí)機(jī)補(bǔ)充膳食PUFAs可以促進(jìn)白色脂肪棕色化,可作為肥胖預(yù)防和控制的一個(gè)潛在靶標(biāo)。
[Abstract]:Objective the problem of obesity and related metabolic disorders is becoming more and more prominent, and there is a lack of effective weight loss methods. Brown adipose tissue can promote energy metabolism, regulate glucose and lipid levels, and become a research hotspot. N-3 and n-6 polyunsaturated fatty acid (PUFAs) can regulate adipocyte differentiation and function, and improve obesity. The aim of this study was to observe the expression of glycolipid level and browning related marker genes in 3T3-L1 adipocytes treated with n-3 lines of 22 carbohexaenoic acid, Eicosapentaenoic acidaenoic acid and n-6 arachidonic acid. And the change of mitochondria number, the browning effect and mechanism of n-3 n-6 polyunsaturated fatty acids on white fat were discussed. Methods the adipocytes of 3T3-L1 were treated with 10 渭 M and 100 渭 M DHA EPAAA, respectively. Glucose consumption and triglyceride levels were measured by kit, mRNA and protein expression of brown labeled genes were detected by Q-PCR and Western blotting. Mitochondrial contents were detected by Q-PCR and Mito-Tracker Green staining. Results after 2 days of 3T3-L1 treatment with DHA, the brown cells with white fat were browned. DHA and 3T3-L1 adipocytes in differentiation stage were treated with EPA for 8 days. The expression of UCP1 protein of brown fat marker gene was significantly increased. The decrease of triglyceride level in 3T3-L1 adipocytes in DHA treatment group. The level of triglyceride in 3T3-L1 adipocytes was increased. Brown fat cells were present, but the number of mitochondria did not change. During the differentiation of 3T3-L1 cells, DHA promoted the browning of white adipocytes at the early stage of differentiation, while EPA promoted the browning of white adipocytes at the later stage of differentiation. Conclusion at 10 渭 M and 1000 渭 M, both DHAA and AA can promote the formation of brown adipocytes, mitochondrial formation and glucose consumption in 3T3-L1 adipocytes at different stages. Dietary PUFAs supplementation at the appropriate time can promote the browning of white fat and can be used as a potential target for the prevention and control of obesity.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R589.2

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本文編號(hào)：2172105