肉桂醛促進高糖條件下皮膚成纖維細胞遷移及機制研究
本文選題:肉桂醛 + 高糖; 參考:《第三軍醫(yī)大學學報》2017年05期
【摘要】:目的探討肉桂醛(cinnamic aldehyde,CA),核因子E2相關因子(nuclear factor erythroid2-related factor,NRF2)通路激動劑對高糖條件下成纖維細胞遷移的影響及可能機制。方法體外培養(yǎng)HS27細胞,分為正常對照組(NG,5.5 mmol/L)、高糖組(HG,30 mmol/L)、高糖(30 mmol/L)+肉桂醛(20μmol/L)組、高糖(30 mmol/L)+Con siRNA組、高糖(30 mmol/L)+NRF2 siRNA組。遷移實驗觀察CA對高糖條件下HS27遷移的影響。采用western blot分析CA干預后NRF2及下游HO-1,增殖和凋亡相關蛋白P21和P53的表達情況。2',7'-二氯熒光素二醋酸(DCF)法檢測CA對高糖條件下細胞內(nèi)活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平的影響。采用NRF2siRNA抑制NRF2通路,觀察HS27細胞遷移和氧化應激的變化。結果與正常對照組相比,HS27在高糖情況下,遷移能力明顯降低(P0.05),CA干預后,高糖對HS27遷移能力的抑制作用得到改善(P0.05)。進一步研究發(fā)現(xiàn),CA上調(diào)NRF2和HO-1,減輕高糖導致的ROS增加([(4 360 935±1 445 723)vs(1 982 673±208 109),P0.05])。然而,高糖條件下敲除NRF2后,細胞內(nèi)ROS產(chǎn)生進一步增多,并加劇對成纖維細胞遷移能力的抑制[(0.046±0.018)vs(0.318±0.032),P0.05]。結論 CA促進高糖情況下成纖維細胞遷移、緩解氧化應激損傷,并有可能部分依賴于NRF2通路激活。
[Abstract]:Objective to investigate the effect and possible mechanism of cinnamic factor erythroid2-related factor NRF2 pathway agonist on fibroblast migration under high glucose condition. Methods HS27 cells were cultured in vitro and divided into normal control group (5. 5 mmol / L), high glucose group (30 mmol / L) cinnamaldehyde (20 渭 mol / L), high glucose group (30 mmol / L) Con siRNA, and high glucose group (30 mmol / L) NRF2 siRNA. The effect of CA on HS27 migration under high glucose was observed. The expression of proliferative and apoptosis-related proteins P21 and p53 after CA intervention and its downstream HO-1 were analyzed by western blot. The effect of CA on the level of reactive oxygen speciesrose in cells under high glucose condition was detected by the method of DFC. NRF2siRNA was used to inhibit NRF2 pathway to observe the migration of HS27 cells and the changes of oxidative stress. Results compared with the control group, the migration ability of HS27 was significantly decreased after the intervention of P0.05 and CA, and the inhibitory effect of high glucose on the migration ability of HS27 was improved. Further study showed that CA upregulated NRF2 and HO-1, and alleviated the increase of ROS induced by high glucose ([4360935 鹵1 445 723)vs(1 982,673 鹵208.109] P 0.05). However, after knockout of NRF2 in high glucose condition, intracellular ROS production was further increased, and the inhibition of fibroblast migration was increased [0.046 鹵0.018)vs(0.318 鹵0.032]. Conclusion CA can promote the migration of fibroblasts and alleviate oxidative stress injury under high glucose, and it may be partly dependent on the activation of NRF2 pathway.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院內(nèi)分泌科;
【基金】:國家自然科學基金面上項目(81471039);國家自然科學基金青年科學基金項目(81500647) 重慶市集成示范計劃項目(2013jcsfc10001-5)~~
【分類號】:R285
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,本文編號:1896888
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