【摘要】：背景:骨形態(tài)發(fā)生蛋白2既可以促進(jìn)成骨,在不同濃度范圍又可以調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化的趨勢。因此,骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后,如果能夠發(fā)現(xiàn)抑制其成脂的濃度范圍,對于防治骨質(zhì)疏松癥具有重要意義。目的:確定骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化的優(yōu)選濃度。方法:(1)抽取大鼠股骨及脛骨的骨髓,體外用貼壁培養(yǎng)法獲得原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測第2代細(xì)胞表面抗原標(biāo)志物;(2)取第2及3代細(xì)胞,分為0.5,5,50,100,200μg/L骨形態(tài)發(fā)生蛋白2組及對照組。0.5,5,50,100,200μg/L骨形態(tài)發(fā)生蛋白2組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞用成脂誘導(dǎo)液誘導(dǎo)3 d后,加入0.5,5,50,100,200μg/L骨形態(tài)發(fā)生蛋白2繼續(xù)誘導(dǎo)14 d;對照組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化3 d,使用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng),未加骨形態(tài)發(fā)生蛋白2處理。結(jié)果與結(jié)論:(1)流式細(xì)胞儀鑒定培養(yǎng)的細(xì)胞為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;(2)油紅O染色顯示,5-50μg/L骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)后,隨骨形態(tài)發(fā)生蛋白2質(zhì)量濃度的增加,脂滴數(shù)量增加;而100-200μg/L骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)17 d后,隨骨形態(tài)發(fā)生蛋白2質(zhì)量濃度的增加,脂滴數(shù)量減少。說明100μg/L骨形態(tài)發(fā)生蛋白2可以抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化,從而減少大鼠脂肪細(xì)胞的形成,可以作為抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化的優(yōu)選濃度。
[Abstract]:Background: bone morphogenetic protein 2 can promote osteogenesis and regulate the tendency of bone marrow mesenchymal stem cell adipogenesis in different concentration range. Therefore, bone morphogenetic protein-2 induced bone marrow mesenchymal stem cells, if the inhibition of its lipid concentration range can be found for the prevention and treatment of osteoporosis has important significance. Aim: to determine the optimal concentration of bone morphogenetic protein 2 (BMP 2) in inhibiting adipogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). Methods: (1) the bone marrow of rat femur and tibia were extracted, primary bone marrow mesenchymal stem cells were obtained by adherent culture in vitro, the surface antigen markers of the second generation cells were detected by flow cytometry, and the second and third passage cells were obtained. The bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were induced with adipogenic fluid for 3 days. Bone morphogenetic protein-2 (BMP 2) was added to 0.5 渭 g / L for 14 d, and bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were cultured on bone marrow mesenchymal stem cells medium for 3 days without bone morphogenetic protein 2 (BMP 2) treatment. Results and conclusion: (1) the cultured cells were identified as bone marrow mesenchymal stem cells by flow cytometry (FCM), (2) oil red O staining showed that the number of lipid droplets increased with the increase of mass concentration of bone morphogenetic protein 2 (BMP 2) after induction of bone morphogenetic protein 2 (BMP 2). However, after induction of 100-200 渭 g / L bone morphogenetic protein 2 for 17 days, the number of lipid droplets decreased with the increase of mass concentration of bone morphogenetic protein 2. The results showed that 100 渭 g / L BMP 2 could inhibit the adipogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells, thus reducing the adipocyte formation in rats, and could be used as the optimal concentration for inhibiting the adipogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells.
【作者單位】： 南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科;
【基金】：江西省衛(wèi)生廳科技計劃課題(20141044)~~
【分類號】：R580

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本文編號：2132636