本文選題：骨髓源間充質(zhì)干細(xì)胞 + 尼克酰胺　； 參考：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：目的：探討誘導(dǎo)BM-MSCs跨胚層分化為胰島樣結(jié)構(gòu)的方法；探究誘導(dǎo)BM-MSCs分化為胰島樣結(jié)構(gòu)的可行性,并初步建立相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)方法。方法：優(yōu)化BM-MSCs的培養(yǎng)體系,建立骨髓源間充質(zhì)干細(xì)胞系；選用第二代BM-MSCs分兩組誘導(dǎo)：Ⅱ尼克酰胺組,含10%FBS、10mM尼克酰胺的高糖DMEM液培養(yǎng)BM-MSCs;Ⅱ胰腺組織裂解液組：用胰腺組織裂解液配制條件培養(yǎng)液培養(yǎng)BM-MSCs。誘導(dǎo)2個(gè)月,觀察細(xì)胞形態(tài)變化,誘導(dǎo)后以雙硫腙染色對(duì)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行初步鑒定；RT-PCR檢測(cè)insulin基因的表達(dá),胰島素免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)細(xì)胞團(tuán)內(nèi)胰島素陽性細(xì)胞；Mallory染色區(qū)分細(xì)胞團(tuán)內(nèi)不同胰島細(xì)胞。結(jié)果：BM-MSCs集落分布,單個(gè)大核,折光透亮。在連續(xù)誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中,①尼克酰胺組：誘導(dǎo)10d出現(xiàn)細(xì)胞聚集；誘導(dǎo)19d聚集的細(xì)胞增多形成細(xì)胞團(tuán)；誘導(dǎo)的細(xì)胞團(tuán)表面未有被膜包裹；DTZ染色可見細(xì)胞團(tuán)中央部分染成棕紅色,RT-PCR證明誘導(dǎo)細(xì)胞insulin基因表達(dá)；Mallory染色僅見細(xì)胞團(tuán)內(nèi)淡黃色的類β細(xì)胞。②胰腺組織裂解液組：誘導(dǎo)31d細(xì)胞成團(tuán)；誘導(dǎo)47d形成有被膜包裹的細(xì)胞團(tuán)。DTZ染色可見細(xì)胞團(tuán)染色,其中大部分呈棕紅色,部分成猩紅色；RT-PCR證明誘導(dǎo)細(xì)胞insulin基因表達(dá),免疫組織化學(xué)染色可見棕色的胰島素陽性細(xì)胞,Mallory染色可見細(xì)胞團(tuán)周圍呈黃色的類β細(xì)胞及中央呈紅色的類α細(xì)胞。結(jié)論：適宜條件下,BM-MSCs可跨胚層分化形成胰島樣結(jié)構(gòu)。胰腺組織裂解液能更好的模擬微環(huán)境,誘導(dǎo)BM-MSCs形成由類Q細(xì)胞與類β細(xì)胞組成的,且有被膜包裹的胰島樣結(jié)構(gòu)。
[Abstract]:Objective: to explore the method of inducing BM-MSCs to differentiate into islet like structure, to explore the feasibility of inducing BM-MSCs to differentiate into islet like structure, and to establish some laboratory methods. Methods: the culture system of BM-MSCs was optimized to establish bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs), and the second generation BM-MSCs were divided into two groups: group 鈪，

本文編號(hào)：1995120