本文選題：紅斑狼瘡 + 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞　； 參考：《南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2016年11期

【摘要】：目的 :研究與系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell,Treg)功能密切相關(guān)的分子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(transforming growth factor,TGF-β)的轉(zhuǎn)錄、表達(dá)、分泌水平的異常。方法:分離正常人和SLE患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)和CD4+CD25+T細(xì)胞,以抗-CD3和抗-CD28刺激培養(yǎng)48 h,獲取細(xì)胞,以三色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+CD25+LAP+T及CD8+CD25+LAP+T細(xì)胞,分析各亞群細(xì)胞比值;提取總m RNA,q RT-PCR測(cè)定TGF-β1的表達(dá);收取上清用ELISA法檢測(cè)總TGF-β1和游離的活化TGF-β1水平。結(jié)果 :活動(dòng)性SLE患者CD4+T細(xì)胞中LAP+/CD4+T、CD25+LAP+/CD4+T、LAP+/CD4+CD25+比值較正常人顯著升高,抗-CD3、抗-CD28抗體刺激后LAP+/CD4+T、CD25+LAP+/CD4+T、LAP+/CD4+CD25+比值進(jìn)一步升高,與正常人比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);但均與疾病活動(dòng)度無(wú)顯著相關(guān)性;無(wú)論刺激與未刺激,SLE患者CD4+CD25+LAP+細(xì)胞中LAP染色的熒光強(qiáng)度亦高于相應(yīng)正常組;而抗-CD3、抗-CD28抗體刺激后SLE患者PBMC及CD4+CD25+T細(xì)胞培養(yǎng)上清中總TGF-β1和游離的活化TGF-β1水平均顯著低于正常人(P0.05);q RT-PCR證實(shí),受刺激后CD4+CD25+T細(xì)胞內(nèi)TGF-β1的m RNA轉(zhuǎn)錄水平低于正常人。結(jié)論:盡管活動(dòng)性SLE患者CD4+CD25+T細(xì)胞膜表面潛伏態(tài)TGF-β(LAP)的表達(dá)較正常人明顯增高,但其TGF-β表達(dá)依然存在缺陷,主要表現(xiàn)為TGF-β1的轉(zhuǎn)錄、分泌水平降低,游離的活化TGF-β1產(chǎn)生障礙,從而可能削弱了Treg細(xì)胞的免疫抑制作用。新鮮分離的以及受刺激后的CD4+CD25+T細(xì)胞LAP表達(dá)增高可能反映了活動(dòng)性SLE患者T細(xì)胞亞群的活化和CD4+CD25+LAP+Treg細(xì)胞的反應(yīng)性擴(kuò)增。
[Abstract]:Objective: to study the transcription, expression and secretion of transforming growth factor- 尾 (TGF- 尾) in regulatory T cells of patients with systemic lupus erythematosus (lupus erythematosus). Methods: peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and CD4 CD25 T cells were isolated from normal subjects and patients with SLE. The cells were cultured for 48 h after stimulation with anti-CD3 and anti-CD28. The CD4 CD25 LAP T and CD8 CD25 LAP T cells were detected by tricolor flow cytometry. The expression of TGF- 尾 1 was determined by total mRNAq RT-PCR, and the levels of total TGF- 尾 1 and free activated TGF- 尾 1 were detected by ELISA method in the supernatant. Results: the ratio of LAP / CD4 / CD25 LAP / CD4 TLAP / CD4 CD25 in CD4 T cells of active SLE patients was significantly higher than that of normal controls. The ratio of LAP / CD4 T T T CD 25 LAP / CD 4 TLAP / CD 4 CD25 was further increased after the stimulation of anti CD 3 and anti CD CD 28 antibodies. There was a significant difference between CD4 CD25 LAP cells and normal controls (P 0.05), but there was no significant correlation between LAP staining and disease activity. The fluorescence intensity of LAP staining in CD4 CD25 LAP cells of patients with or without stimulation was higher than that of normal controls. However, the levels of total TGF- 尾 1 and free activated TGF- 尾 1 in the supernatants of PBMC and CD4 CD25 T cells stimulated by anti-CD3 and anti-CD28 antibodies were significantly lower than those of normal controls (P 0.05 / Q RT-PCR). The m RNA transcription level of TGF- 尾 1 in CD4 CD25 T cells after stimulation was lower than that in normal controls. Conclusion: although the expression of latent TGF- 尾 LAPs on the surface of CD4 CD25 T cell membrane in active SLE patients is significantly higher than that in normal controls, the expression of TGF- 尾 is still defective, mainly due to the decrease of TGF- 尾 1 transcription and secretion, and the disturbance of free activation of TGF- 尾 1. This may weaken the immunosuppressive effect of Treg cells. The increased expression of LAP in freshly isolated and stimulated CD4 CD25 T cells may reflect the activation of T cell subsets and the reactive expansion of CD4 CD25 LAP Treg cells in active SLE patients.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)系;南京市紅十字血液中心;
【分類號(hào)】：R593.241

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本文編號(hào)：1951262